染色体异常与生育

染色体异常是引起生育失败的重要原因，在平衡易位个体的配子形成过程中，理论上将形成１８种配子，除１种为正常配子和１种为平衡易位配子外，其余１６种均为不平衡配子。而在倒位携带者的配子形成过程中，将形成４种配子，其中１种为正常，１种为倒位，另２种为不平衡配...

视网膜母细胞瘤基因内VNTR的多态分析

VNTR区是连锁分析和个体鉴别的有效遗传标志。本文采用PCR方法扩增了人类RB1基因第 2 0内含子的VNTR多态位点 ,扩增产物经 6 %聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,银染显示。结果表明该多态位点由多个等位片段构成 ,片段的大小在30 0 - 40 0bp之间。在 10 8例无亲缘关系的个体中 ,我们检测到 76例为杂合子 ,杂合子频率为 70 %。此外 ,我们还探讨了RB1.2 0VNTR在视网膜母细胞瘤产前诊断中应用的可能性。

人血基因组PCR扩增模板的制备及其保存

建立一种简单的人血基因组PCR反应扩增模板制备及其保存方法 ,用于α -globin基因HS4 0位点扩增。

特异性单引物PCR

建立特异性单引物PCR ,并用于筛选基因克隆重组子。根据α -globin的一段序列设计引物 ,按照设计好的特性单引物PCR扩增条有α -globin的重组质粒PLNSX -αglobin ,具体扩增条件如下 :(1) 97℃5min变性后 ,94℃ 30s ,70℃ 2min ,72℃ 2min30s,30个循环 ,制备单链模板 ;(2 ) 94℃ 1min ,12℃ 5min ,16℃3min ,18℃ 3min ,2 0℃ 3min ,2 2℃ 3min ,2 5℃ 1min ,30℃ 3min ,37℃ 3min ,72℃ 6min ,低温条件下引物 3′端 4～ 5个碱基与所扩单链模板退火配对 ,扩增得到一系列不同起始位点但同一序列末端长短一的核酸片段 ;(3)以上述所得片段为模版进行如下条件的扩增 :94℃ 30min ,70℃ 2min ,72℃ 2min ,(每个循环增加 1s) ,4 5个循环。结果 ,特异性单引物PCR能够从pLNSX -αglobin上扩增出特异带 ,可有效用于筛选基因克隆重组子。

非小细胞肺癌淋巴结转移与nm23-H_1基因突变及mRNA表达异常关系研究

目的观察非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）组织中ｎｍ２３－Ｈ１基因的存在状况及其转录表达水平，分析肺癌恶性转移与该基因异常的关系。方法采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和半定量ＲＴ－ＰＣＲ方法，以正常癌旁组织及正常肺组织为对照，观察了３１例原发性ＮＳＣＬＣ中ｎｍ２３－Ｈ１基因的突变和ｍＲＮＡ表达情况。结果３１例肺癌中未发现１例存在ｎｍ２３－Ｈ１基因突变。在２０例具淋巴结转移的ＮＳＣＬＣ中ｎｍ２３－Ｈ１基因ｍＲＮＡ表达降低１４例（１４／２０），明显高于未发生淋巴转移的非小细胞肺癌（３／１１）（Ｐ＜０．０５）。结论以上结果显示，ｎｍ２３－Ｈ１为一种可在肺癌转移过程中发挥负调节作用的转移抑制基因，该基因表达水平可望作为一个肺癌转移的预测因子。