珠蛋白生成障碍性贫血妊娠妇女血清转铁蛋白受体的测定

目的通过测定妊娠期珠蛋白生成障碍性贫血（地中海贫血）妇女与正常妊娠妇女、缺铁性贫血妊娠妇女的可溶性血清转铁蛋白受体（sTfR）水平，探讨sTfR值对诊断妊娠期地中海贫血的价值。方法随机选择妊娠20～24周，年龄24～30岁，排除合并其他疾病的妇女，应用溶血百分比和基因检测法诊断α和β地中海贫血，ELISA法检测sTfR值并进行统计学分析。结果妊娠期地中海贫血妇女的sTfR值为18．614±8．464nmol／L，低于临界值（28．1nmol／L，P〈0．05），属于正常范围。妊娠期地中海贫血妇女的sTfR值明显低于正常妊娠妇女（P〈0．01）。结论通过sTfR值能准确诊断妊娠妇女的缺铁性贫血，但妊娠妇女sTfR浓度降低的原因及其降低对地中海贫血的影响有待于进一步研究。

无精症患者的外周血淋巴细胞染色体分析

目的 分析男性无精症患者染色体异常发生的情况。方法 对５５ 例无精症患者及５５ 例对照组进行常规外周血淋巴细胞培养、染色体制备及分析。结果 ５５ 例无精症患者中，１８ 例染色体结构或数目异常，占３３％ ，其中性染色体异常为主。５５ 例对照组中１ 例染色体结构异常。结论 染色体异常是导致无精症的重要原因之一，细胞及分子遗传学检查对决定无精症患者的病因和治疗是很有必要的。

Rb1基因第24和25外显子缺失导致低外显性视网膜母细胞瘤

目的 探讨抑癌基因 Rb1大片段缺失与低外显性视网膜母细胞瘤 (low- penetrance retinoblas-toma)家系的相关性。方法 应用定量多重 PCR技术 (quantitative fluorescentmultiplex PCR,QFM- PCR)筛查 Rb1突变。应用长片段聚合酶链反应 (long fragment PCR)、逆转录聚合酶链反应 (reverse transcrip-tase- PCR,RT- PCR)、亚克隆、直接测序、Western印迹等技术分析 Rb1突变点的特征。结果 发现 1个家族4代 12 2人中 ,共有 18人携带 Rb1第 2 4和 2 5外显子缺失突变 ,而这些高风险的 Rb1突变基因携带者中 ,只有 11人 (39% )形成单眼或双眼视网膜母细胞瘤 (retinoblastoma ,RB) ,比常见的 Rb1基因突变者中有95 %形成 RB的发病率明显较低。该突变的缺失长达 4 kb基因组 DNA。 c DNA、RNA和测序研究证实 ,有174 bp碱基缺失导致 5 8个密码子丢失。 Western印迹检测出一个比正常 RB1蛋白短、相对分子质量 6 0 0 0(约 6 0 0 0 Da)的 RB突变蛋白得以表达。结论 应用 QFM- PCR技术在一个 RB呈低外显性的大家族中发现Rb1第 2 4和 2 5外显子完全缺失。该突变在基因组 DNA、RNA和蛋白质水平的研究结果 ,为遗传性低外显性视网膜母细胞瘤与该段 DNA缺失相关提供了新的依据 ,并为遗传咨询提供了有价值的资料。

运用荧光定量多重PCR技术检测RB1基因突变

目的 建立一种半自动、简易、快速和不需放射性同位素技术,用以检测RB1 基因突变的方法。方法 应用包括扩增RB1 基因27 个外显子和启动区在内的荧光定量多重PCR 技术。将全基因分成若干组,每组3～7 对引物,同时含对照C4 引物并使用4 对外对照,分别为RB的缺体、单体、双倍体及三体。在测试标本中,一个片段的拷贝数根据比较对照与标本的荧光强度而获得。利用自动片段处理软件2.1 处理结果。结果 观察到小片段缺失、插入及外显子拷贝数缺失等突变。测序结果和RB瘤细胞杂合性丢失进一步证实荧光定量多重PCR 的筛查结果。结论 此法是筛查患者基因缺失、插入的一种快速、简易的方法。应用此法可查出约50% 的阳性病例。查出的突变不仅有小缺失、插入,也可发现用以往的方法所不能见到的外显子杂合性缺失病例。