基因工程重组乙型肝炎表面抗原与乙型肝炎Dane颗粒在乙型肝炎表面抗体检测中的联合应用

目的用DNA重组技术在毕赤酵母中表达多聚组氨酸融合重组乙型肝炎病毒表面抗原S蛋白,与血源乙型肝炎Dane颗粒联合使用,制备乙型肝炎表面抗体酶免试剂盒。方法将S基因插入酵母表达载体,转化毕赤酵母菌后表达重组抗原。表达产物包被聚丙乙烯反应板,与辣根过氧化物酶标记Dane颗粒配对,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测HBsAb。结果用重组HBsAg和Dane颗粒酶标记物制备的试剂对卫生部临床检验中心HBsAb质控物及血清标本进行检测,灵敏度达10mIu/ml,特异性达100%,重复性及线性良好,与进口商品试剂检测结果一致。结论毕赤酵母表达系统表达的具有良好免疫反应性和特异性的重组HBsAg,可与酶标记血源Dane颗粒配对制备HBsAb免疫检测试剂,Dane颗粒的其他抗原成分不会干扰检测的特异性。