外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值与骨质疏松性股骨颈骨折患者的关系以及预后评估研究

目的:研究外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)与骨质疏松性股骨颈骨折之间的关系以及预后评估分析。方法:研究对象为2008~2017年在广州中医药大学第一附属医院就诊的102例骨质疏松性股骨颈骨折患者。回顾性分析进行了常规外周血检测的骨质疏松性股骨颈骨折患者的临床资料,根据原发性骨质疏松症诊断标准中的骨密度值,将患者分为3组:正常骨量组(T≥-1.0)、骨量减少组(-2.5<T<-1.0)和骨质疏松组(T≤-2.5),并且在术后随访患者中将接受内固定术者根据NLR值高低分为高NLR组(NLR>2.33)以及低NLR组(NLR≤2.33)。其中统计指标包括:患者的年龄、性别、身体质量指数(body mass index,BMI)等基本信息,骨折分型、外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值、骨密度(bone mineral density,BMD)水平以及血脂水平等,还对102例术后患者进行2年以上的随访并收集患者术后骨折愈合时间、并发症等预后康复信息,以观察外周血NLR与上述指标之间的关系。结果:经多组间方差分析(两组间比较的SNK-q检验)、单因素偏相关分析、多因素线性回归分析等统计方法分析得出,与骨量正常组以及骨量减少组分别进行两两比较,骨质疏松组患者中的年龄、三酰甘油以及NLR水平升高,BMD明显下降,而骨质疏松性股骨颈骨折患者BMD与NLR以及三酰甘油呈负相关(P<0.05);多因素线性回归分析中NLR和三酰甘油是骨质疏松性股骨颈患者BMD的主要影响因素(P<0.05);此外,行内固定治疗的患者中外周血NLR升高会增加术后股骨头坏死、骨折断端不愈合的风险以及延长术后功能恢复的时间。结论:骨质疏松性股骨颈骨折患者外周血NLR水平升高并与骨密度相关,提示外周血NLR可作为早期筛查和预防骨质疏松性股骨颈骨折的临床指标之一;此外,外周血NLR也是影响骨质疏松性股骨颈骨折预后和康复的主要因素。

股骨头坏死用药规律及机制:数据挖掘和网络药理学分析

背景:中医药物治疗股骨头坏死常作为辅助手段,然而其用药规律、组方原则及作用机制尚不清楚。目的:挖掘并分析广州中医药大学第一附属医院三骨科保髋病区治疗股骨头坏死的中药组方用药规律,并探讨潜在新方组合的作用机制。方法:收集2017年1月至2019年12月广州中医药大学第一附属医院三骨科保髋病区治疗股骨头坏死处方,通过中医传承辅助平台(V2.5)进行数据挖掘,分析处方药物的用药频次、药物关联,并得出潜在中药新方组合。运用TCMSP、String及KEGG数据库对“新处方”中药物靶标间相互作用关系进行分析,并分析所得的相关通路。结果与结论:①共筛选出126首处方,包含84味中药,演化得到4个潜在新方组合(处方1:桃仁-黄芪-牛膝-当归-独活;处方2:川芎-白芍-续断-白术;处方3:三七-茯苓-熟地-丹参-杜仲;处方4:红花-秦艽-补骨脂-党参);②筛选出潜在新方组合1(“新处方”)的主要化学成分有74种(如谷甾醇α1和赤霉素17等);③预测到“新处方”活性成分的作用靶标202个,映射后得出“新处方”治疗股骨头坏死121个潜在靶标(如JUN、AKT1、MAPK1、RELA和白细胞介素6等);④文章中的中药-疾病靶标涉及的KEGG通路主要包括MAPK信号通路、Toll样受体、核转录因子κB信号通路及缺氧诱导因子1信号通路;⑤通过上述数据分析得出,中医药治疗股骨头坏死用药以活血化瘀、滋肝益肾、补益气血为主,辅以通经络、祛风湿等药,“新处方”中药组合显示了多成分、多靶点的药物作用特点,其机制可能是通过参与促进血管生成和调节骨代谢等途径来调控股骨头坏死的发展。

RNA m^(6)A甲基化修饰参与及调控骨科相关疾病

背景:随着高通量测序技术的发展,研究发现骨髓间充质干细胞、成骨细胞、脂肪细胞、破骨细胞、软骨细胞和骨肉瘤细胞等均可检测到m^(6)A修饰的存在,m^(6)A修饰可通过调控细胞RNA水平的甲基化,影响相关基因的mRNA和(或)非编码RNA的翻译等过程,从而激活细胞信号转导通路,影响细胞的增殖、分化、迁移、侵袭、凋亡及DNA损伤修复等,进而调控骨骼发育、关节退变、骨折愈合及骨肿瘤的发生、发展等生理病理过程。目的:总结近年来m^(6)A修饰在骨质疏松症、骨关节炎等骨科疾病中的最新研究成果和作用机制,为开发骨科相关疾病的新型治疗策略提供启发。方法:以中文关键词“N6-甲基腺嘌呤,骨质疏松症,骨关节炎,骨科疾病”检索CNKI数据库,以英文关键词“m^(6)A,osteoporosis,osteoarthritis,orthopedic disease”检索PubMed数据库,全网检索自建库至2020年6月有关m^(6)A修饰在骨科疾病中研究成果的文献,严格按照纳入和排除标准筛选,最后选定61篇文献进行综述。结果与结论:①在骨质疏松症进展过程中,METTL3/m^(6)A介导的RNA甲基化以及FTO/m^(6)A介导的RNA去甲基化动态调控相关基因的表达,进一步影响相关信号通路的激活,影响骨髓间充质干细胞的成骨及成脂分化;②METTL3/m^(6)A通过调节软骨细胞中的核因子κB信号传导和细胞外基质合成,在骨关节炎进展中“扮演”了重要的角色;③METTL3/m^(6)A通过靶向调控成骨细胞相关的miR-7212-5p来抑制骨折愈合过程中的成骨机制;④METTL3通过调节淋巴增强因子1的m^(6)A水平从而激活Wnt/β-catenin信号以及通过调节ATAD2基因的m^(6)A甲基化来加速骨肉瘤的恶化;⑤在骨质疏松症、骨关节炎等骨科疾病中,m^(6)A修饰均参与了多系统疾病的进程,m^(6)A修饰的深入研究为进一步了解骨科相关疾病的发病机制提供了理论依据,并提供了基于表观遗传学基础的骨科疾病治疗思路以及参考依据。

射干苷抑制破骨细胞分化的作用与机制

背景:核因子κB受体激活因子配体介导的Calcium/NFATc1通路激活在破骨细胞分化中发挥重要作用。射干苷可通过激活雌激素受体达到雌激素样作用,但目前尚缺乏其对破骨细胞分化及功能影响的相关报道。目的:探讨射干苷对破骨细胞的作用及其机制。方法:体外培养小鼠骨髓巨噬细胞分化成熟后种入96孔板中(每孔为6×103个),分别加入5,10,20,30,40μmol/L的射干苷,观察对破骨细胞分化抑制作用,筛选出作用最强的射干苷浓度。分别以不同浓度的射干苷干预核因子κB受体激活因子配体诱导的破骨细胞体外分化过程,进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色,观察射干苷对破骨细胞形成和功能的影响。通过钙离子振荡实验、Western Blot及RT-qPCR等实验,观察Calcium/NFATc1信号通路中上下游基因和蛋白的表达情况。实验方案经广州中医药大学第一临床医学院动物实验伦理委员会批准。结果与结论:(1)射干苷可抑制破骨细胞形成,且抑制作用呈剂量依赖性,40μmol/L的射干苷对破骨细胞分化抑制作用最强;(2)射干苷可抑制与破骨细胞形成相关的Acp5(TRAcP)基因以及c-Fos、Integrinβ3蛋白的表达,同时抑制与骨吸收功能相关的Ctsk、基质金属蛋白酶9基因以及转录蛋白的表达;(3)射干苷可抑制钙离子信号通道的开放频率及强度、抑制Ctr(Calcitonin Receptor)、Nfatc1基因及转录蛋白的表达;(4)结果说明:射干苷可通过核因子κB受体激活因子配体诱导的钙离子信号通道抑制Nfatc1基因及转录蛋白的表达,从而抑制破骨细胞的形成及骨吸收功能。