四十载青蒿研究推中国方案,中医药智慧为全球健康建新功

疟疾仍是当今全球三大传染病之一。据世界卫生组织(WHO)2019年《世界疟疾报告》,2018年全球疟疾病例2.28亿,导致40.5万人死亡。青蒿素是祖国医学献给世界人民的瑰宝。广东是青蒿抗疟的发源地,更是当今我国青蒿素产业化和国际化的领头羊。广州中医药大学是20世纪70年代开展青蒿素抗疟研究国家战略的主要参与单位,其坚持青蒿素抗疟研究40余年,也是我国现存唯一坚持在东南亚、非洲、南大洋洲等疟疾流行地区开展青蒿素抗疟临床研究的团队。其自主研发的青蒿素复方被WHO《疟疾治疗指南》收录,青蒿素哌喹片具有自主知识产权,并获40个国家专利保护,销往20多个国家。

双氢青蒿素干预结直肠癌模型动物肿瘤生长的实验研究

【目的】观察双氢青蒿素(DHA)对结直肠癌模型动物肿瘤生长的影响。【方法】选用SPF级BALB/c裸鼠,背部皮下接种结直肠癌LoVo细胞悬液复制结直肠癌模型;造模成功裸鼠随机分成5组:模型对照组,5-FU组(腹腔注射5-FU20 mg.kg-1.d-1,共5 d),DHA高、中、低剂量组(分别按120、60、30 mg.kg-1.d-1剂量灌胃给药)。14 d后,检测活体肿瘤及解剖剥离后裸瘤体积、平均瘤体质量、肿瘤生长速率和抑瘤率。【结果】治疗后DHA各给药组及5-FU组活体肿瘤的体积及肿瘤生长速率均减少,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.01);5-FU组及DHA高、中剂量组的裸瘤体积显著小于模型组(P<0.05或P<0.01);各给药组瘤体质量显著低于模型组(均P<0.05);DHA高、中剂量组的抑瘤率显著高于5-FU组(P<0.05),但DHA低剂量组抑癌率显著低于5-FU组(P<0.05)。【结论】DHA对结直肠癌模型动物肿瘤生长具有一定的抑制作用。

青蒿素类复方制剂溶出度的研究

目的:建立青蒿素类复方制剂中青蒿素溶出度测定方法。方法:溶出度测定方法是以20%乙醇溶液为溶剂,转速为100 r/min,取样时间为45 min,测定波长(λ)为292 nm。结果:在2～10μg/mL范围内线性关系良好,r=0.99992(n=5),准确度试验(n=9)平均回收率为99.6%,RSD为0.70%。结论:通过专属性试验、精密度试验、线性试验等各项考察,证明该方法对复方制剂中的青蒿素类溶出度测定是可行的,从而能直接准确测定复方制剂中青蒿素的溶出量,操作简便、快捷。

青蒿醇提物对H_(22)肝癌小鼠的抑瘤作用研究

目的:观察青蒿醇提物对H22肝癌小鼠的体内抑瘤作用。方法:取H22肝癌细胞接种于小鼠右腋皮下,随机分为模型对照组、5-氟尿嘧啶组(5-FU)及青蒿醇提物125 mg/(kg.d)组、500 mg/(kg.d)组,5-FU组肌肉注射给药,其余各组灌胃给药。连续给药8 d后,剖瘤称取质量,计算抑瘤率;利用高效液相色谱仪测定青蒿醇提物中青蒿素含量。结果:与模型对照组比较,青蒿醇提物各剂量组均不同程度的抑制肿瘤生长(P<0.01),青蒿醇提物125 mg/(kg.d)组和青蒿醇提物500 mg/(kg.d)组的抑瘤率分别为54.6%、50.6%;本实验青蒿醇提物中青蒿素含量为0.02%,而在青蒿素抗H22小鼠肝癌试验中,青蒿素在剂量为10 mg/(kg.d)时,对H22小鼠肝癌已没有明显的抑制作用。结论:青蒿醇提物对肝癌有明显的抑制作用;除青蒿素以外,中药青蒿中可能存在其它的抗肿瘤成分。

以合适的种源栽培高产青蒿的技术研究

目的：本研究通过不同种源的青蒿种植栽培，从播种至生育期开始观察、比较，寻找出青蒿种植栽培技术措施。方法：利用不同地区的青蒿种源从选种至播种、移栽、不同苗龄移栽、青蒿摘尖等试验。结果：经野生驯化后的种源选育栽培。育苗用种以亩100g较合适，2月播种，4月移栽，移栽至大田80天摘尖可提高产量。结论：青蒿应野生驯化后选育留种栽培，每亩用种100g，2月播种，4月栽培，移栽后约80天摘尖，100—110天采收，此时青蒿叶中的青蒿素最高。这样，就能促进青蒿生物量的提高和青蒿素的含量。

青蒿琥酯对HAART后免疫重建不良HIV/AIDS患者免疫功能和肠道菌群影响的研究

目的:探索青蒿琥酯对接受高效抗逆转录病毒疗法(HAART)后免疫重建不良的艾滋病病毒(HIV)感染者/艾滋病(AIDS)患者(简称HIV/AIDS患者)免疫功能及肠道菌群的影响。方法:采用前后自身对照的研究方法,流式细胞仪检测CD4^(+)T、CD4^(+)CD45RA^(+)T、CD4^(+)CD45RO^(+)T、CD8^(+)T、CD4^(+)CD38^(+)/CD3^(+)、CD4^(+)CD28^(+)/CD3^(+)、CD4^(+)CD25^(+)/CD3^(+)、CD8^(+)CD38^(+)/CD3^(+)、CD4^(+)Ki67/CD4^(+)、CD4^(+)Ki67/CD8^(+)、早期凋亡细胞/CD3^(+)、早期凋亡细胞/CD4^(+)、早期凋亡细胞/CD8^(+);16S rDNA高通量测序技术检测粪便菌群多样性、物种数量与群落组成及物种丰度差异。结果:与基线相比,服用青蒿琥酯24周后CD4^(+)、CD4^(+)CD45RA^(+)、CD4^(+)CD45RO^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞均有所上升,但差异无统计学意义(P>0.05);服用青蒿琥酯24周后CD4^(+)CD38^(+)/CD3^(+)、CD4^(+)CD28^(+)/CD3^(+)、CD4^(+)CD25^(+)/CD3^(+)、CD8^(+)CD38^(+)/CD3^(+)、CD4^(+)Ki67/CD4^(+)、CD4^(+)Ki67/CD8^(+)、早期凋亡细胞/CD3^(+)、早期凋亡细胞/CD4^(+)、早期凋亡细胞/CD8^(+)下降,其中早期凋亡细胞/CD4^(+)明显下降(P<0.01);服用青蒿琥酯24周后各多样性指数和菌落结构均未见显著差异,疣菌门显著增多(P<0.05)。结论:青蒿琥酯片对HAART后免疫重建不良患者以50 mg/d,每日2次的剂量干预24周后,有效降低了CD4^(+)T淋巴细胞早期凋亡的水平;另外,青蒿琥酯可能会带来肠道共生菌疣菌门(Verrucomicrobiota)的增多。

广西甜茶提取物体内抗肿瘤实验研究初探

目的探讨广西甜茶对小鼠肉瘤S180与肝癌H22移植性肿瘤的作用。方法广西甜茶以50%的乙醇提取制得提取物。分别考察提取物对小鼠肉瘤S180和小鼠肝癌H22移植瘤的作用。取肉瘤S180细胞/肝癌H22细胞分别接种于小鼠右前肢腋皮下,随机分为模型对照组、环磷酰胺(CTX)组及甜茶提取物低、中、高(1、3、9 g.kg-1.d-1)3个剂量组。CTX组按20 mg.kg-1.d-1腹腔注射给药,其余各组均灌胃给药,连续给药10 d后,剥离瘤体并称质量,计算抑瘤率,观察体质量、脾脏及胸腺的变化。结果甜茶提取物低、中、高剂量组均对小鼠肉瘤S180或肝癌H22移植瘤有不同程度的抑制作用,其中高剂量组对2种瘤体的抑制作用均显著(P<0.01),且对小鼠体质量、脾脏及胸腺质量均无明显影响。结论广西甜茶提取物对小鼠肉瘤S180与肝癌H22有较明显的体内抑制作用。

超声波辅助农杆菌介导法转化鱼腥草的初步研究

应用超声波直接转化法、农杆菌介导转化法、恒定频率的超声波仪处理植物15 min后再用农杆菌介导法侵染植物和在农杆菌侵染过程中辅助以超声波处理10 s 4种方法对鱼腥草进行转基因研究,结果显示:上述4种转化法对gus基因最大瞬时表达率依次为47%、60%、80%和75%。结论:用恒定频率的超声波仪处理植物15 min后再用农杆菌介导法侵染植物和在农杆菌侵染过程中辅助以超声波处理10 s两种转化法gus基因的瞬时表达率最高,说明超声波辅助农杆菌介导遗传转化方法是一种高效的鱼腥草转基因方法,它实现了外源基因在植物中的高效表达。

青蒿中青蒿素提取工艺的优化及含量测定

目的优化青蒿中青蒿素的提取工艺,并为工业化提取青蒿素建立快速测定原料青蒿中青蒿素的含量测定方法。方法使用超声提取法,采用正交设计法优化提取工艺,制得样品溶液;含量测定采用Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(体积比68∶32),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为210 nm。结果青蒿素在1～40μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率为98.59%,RSD值为1.34%(n=6)。结论本提取工艺简便易行;含量测定方法简便、准确、重复性好,适用于青蒿素工业化提取原料的质量控制。

口服青蒿素哌喹片在中国健康人体的耐受性

目的在中国健康成年志愿者中评价口服青蒿素哌喹片(抗疟药)的耐受性。方法用随机双盲平行组设计,筛选健康志愿者26名,观察药物不良反应及临床症状、体征、实验室指标变化,并进行数据统计处理。结果各组服药后,实验室各项检查和心电图检查,均未见异常改变;若超过推荐临床剂量,则出现头晕、嗜睡、脸麻等自限性症状;但未发现严重不良事件。结论健康受试者对青蒿素哌喹2片临床推荐剂量有良好的耐受性。

UV法测定青蒿琥酯软胶囊中青蒿琥酯的含量

目的:建立青蒿琥酯软胶囊中青蒿琥酯含量测定的方法。方法:采用UV法,以5%NaHCO3溶液为空白溶剂,检测波长为289 nm。结果:青蒿琥酯在12.8～64.0μg/mL范围内线性良好,r=0.99996(n=5),平均回收率为100.1%,RSD为0.54%。结论:该法操作简便、快捷、准确,适用于青蒿琥酯软胶囊中青蒿琥酯的含量测定。

荆防感冒颗粒解热镇痛与抗炎作用的实验研究

目的:观察荆防感冒颗粒的解热、镇痛与抗炎、作用。方法:采用干酵母致大鼠发热进行解热试验;用小鼠热板法、醋酸致扭体法进行镇痛试验;用角叉菜胶致大鼠足跖肿胀法、二甲苯所致小鼠耳廓肿胀法及对小鼠毛细血管通透性测定法观察抗炎作用。结果:荆防感冒颗粒对干酵母致大鼠体温升高有明显的抑制作用(P<0.05,P<0.01),明显延长小鼠热板致痛反应的痛阈值(P<0.05,P<0.01),减少醋酸所致扭体次数(P<0.01),显著抑制角叉菜胶所致大鼠足跖、二甲苯所致小鼠耳廓肿胀(P<0.05,P<0.01),并明显抑制毛细血管通透性(P<0.05,P<0.01)。结论:荆防感冒颗粒具有解热、镇痛、抗炎作用。

含与不含甲氧苄啶的两个双氢青蒿素复方治疗恶性疟的临床对照试验

【目的】比较双氢青蒿素的两个复方——Artecom(含双氢青蒿素、磷酸哌喹和甲氧苄啶)与Artekin(仅含双氢青蒿素和磷酸哌喹)的疗效与安全性,研究甲氧苄啶在复方中的作用。【方法】Artecom和Artekin两组分别纳入37例和47例无并发症恶性疟病人,两组病人分别服用Artecom与Artekin 8片,按不同年龄及时间给药,2 d为1个疗程。住院治疗观察患者的平均退热时间、平均原虫转阴时间共7 d,并于出院后随访至第28天,计算治愈率和原虫复燃率。【结果】两组临床症状均得到迅速控制。Artecom和Artekin治疗的平均退热时间分别为(19.3±17.0)h和(15.1±15.7)h,平均原虫转阴时间分别为(31.8±10.8)h和(31.5±11.0)h,两组差异无统计学意义(P>0.05);两组28 d治愈率均为100%,复燃率均为0,差异也无统计学意义(P>0.05)。但Artekin的不良反应发生率相对较低。【结论】含甲氧苄啶的Artecom在疗效上与不含甲氧苄啶的Artekin相似,但不良反应的出现以前者较突出,故推荐临床使用Artekin。

青蒿琥酯肝动脉灌注对原发性肝癌患者免疫功能的影响

目的观察青蒿琥酯介入治疗原发性肝癌的抑瘤效果和对患者免疫功能的影响。方法选取原发性肝癌患者60例,随机分为治疗组30例和对照组30例。治疗组予青蒿琥酯+西药灌注化疗栓塞;对照组予单纯西药灌注化疗栓塞。具体给药方案2组均为吡柔比星(THP)50 mg、顺铂针(DDP)10 mg、丝裂霉素(MMC)10 mg和碘油20 mL;治疗组加青蒿琥酯120 mg,经肝肿瘤区靶动脉注药,1次为1个疗程。2组均给予必要的一般输液和对症治疗。1个疗程后观察2组瘤体、AFP、淋巴细胞亚群及肝功能、肾功能、白细胞的变化。结果治疗组在提高机体免疫力方面明显优于对照组(P均<0.05)。在缩小瘤体、降低AFP方面2组大致相似(P均>0.05)。在介入不良反应方面,2组未见明显差异(P>0.05)。结论青蒿琥酯联合介入治疗能提高原发性肝癌患者的机体免疫力。

阴立爽洗剂制备工艺的研究

目的:研究阴立爽洗剂的制备工艺。方法:对组方中蛇床子、花椒、鹤虱三味药材,以水蒸气蒸馏法提取其中挥发油成分;采用正交试验方法L9(34),以挥发油提取率为量化考察指标,对浸泡时间、加水倍数及提取时间等三个因素进行考察,优选挥发油提取工艺;将上述药材残渣与合并川黄柏、苦参、百部、苦楝皮、白鲜皮、地肤子、冰片等余下药材进行水提醇沉,采用正交试验方法L9(34),以高效液相色谱法测定盐酸小檗碱的含量为量化考察指标,对加水倍数、煎煮时间、煎煮次数及醇沉浓度等四个因素进行考察,优选水提醇沉提取工艺。结果:挥发油的最佳提取工艺为A2B3C3,即加水倍数为10倍,浸泡时间为1.5 h,提取时间为6 h;水提醇沉工艺的最佳提取工艺为E1F2G2H3,即加水倍数为10倍,煎煮次数为2次,煎煮时间为2 h/次,醇沉浓度为70%。结论:该工艺稳定、可行,可为阴立爽洗剂的规范化生产提供理论依据。

姜黄、生姜组方抑制幼龄大鼠前列腺生长的作用研究

目的观察姜黄、生姜组方乙醇提取物对正常幼龄大鼠前列腺生长的影响。方法将30只大鼠随机分为正常组(A组)、己烯雌酚组(B组)、姜黄生姜组(C组)、姜黄生姜蒲黄南瓜籽组(D组)、蒲黄南瓜籽组(E组),每组6只。除A组及B组外,C、D、E组分别饲以混有相应组乙醇提取物的饲料(10 g/d);B组每次按1.0 mg/kg体质量皮下注射己烯雌酚注射液,每周2次,连续3周,上述各组与A组均自由进食,连续3周。于末次给药24 h后处死动物,分离前列腺各叶、精囊腺和睾丸,分别称量,计算各腺体指数;并检测各组大鼠血清酸性磷酸酶水平。结果C组大鼠的前列腺背叶、侧叶、腹叶指数与A组相比减小,其中侧叶、背叶指数显著减小(P均<0.01),而睾丸指数区别不明显;D组前列腺背叶、侧叶、腹叶指数均减小,睾丸质量减轻。结论姜黄、生姜组方乙醇提取物能有效地降低大鼠前列腺的质量,对睾丸的生长无明显影响。

差光谱双波长分光光度法测定复方双氢青蒿素片中双氢青蒿素的含量

目的：建立复方双氢青蒿素片中双氢青蒿素含量测定的方法。方法：采用紫外分光光度法的专属性试验、准确度试验、线性试验、精密度试验等方法学研究,建立紫外分光光度法测定双氢青蒿素含量的方法,测定波长为250 nm,参比波长为273.5 nm。结果：双氢青蒿素测定的线性方程为：C=-0.10721＋56.3438△A,r2=0.99998,线性范围为4~12μg/mL;准确度试验（n=9）平均回收率为99.7%,RSD为1.47%。结论：双波长分光光度法可不经分离,能消除甲氧芐啶和磷酸哌喹的干扰,从而直接测定复方制剂中双氢青蒿素的含量,该操作简便、快捷、准确。

银翘清感片中薄荷、荆芥穗挥发油β-环糊精包合的工艺研究

目的:研究银翘清感片中β-环糊精包合薄荷、荆芥穗挥发油的最佳工艺。方法:采用饱和水溶液法制备包合物,用L(934)正交试验法,考察β-环糊精与挥发油的配比、包合温度、包合时间三个因素对挥发油利用率、包合物含油率的影响。结果:最佳包合工艺为,挥发油与环糊精的投料量比为1:8(ml/g),包合温度40℃,包合时间3h。结论:优选的包合工艺操作简便、工艺稳定,可用于大生产。

基于正交试验设计的黄芩苷微丸制备工艺研究

目的优选黄芩苷微丸的制备工艺。方法采用正交试验设计法,考察挤出速度、滚圆速度、滚圆时间对黄芩苷微丸的影响。结果所制备的微丸圆整度好,大小均匀;最佳制备工艺为挤出速度35Hz,滚圆速度为45Hz,滚圆时间为6min,体外溶出度在30min内达到80%以上。结论所优选的制备工艺简单易行,所制备的微丸释放效果良好。

三种方法测定青蒿素磷酸伯氨喹片中磷酸伯氨喹含量的比较

在疟疾治疗中,经常以青蒿素配伍磷酸伯氨喹治疗间日疟、三日疟以及恶性疟等疟疾,效果显著,其中磷酸伯氨喹在联合治疗效果中起到重要作用。中国药典采用电位滴定法（磷酸伯氨喹）和永停滴定法（磷酸伯氨喹片）测定磷酸伯氨喹含量。本文通过不同方法测定青蒿素磷酸伯氨喹片（简称青伯片）中磷酸伯氨喹的含量，