幽门螺杆菌细胞毒素促进胃黏膜分泌白介素8作用

目的:探讨细胞因子在幽门螺杆菌(H.pylori)免疫病理机制中的作用.方法:48例患者(慢性浅表性胃炎37例,十二指肠溃疡(DU)11例,其中男性31例,年龄21-63岁)胃镜诊断明确后取胃窦及胃体活检,用于H.pylori诊断及体外组织培养.H.pylori诊断采用快速尿素酶试验、H.pylori培养及Warthin-Starry银染色,3项检查中任2项结果阳性诊断为H.pylori阳性.3块胃窦活检组织各加1mLRPMI1640,50mL·L-1CO2和37℃培养24h,ELISA法测上清中白介素(IL)-6,IL-8及肿瘤坏死因子(TNF)-α;Lowry改良法测活检组织蛋白含量.另8例RPMI1640中加入H.pylori细胞空泡毒素(VacA).结果以每克蛋白中ng(ng·g-1)或mg(μg·g-1)表示.结果:H.pylori阳性率69%.H.pylori阳性者胃黏膜培养上清中IL-6,IL-8和TNF-α含量均显著高于H.pylori阴性者,其中9例DU患者的IL-8含量为53(18-96)μg·g-1,显著高于慢性胃炎者的36(7-84)μg·g-1(P<0.01).培养液加入VacA后,IL-8的分泌量明显增高(50±38μg·g-1vs68±30μg·g-1,P<0.01).TNF-α的含量虽升高,但无显著差别,对IL-6的含量无影响.IL-8的含量与炎症程度及活动性显著相关(r=0.98,P<0.0025),IL-6和TNF-α的含量与炎症程度无明显关系(r=-0.26和-0.28,P>0.25),但活动性炎时高于非活动性炎者.结论:结果提示IL-8与炎细胞浸润密切相关,H.pylori细胞毒素对黏膜细胞因子的分泌有促进作用.

高糖摄入对大鼠11β2型羟化固醇脱氢酶及血压的影响

目的 :验证长期摄入高糖对大鼠血管 11β2型羟化固醇脱氢酶及血压的影响并探讨其机制。 方法 :40只雄性Wistar大鼠随机分为 4组 :对照组 (10只 ) ,其它 3组 (各 10只 )分别给予葡萄糖 15 0g/(kg·d) (高糖 1组 ) ,2 5 0g/(kg·d) (高糖 2组 )和 3 5 0g/(kg·d) (高糖 3组 )共 3个月。分别于 1个月、 2个月和 3个月末测尾动脉血压 ,肠系膜动脉对去甲肾上腺素的加压反应 ,肠系膜血管网离体灌注液中皮质醇及醛固酮的含量 ,以及通过逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)观察主动脉 11β2型羟化固醇脱氢酶及醛固酮合酶信使核糖核酸 (mRNA)表达的变化。 结果 :与对照组比较①长期摄入高糖大鼠动脉血压 1个月时已经升高 ,3个月末仍升高 (P <0 0 1) ;②长期摄入高糖大鼠离体肠系膜动脉对去甲肾上腺素反应的最高灌注压升高 (P <0 0 1) ;③长期摄入高糖大鼠离体肠系膜血管网分泌醛固酮减少 ,分泌皮质醇增多 (P <0 0 1) ;④长期摄入高糖大鼠主动脉 11β2型羟化固醇脱氢酶及醛固酮合酶信使核糖核酸表达降低。 结论 :长期摄入高糖抑制 11β2型羟化固醇脱氢酶及醛固酮合酶信使核糖核酸表达、增高血管合成皮质醇、减低血管合成醛固酮、增加血管对去甲肾上腺素的反应并可引起血压升高 ,可能在高血压发病机制中起?

人血管内皮生长因子在毕赤酵母菌中的表达和鉴定

目的 研究人血管内皮生长因子 (hVEGF16 5 )基因在Pichia .pastoris酵母中的表达 ,获得高效表达的具有生物学活性的重组VEGF16 5。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)扩增hVEGF16 5基因 ,经DNA序列分析后 ,插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichia .pastoris酵母载体中 ,构建重组表达质粒 pPIC9K hVEGF16 5 ,转化酵母宿主菌KM 71,筛选多拷贝整合转化子 ,摇瓶培养 ,1%甲醇诱导表达。结果 SDS PAGE分析显示 ,诱导 4d的培养上清中hVEGF16 5表达量达上清总蛋白的 30 %以上。ELISA及Westernblot实验表明 ,表达产物具有良好的抗原性和特异性。生物学活性检测证实其具有刺激HUVEC增殖的功能。结论 在Pichia .pastoris表达系统中实现了hVEGF16