实时荧光定量聚合酶链反应检测解脲支原体感染

目的 采用实时荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)技术 ,准确定量检测待检标本中解脲支原体 (UU )的感染状况。方法 采用实时FQ PCR技术 ,检测标本 765份 ,并用常规PCR技术 ,对比检测了 85例。结果 FQ PCR检测的 765份标本 ,UU DNA阳性 2 79份 ,阳性率 3 6.5 % ,其DNA平均拷贝数为 2 .4× 10 4 。 3 8例阳性患者治疗 2周内复查 ,转阴率为 44.7% ,治疗 3周后复查 ,转阴率 76.0 % (P <0 .0 0 5 )。常规PCR结果重复检测时 ,2 5例阳性者中 2例变为阴性 ,而 60例阴性者中 4例变为阳性。FQ PCR结果重复时完全吻合。结论 实时FQ PCR检测UU是一个较好的方法。

荧光定量聚合酶链反应检测EB病毒感染

目的 建立检测EBV感染的新方法并观察EBV与鼻咽癌的关系。方法 鼻咽部活检组织和石蜡包埋标本 6 6例 ,采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)和原位杂交 (ISH)两种方法检测EBV ,其检测结果与病理诊断对照。结果 FQ PCR检测EBV DNA阴性 5 2例 ,其中 5 1例为炎性病变 ,另 1例为腺癌 ;EBV DNA阳性 14例 ,其中 13例为鳞状细胞癌 ,另 1例虽为炎症 ,但部分上皮细胞呈不典型增生。ISH检测EBV阴性 4 9例 ,其中 4 7例为炎性病变 ,2例为癌。EBV阳性 17例 ,其中 12例为癌 ,5例为炎性病变。FQ PCR和ISH检测EBV结果 ,经卡方检测差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 EBV感染与鼻咽癌有高度相关性。FQ PCR检测EBV具有方法简单、快速。

荧光定量聚合酶链反应检测解脲支原体感染的临床意义

目的 采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)技术 ,准确定量检测待检标本中解脲支原体 (UU)的感染状况。方法 采用FQ -PCR技术 ,检测男女生殖道标本 76 5份 ,并同时用常规PCR技术 ,对比检测了 85例。结果 FQ -PCR检测76 5份标本 ,UU -DNA阳性 2 79份 ,阳性率 36 .5 % ,其DNA平均拷贝数为 2 .4× 10 4。 38例阳性患者治疗两周内复查 ,转阴率仅为 4 4 .7% ,治疗 3w后复查 ,转阴率达 76 % (P <0 .0 0 5 )。常规PCR结果重复检测时 ,2 5例阳性中 2例变为阴性 ,而 6 0例阴性中 4例变为阳性。FQ -PCR结果重复时完全吻合。结论 FQ -PCR检测UU ,具有快速、特异性高、定量准确等优点 ,并可为临床评价疗效提供依据。

荧光定量PCR与ELISA法检测HBV-DNA结果分析

目的 :应用荧光定量PCR方法精确检测HBV -DNA的拷贝数 ,为临床判断病毒复制程度提供指标 ;对比分析荧光定量PCR方法和ELISA方法检测HBV -DNA的结果。方法 :用荧光定量PCR法检测 10 14例用ELISA法诊断为乙型肝炎病人的血清HBV -DNA拷贝数。结果 :10 14例病人中 ,病毒拷贝数≥ 1× 10 5的 4 99例 ,阳性率4 9.2 % ;HBeAg阳性患者的HBV -DNA拷贝数≥ 1× 10 5的阳性率显著高于HBeAg阴性患者。结论 :荧光定量PCR检测HBV病毒复制情况结果准确 ,对临床工作指导意义更大 ;HBeAg是一项重要指标。

荧光定量PCR的临床应用

采用荧光定量PCR检测技术 ,对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒五个项目的定量测定 ,发现该方法具有技术操作简便、快速、结果判断客观、重复性能好、特异性更强和定量范围宽等优点。对于病原体感染的早期确诊、治疗期间疗效评价、感染人群的普查以及感染源的监测均具有很高的实用价值 ,可取代定性的PCR而成为常规的检测技术。

脊髓性肌萎缩临床表型与SMN2基因拷贝数变化的相关性研究

目的探讨脊髓性肌萎缩（spinal muscular atrophy，SMA）的临床表型与运动神经元生存基因（survival motor neuron，SMN）拷贝数变化之间是否存在相关性。方法应用TaqMan技术的实时荧光定量PCR方法对57例不同临床表型的SMA患者的SMN2基因拷贝数进行检测。结果预测拷贝数为1的SM／Ve基因的平均拷贝数为1．017±0．090，变异系数（coefficient of variation，CV）值8．9％；预测拷贝数为2的SMN2基因的平均拷贝数为2．019±0．080，CV值3．9％；预测拷贝数为3的SMN2基因的平均拷贝数为3．104±0．170，CV值5．4％。Ⅰ型SMA患者SMNe基因平均拷贝数为1．926±0．460，Ⅱ型为2．508±0．460，Ⅲ型为2．876±0．270。Ⅱ型SMA患者SMN2平均拷贝数明显高于Ⅰ型（t=4．24，P〈0．01），Ⅲ型SMA患者SMN2平均拷贝数明显高于Ⅱ型（t=2．44，P〈0．01）。85．72％Ⅰ型SMA患者SMN2以2个拷贝为主；Ⅱ型SMA以2个和3个拷贝为主，分别占40％和60％；82％的Ⅲ型SMA则以3个拷贝为主。结论SMA临床表型的变化与SMN2基因拷贝数明显相关。不同类型SMA患者㈣拷贝数的分布不同：各型SMA患者至少有1个拷贝的Shine，11和Ⅲ型SMA患者的ShiNe拷贝数多于I型患者。提示疾病的严重程度依赖于SMN2拷贝数的变化。

丙型和庚型肝炎病毒混合感染母婴传播的研究

目的 探索丙型肝炎病毒 (HCV)、庚型肝炎病毒 (HGV)混合感染的母婴传播情况及其影响因素。方法 应用第 3代酶联免疫吸附 (ELISA)法 ,检测 4 5 0 6例孕妇血清HCV抗体 (抗HCV) ,其中 878例检测HGV抗体 (抗HGV) ,用荧光定量PCR(FQ PCR)方法 ,检测孕妇血清HCVRNA、HGVRNA。结果 HCVRNA和HGVRNA均阳性孕妇 10例 ,其所分娩的 11例新生儿中 ,HCVRNA阳性 2例、HGVRNA阳性 2例 ;阴道分娩 3例、急诊剖宫产分娩 1例。母乳喂养 4例 ,孕妇临产前丙氨酸转氨酶 (ALT)升高 3例。结论 孕妇HCV和HGV混合感染并不增加母婴传播率。阴道分娩、孕妇临产前ALT升高及母乳喂养是HCV、HGV混合感染母婴传播的高危因素。