血清甲胎蛋白和游离β绒毛膜促性腺激素双标记时间分辨荧光免疫试剂盒的研制与评价

目的研铺一种用于产前筛查的母血清甲胎蛋白（AFP）和游离β绒毛膜促性腺激素（freehCGB）双标记时间分辨荧光免疫法（TrFIA）试剂盒。方法采用AFP单克隆抗体铕（Eu^3＋）标记物和freehCGis单克隆抗体钐（Sm^3＋）标记物作为示踪物，以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分制备增强液，应用双抗体夹心法研制出hAFP和freehCG卢双标记时间分辨荧光免疫法试剂盒，并对其进行分析性能评价，平行比对试验采用线性回归分析。结果自制试刺盒AFP和freehCGβ的剂量-反应曲线线性相关系数（r）可达0．9990以上；批内、批间CV（％）均小于10．00％；AFP和freehCGP的灵敏度分别为0．12U／ml和0．08ng／ml；以国家标准品为对照，AFP和freehCG8的标准品效价比在0．900～1．100间；检测AFP和freehCG8的线性范围分别为0.25U／ml-500U／ml和0．2ng／ml-200ng／ml；试剂盒在4℃保存下可至少稳定12月；与国外同类试剂比对，AFP和freehCGβ的回归方程的线性相关系数（r）分剐为0．9730和0．9927。结论自制试剂盒具有灵敏度高、特异性强、准确度好、线性范围宽等优点，与国外的同类产品检测结果相关性好，能满足临床需要。

抗早孕因子单克隆抗体的制备与鉴定

目的建立分泌抗EPF(Earlypregnancyfactor,早孕因子)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化单抗并鉴定。方法用本实验室已纯化的早孕和肿瘤源性EPF作为抗原刺激Balb/c小鼠,用免疫后的小鼠脾细胞与同系小鼠骨髓瘤细胞(NS-1)融合,经4次克隆化,获得可稳定分泌抗EPF单克隆抗体的细胞株,注入Balb/c小鼠腹腔制备腹水型单抗,Protein-A亲和层析纯化,SDS电泳和Western-blot等方法分析纯化结果。结果融合后获得一株稳定分泌抗EPF抗体的细胞株(C3D11),克隆化后,获得稳定分泌抗EPF单克隆抗体的细胞株,将增殖后的细胞注射Balb/c小鼠腹腔获得腹水型单抗,以亲和层析法纯化。SDS-PAGE分析显示纯化后去掉了大部分杂蛋白,免疫印迹分析抗体纯度较高,与抗原匹配性良好。结论本研究制备的EPF单克隆抗体为特异性抗EPF抗体。

白介素13-1112C>T基因多态性与广东汉族特应性皮炎的关系

目的对广东汉族特应性皮炎的患者行白介素13-1112C>T基因分型,探讨白介素13-1112C>T基因与本地区特应性皮炎遗传易感性的相关性。方法用PCR-RFLP法对75例广东汉族无亲缘关系的特应性皮炎患者和107例无血缘关系的健康广东汉族人行白介素13-1112C>T基因分型。结果特应性皮炎组与对照组相比,白介素13-1112C/T基因型频率差异均无统计学意义(P>0.05);白介素13-1112位点的T/T基因不存在显著相关(P>0.05)。结论白介素13-1112C>T基因多态性与广东汉族人特应性皮炎不存在相关性。

蒲公英水煎液对环磷酰胺诱导的实验性小鼠精子畸形的影响

目的 :研究蒲公英水煎液对实验性小鼠生殖细胞遗传物质的影响。方法 :应用小鼠精子畸形实验 ,观察蒲公英水煎液本身能否诱发雄性生殖细胞遗物质的损伤 ;以及对环磷酰胺诱导的雄性生殖遗传物质损伤是否具有抑制作用。结果 :蒲公英水煎液本身不能诱发实验性小鼠精子畸形 ;对环磷酰胺诱导实验性小鼠精子畸形具有明显抑制作用。结论 :蒲公英水煎液具有一定的抗突变作用 ,可安全应于临床肿瘤治疗。

Th17细胞的分化与临床研究

近年来，研究发现机体的免疫系统中还存在着一种新的不同于Th1、Th2和Treg的CD4^＋T细胞—Th17细胞。Th17细胞具有独立的分化、发育过程，主要分泌前炎性细胞因子IL-17，在风湿性关节炎、实验性变应性脑炎等自身性免疫性疾病，曼氏血吸虫感染，某些病毒、细菌等感染性疾病以及肿瘤疾病中起着重要的调节作用（Weaver CT，

端粒酶RNA反义寡核苷酸对人肺癌细胞端粒酶活性和细胞增殖的影响

目的 观察脂质体介导的端粒酶RNA反义寡核苷 (ASODN)对人肺癌细胞系端粒酶活性的作用及其对癌细胞增殖的影响。 方法 合成与人类端粒酶RNA模板区碱基序列互补的ASOND ,并用阳离子脂质体转染剂DO SPER介导 ,作用于人肺癌细胞系 ,空白组和正义寡脱氧核苷酸 (SODN)作为对照。用以PCR为基础的端粒重复序列扩增法 (TRAP)结合ELISA方法检测肺癌细胞的端粒酶活性。台盼蓝拒染法细胞计数、噻唑蓝 (MTT)试验观察癌细胞增殖情况。 结果 脂质体介导的抗端粒酶ASODN对肺癌细胞的端粒酶活性具有抑制作用 ;细胞计数和MTT试验显示肺癌细胞增殖速度明显减慢。 结论 针对端粒酶模板区的ASODN可显著抑制端粒酶活性和肺癌细胞的增殖 。