靶向MELK抑制食管鳞癌增殖与侵袭能力机制探讨

目的探讨母体胚胎亮氨酸拉链激酶(MELK)在食管鳞癌组织中的表达及其对食管鳞癌细胞增殖与侵袭能力的机制。方法免疫组化及蛋白质印迹法检测食管鳞癌癌组织与癌旁组织中MELK的表达;对食管鳞癌细胞株ECA109和KYSE510采用划痕实验和CCK8增殖实验,研究敲低MELK基因后食管鳞癌细胞株的侵袭能力、增殖能力及加入MELK靶向抑制剂OTS167后食管鳞癌细胞株的增殖能力。结果免疫组化和蛋白质印迹检测结果显示,MELK在食管鳞癌组织中高表达,而在癌旁组织或正常食管鳞状上皮组织不表达;划痕实验结果显示,在食管鳞癌细胞株ECA109和KYSE510中敲低MELK基因12 h后,食管鳞癌细胞ECA109和KYSE510实验组肿瘤细胞划痕愈合率均下降,但差异无统计学意义。敲低MELK基因36 h后,食管鳞癌细胞ECA109实验组肿瘤细胞划痕愈合率为(6.42±1.21)%,比对照组的(10.05±2.35)%明显下降,差异有统计学意义,t=4.540,P=0.038;食管鳞癌细胞KYSE510实验组肿瘤细胞划痕愈合率为(6.59±0.67)%,比对照组的(9.00±1.64)%明显下降,差异有统计学意义,t=4.720,P=0.006。CCK8细胞增殖实验结果显示,敲低MELK后,第4天食管鳞癌细胞ECA109实验组肿瘤细胞增殖能力D(450 nm)值为2.07±0.02,比对照组的2.57±0.03明显降低,差异有统计学意义,t=31.120,P=0.001;KYSE510实验组肿瘤细胞增殖能力D(450 nm)值为2.13±0.11,比对照组的2.38±0.02明显降低,差异有统计学意义,t=3.577,P=0.020。在食管鳞癌细胞株ECA109和KYSE510中加入MELK靶向抑制OTSSP167250μmol/L第5天后,食管鳞癌细胞ECA109实验组肿瘤细胞增殖能力D(450 nm)值为0.68±0.01,比对照组的2.67±0.14明显降低,差异有统计学意义,t=36.120,P=0.001;食管鳞癌细胞KYSE510实验组肿瘤细胞增殖能力D(450 nm)值为0.33±0.01,比对照组的2.78±0.09明显降低,差异有统计学意义,t=45.780,P=0.001。结论MELK在食管鳞癌中高表达,且起到促进肿瘤细胞的侵袭及增殖能力,而MELK也可以作为食管鳞癌的靶向治疗靶点之一。