安可梦口服液镇静催眠作用的实验研究

目的研究中药复方制剂安可梦口服液 (简称AKM)药效学作用。方法通过观察测定AKM对实验小鼠自发活动情况 ,对戊巴比妥钠阀下剂量、阀剂量小鼠睡眠时间和对硝酸士的宁致小鼠惊厥的影响 ,研究AKM镇静、催眠、抗惊厥作用。结果AKM口服液能抑制小鼠自发活动 ,对小鼠睡眠的影响与戊巴比妥钠有协同作用 ,有对抗硝酸士的宁导致惊厥发作的作用 ,且剂量越大 ,作用越明显。结论AKM口服液有明显的镇静、催眠、抗惊厥作用 。

双膦酸盐诱导骨巨细胞瘤细胞凋亡的实验研究

目的探讨双膦酸盐(唑来膦酸)对骨巨细胞瘤多核巨细胞和基质细胞的诱导凋亡作用。方法对我院收治的7例唑来膦酸治疗前后患者的肿瘤组织切片进行透射电镜观察和TUNEL凋亡染色及图像分析。另10例未予唑来膦酸治疗的患者,取术中切除的骨巨细胞瘤新鲜组织进行细胞原代培养,分别给予5、30、150μmol/L唑来膦酸诱导肿瘤细胞凋亡48h,倒置相差显微镜观察细胞形态,Annexin-V FITC凋亡染色及流式细胞仪定量分析。结果唑来膦酸治疗后的肿瘤组织切片透射电镜观察到多核巨细胞和基质细胞呈明显的凋亡表现;TUNEL染色呈强阳性;基质细胞凋亡率治疗前为1.31%,治疗后33.42%(P=0.018);多核巨细胞凋亡率治疗前为8.41%,治疗后56.83%(P=0.018)。在原代培养的骨巨细胞瘤基质细胞中予不同浓度的唑来膦酸诱导凋亡48h后,细胞数量减少,部分细胞形态有显著变化;Annexin-V FITC凋亡染色及流式细胞仪定量分析结果显示,对照组以及5、30、150μmol/L唑来膦酸诱导组的凋亡率分别为(10.67±2.15)%、(20.47±3.77)%、(44.21±8.34)%和(56.96±9.68)%,各诱导组显著高于对照组(P<0.05),且凋亡率呈剂量依赖性(r=0.775,P=0.000)。结论双膦酸盐能够诱导骨巨细胞瘤基质细胞和多核巨细胞的凋亡,且骨巨细胞瘤基质细胞的凋亡率呈剂量依赖性,因此,双膦酸盐可以作为骨巨细胞瘤辅助治疗的方法之一。

解毒利肺口服液止咳化痰平喘抗炎作用的实验研究

目的 进行中药复方解毒利肺口服液药效学实验研究。方法 采用止咳、祛疾、平喘、抗炎等指标对解毒利肺口服液的药理作用进行观察。结果 解毒利肺口服液明显抑制化学物质引起的咳嗽,减少咳嗽次数;促进痰液的排出,延长哮喘发作潜伏期,抑制炎性物质的渗出,降低其肿胀程度。结论 解毒利肺口服液具有明显的止咳、祛痰、平喘、抗炎作用,可作为治疗呼吸道感染的有效制剂。

实验性糖尿病动脉粥样硬化大鼠模型的建立

目的建立糖尿病动脉粥样硬化的Wistar大鼠模型。方法10周龄雄性Wistar大鼠,以保护性剂量260mg/kg腹腔注射烟酰胺(Nicotinamide,NA)溶液,15分钟后尾静脉注射链尿佐菌素(streptozotocin,STZ)60mg/kg,同时给予维生素D3(VD3)注射液按总剂量60万IU/kg分三天灌胃,在上述基础上饲喂高脂高胆固醇饲料。测定大鼠血脂、血糖、胰岛素含量,制作胰腺、主动脉石蜡切片,观察其形态学变化。结果8周后大鼠空腹血糖≥7.8 mmol,且HE染色可见胰岛增生、散在分布、形状不规则,主动脉内膜下有大量泡沫细胞聚集,中膜增生,结构紊乱。对照组未出现类似变化。结论该方法可用于糖尿病动脉粥样硬化Wistar大鼠模型的制作。

唑来膦酸诱导骨巨细胞瘤基质细胞向成骨细胞分化的实验研究

目的探讨唑来膦酸诱导骨巨细胞瘤基质细胞向成骨细胞分化的可行性。方法取我院收治的7例唑来膦酸治疗前后的患者肿瘤组织切片行HE染色、茜素红染色、碱性磷酸酶(ALP)染色以及成骨前因子Ⅰ型胶原和骨唾液蛋白(BSP)的免疫组化染色。取10例未予唑来膦酸治疗的患者术中切除的骨巨细胞瘤新鲜组织进行原代培养,待骨巨细胞瘤基质细胞贴壁生长后分别给予1μmol/L唑来膦酸诱导12天后行ALP染色、免疫组化法检测Ⅰ型胶原和RT-PCR检测Cbfa-1的表达。结果 (1)唑来膦酸治疗前,肿瘤组织切片中骨巨细胞瘤基质细胞BSP染色阴性或低至中度阳性、Ⅰ型胶原染色阴性或轻度阳性,茜素红和ALP染色均为阴性;治疗后,茜素红染色阳性,ALP染色弱阳性,BSP和Ⅰ型胶原染色均转为强阳性,3例患者组织切片中HE染色发现类骨质或骨矿化的增加。(2)原代培养的骨巨细胞瘤基质细胞中予1μmol/L唑来膦酸诱导12天,空白对照组ALP和Ⅰ型胶原染色均为弱阳性表达,唑来膦酸诱导组呈阳性表达。RT-PCR检测发现唑来膦酸诱导组骨巨细胞癌基质细胞中Cbfa-1表达,而空白对照组未见Cbfa-1表达。结论体内外研究初步证实,骨巨细胞瘤基质细胞具有向成骨细胞分化的潜能并在唑来膦酸的诱导下向成骨细胞分化,这从细胞和分子生物学水平部分解释了临床上长期应用唑来膦酸治疗后肿瘤病灶和术后残留囊壁中的明显骨生成的现象。

复合珊瑚羟基磷灰石人工骨用于颈椎椎间融合的实验研究

目的 评价复合珊瑚羟基磷灰石（珊瑚羟基磷灰石/rhBMP-2/几丁糖,combined coralline hydroxyapatite,CCHA）在颈椎融合中的成骨效果。方法 按照序贯实验设计方法设计,以实验犬为实验对象,同体对照研究,分别选择颈椎3/4和5/6为融合节段,随机选择其中一个节段应用CCHA为植入物,另一个节段则选择自体髂骨为植入物,按照Robinson’s法进行椎间融合手术,并加钢板内固定。手术后10周进行X线检查,并按照Lane-Sandhu评分法中骨形成的评定标准来确定愈合情况,以骨融合情况为观察指标,进行统计、分析,并选定α=0.05,β=0.05,γ=FS/SF=2时,接受CCHA优于自体骨。结果CCHA应用于颈椎融合时,在手术后10周时,达到完全愈合,去除结果相同的1例,第12例时,曲线与上界相交,停止实验。结论 从手术后10周的骨融合情况来看,CCHA比自体骨融合效果更好。

复合珊瑚羟基磷灰石人工骨异位成骨效应的实验研究

目的:探讨不同理化条件下产生的珊瑚羟基磷灰石（CHA）对异位成骨的影响;寻找具有骨诱导、骨传导、炎症反应轻的骨移植替代物。方法:以SD大鼠为实验对象,将两种不同理化条件下制得的CHA分为A,B两组,每组都同样按照不同的4种组合方法:CHA,CHA/重组人骨形态形成蛋白-2（rhBMP-2）,CHA/几丁糖,CHA/rhBMP-2/几丁糖制得4种复合珊瑚羟基磷灰石（CCHA）人工骨,分别编成A1～4小组和B1～4小组,分别植入大鼠背部肌肉的4个部位中。术后2周、4周、6周、8周观察动物精神状况,伤口情况;以X线投照获得影像,处死动物后取材,以普通光学显微镜观察成骨情况、炎症反应情况、肝脏损害情况。结果:不同理化条件下产生的CHA对成骨、炎症反应、肝脏损害无差异;不同组合的CCHA之间有差异,CHA/rhBMP-2/几丁糖的成骨效果好,炎症反应、排斥反应轻。结论:通过理化条件的改变,在不影响异位成骨、不增加炎症反应的前提下,提高了CHA的机械强度,使它更加容易塑形,适宜手术操作,应用指征、部位将更加广泛。CHA/rhBMP-2/几丁糖构型的CCHA人工骨,增加了CHA的骨诱导作用,并使该种作用均匀、持久;同时,又降低了异物移植后的炎症反应;rhBMP-2等复合药物的应用,在实验剂量时,无肝脏损害,是理想的骨移植替代物。

DNA生物传感器在“基因诊断”中的实验研究

为了建立石英晶体DNA传感器检测乙肝病毒基因的方法,在石英晶体金表面固定单链DNA,构成压电晶体HBV DNA生物传感器,与待测样品进行杂交反应。结果DNA传感器能准确的诊断血清中的HBV病毒基因。石英晶体HBV DNA生物传感器具有操作省时,简单,能用于临床实验、诊断、检测。

应用限制性差异显示技术制备实验用DNA标记物

目的 建立实验室用DNA标记物。方法 依据PCR引物设计软件Oligo5设计通用引物 ,对质粒DNA进行PCR。结果 通过PCR反应 ,电泳后可见清晰的DNA条带 ,将已确定长度的DNA片段再进行PCR反应 ,与商用DNA标记物进行比较显示 ,用此法制备的DNA标记物可以作为实验室进行凝胶电泳的DNA标记物。结论 采用限制性差异显示技术制备DNA标记物 ,不仅操作简便、快捷、提高工作效益 ,且大大降低费用 。

压电免疫传感器用于抗丙型肝炎病毒抗体检测的实验研究

目的研制一种用于检测抗丙型肝炎病毒(HCV)抗体的压电免疫传感器。方法采用聚乙烯亚胺黏附、戊二醛交联的方法,选用(HCV)人工合成多肽抗原作为生物敏感材料,研制成一种新型的抗HCV抗体压电免疫传感器,将其用于临床血样的检测,探索了传感器的组装条件,考察了传感器的响应特性。结果HBsAg对抗HCV抗体检测干扰较小,且抗HCV抗体阳性血清的响应值与阴性血清的噪声值之比大于4。结论该方法选择性好,易于操作,能快速有效地检测抗HCV抗体。

实验性癫痫大鼠红细胞粘附能力、IL-6与IL-2受体水平变化的研究

目的探讨癫痫对机体红细胞免疫粘附功能、血清白细胞介素6(IL-6)与白细胞介素2受体(sIL-2R)水平的变化。方法将40只Wistar大鼠分成对照组(n=10)与模型组(n=30),通过注射氯化锂-匹罗卡品建立实验性大鼠癫痫模型,抽取实验组与模型组外周血并检测红细胞粘附功能I、L-6和sIL-2R水平。利用红细胞免疫复合物花环形成试验测定两组大鼠的红细胞免疫粘附功能;利用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测sIL-2R水平;利用放射免疫法检测IL-6水平。结果模型组红细胞花环率显著低于正常对照组(P<0.05),血清sIL-2RI、L-6水平显著高于正常对照组(P<0.01)。结论癫痫可致机体免疫功能异常,免疫因素可能参与了癫痫的发病过程。

CO_2激光除皱机理的实验研究

应用超脉冲ＣＯ２激光对新西兰兔进行皮肤除皱术，术后进行活体、光镜及电镜观察。结果显示，ＣＯ２激光除皱主要作用于皮肤表皮及真皮浅层，造成表皮细胞层全部或部分脱落，真皮浅层胶原纤维变性。新生的表皮皱褶变浅、减少，新生的胶原纤维富有弹性，使皮肤绷紧，去除细小皱纹。

利用SAS软件优化乙肝表面抗原压电免疫传感器的实验条件

目的:对聚乙烯亚胺-戊二醛交联法进行优化,提高乙肝表面抗原压电免疫传感器的灵敏度和特异性,降低生产成本,易于普遍推广。方法:利用SAS8.1软件,确定影响实验结果的主要因素、因素水平以及实验点,通过响应面分析,寻求最优值。结果:根据响应面法确定了戊二醛浓度为2.5%,PBS pH值为7.4,BSA浓度为0.5%,免疫反应时间为40 min时,信噪比达到最大,结果与预测值非常接近。结论:本实验所用四通道压电免疫传感器阵列可以同时检测两个血清样品,并且有阴阳性对照,增加了该传感器的可靠性,适合现场检测。

低剂量伽玛刀照射实验性癫痫老龄大鼠海马神经元超微结构观察

目的:观察低剂量伽玛刀照射实验性老龄癫痫大鼠海马神经元超微结构的变化。方法:采用青霉素定位浸润建立老龄大鼠癫痫动物模型,将57只老龄大鼠分为对照组、癫痫组和癫痫后伽玛刀照射组。照射周边剂量12Gy,等剂量曲线为50%,0.5 h～60 d后取靶区海马制备电镜样品,透射电镜观察。结果:对照组海马神经元的超微结构正常;癫痫大鼠可见神经元细胞器明显空化,部分神经元凋亡;伽玛刀照射组早期与癫痫模型组基本一致,中期和晚期部分结构得以恢复,线粒体修复较为明显。结论:老龄癫痫大鼠经低剂量伽玛刀照射,中、晚期海马神经元的超微结构改变得以修复,可为临床治疗老龄癫痫提供形态学依据。

实验犬心肌细胞NF-κB的快速提取及鉴定

目的 建立实验犬心肌组织细胞核转录因子 (NF -κB)快速提取及鉴定方法。方法 采用液氮快速冷冻使犬心肌组织破碎 ,并优化核蛋白提取鉴定条件 ,参考哺乳动物鼠Igκ轻链基因 ,设计可与犬心肌细胞核转录因子结合的序列 ,在不同的提取和标记条件下 ,通过凝胶阻滞分析NF -κB活性。结果 两种提取及标记条件 ,凝胶阻滞分析结果有明显不同。按优化实验的方法提取和标记NF -κB ,实验结果更为理想。结论 优化提取条件后 ,提取犬心肌细胞NF -κB的方法简便、快速 ;设计的特异DNA探针可与犬心肌组织细胞NF -κB特异结合并显示良好的结合活性 ,为实验犬在急性事件时其心肌组织细胞NF -κB活性的研究提供了可行方法。

预存式自体输血在小型猪外科手术中的应用

目的:探讨预存式自体输血对外科手术后小型猪存活率的影响。方法:随机对67只不同外科手术实验用小型猪分成对照组与实验组,实验组即预存式自体输血组35只,均在手术前5d按体重的0.6%采血保存,术中回输,检测采血前后部分血常规值变化。对照组32只,术中或术后不输血液。对实验组与对照组术后成活率进行比较。结果:实验组在采血前后血常规值有显著变化(P<0.05),血液回输后差异无显著性。实验组与对照组动物手术后成活率分别为80.0%和56.3%,差异有显著性(P<0.01)。结论:预存式自体血回输可显著提高外科手术后小型猪的存活率,是一种安全、有效而且经济的输血方式。

乙肝表面抗原压电免疫传感器实验条件优化和质量控制

目的:对聚乙烯亚胺-戊二醛交联法进行优化,提高乙肝表面抗原压电免疫传感器的灵敏度和特异性。方法:通过统计学处理,确定PEI和戊二醛的最佳固定量(即频率改变值)范围,将乙肝表面抗体固定于石英晶体表面,检测抗原。结果:根据,确定PEI、戊二醛最佳固定量范围分别是141.82 Hz～230.18 Hz,98.90 Hz～172.10 Hz;并可以明显区分阴阳性血清。结论:该传感器具有临床应用价值。x!

光学成像在肿瘤骨转移实验研究中的应用进展

目前对肿瘤骨转移的影像学评估主要依靠SPECT、PET、X线和微CT等显像技术,这些影像模式在空间分辨率、敏感性及信号定量方面都有自己的优势。然而,在肿瘤骨转移过程中,不仅有骨组织结构的改变,还有血管再生、

微波快速脱钙及其脱钙液的选择

微波快速脱钙及其脱钙液的选择杨传红，赖晃文，唐赓云，姜秀英骨组织超薄切片的制备是进行骨组织超微结构研究的先决条件。常规脱钙方法时间太长且超微结构保存不良，不利于临床病理的快速诊断。我们选择不同脱钙液在微波条件下探讨快速脱钙的方法，以达到快速诊断的目的...

血管紧张素Ⅱ受体在增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成中的作用

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型受体(AT1)和2型受体(AT2)在人增生性瘢痕成纤维细胞中的表达,并初步探讨这两种受体在成纤维细胞胶原合成中的作用。方法采用免疫组织化学和放射性配体受体结合测定法观察人增生性瘢痕组织中成纤维细胞AngⅡ受体AT1和AT2的表达,并用体外细胞培养技术探讨AngⅡ受体在人增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成中的作用。结果在增生性瘢痕的成纤维细胞中可见AT1和AT2受体表达,阳性染色信号较强。放射性配体受体结合测定法显示培养的增生性瘢痕成纤维细胞AT1和AT2受体密度分别为10·69±2·15和4·9±1·05fmol/106个细胞。在培养的人增生性瘢痕成纤维细胞中,AngⅡ可显著促进成纤维细胞胶原的合成,AT1受体阻断剂Valsartan明显抑制该作用,而AT2受体拮抗剂PD123319则明显增强该作用。结论增生性瘢痕的成纤维细胞表达AT1和AT2受体,AngⅡ通过激活AT1和AT2受体对成纤维细胞胶原的合成产生相反的作用,AngⅡ及其受体表达的变化可能影响瘢痕的形成和成熟。