离心培养法检测上呼吸道感染患者流感病毒的应用与评价

目的评价离心培养法分离检测流感病毒的敏感性、特异性,探讨其临床应用价值。方法收集2010年1月至2011年2月895份上呼吸道感染患者鼻咽拭子,以传统细胞培养法和离心培养法进行流感病毒培养,并作免疫荧光试验(IF)鉴定。结果广州地区上呼吸道感染患者的流感病毒感染呈两个高峰期,分别为3～5月的春季高峰(以乙型流感病毒为主)和7～9月夏季高峰(甲型流感病毒为主);传统细胞培养分离流感病毒288例,分离率为32%;离心培养分离病毒260例,分离率、敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为29%、89%、99%、98%、95%。结论离心培养法结合IF具有高的敏感性和特异性并能快速报告结果,而且操作简单、节省人力,可实现流感病毒快速分离,适于临床实验室使用。

多重荧光定量PCR对三种主要致病性曲霉菌的检测研究

目的建立一种能同时鉴定烟曲霉、黄曲霉和黑曲霉菌的多重荧光定量PCR诊断方法，并将之应用于侵袭性曲霉菌病的诊断研究。方法构建多重荧光定量PCR方法，对该方法进行实验评价，并将之应用于侵袭性曲霉菌病患者的痰标本检测，初步评价该方法的临床诊断效能。结果建立的多重荧光定量PCR方法，制定标准曲线，R^2。在0．989～0．999之间，斜率分别为-3．117、-3．583、-3．674；只与烟曲、黄曲、黑曲的DNA发生特异性反应，无非特异性扩增；最低检测浓度为1×10^2孢子／ml；重复性检测试验，获得Ct值标准差为0．12～0．20，变异系数为0．37％～0．80％；对分离自26例侵袭性曲霉菌病患者的56份深部痰标本进行检测，敏感率为85．7％（48／56），特异性为92．0％（46／50），阳性预测值为92．3％（48／52），阴性预测值为85．2％（46／54）。结论研究建立的多重荧光定量PCR方法检测侵袭性曲霉菌病患者的深部痰标本有较高的敏感性、特异性和阴、阳性预测值，且快速、简便，将有助于侵袭性曲霉菌病的早期准确诊断。