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探索医学检验本科复合型人才培养途径
1
作者 刘忠民 徐霞 +2 位作者 吴爱武 吴晓蔓 陈柏铭 《检验医学教育》 2005年第3期4-6,共3页
医学检验系把培养学生的科研能力贯穿于整个教学活动之中,将学生完成毕业论文和通过毕业论文答辩作为培养和评价学生综合能力的手段,并纳入教学计划。先后共有9届医学检验本科学生顺利地通过了毕业论文答辩,探索出医学检验本科复合型人... 医学检验系把培养学生的科研能力贯穿于整个教学活动之中,将学生完成毕业论文和通过毕业论文答辩作为培养和评价学生综合能力的手段,并纳入教学计划。先后共有9届医学检验本科学生顺利地通过了毕业论文答辩,探索出医学检验本科复合型人才培养的途径。实践证明,实施学生完成毕业论文和通过毕业论文答辩是培养和评价学生综合素质,培养学生创造性思维,促进教学改革,提高教育质量的有效途径。 展开更多
关键词 检验医学教育 科研 毕业论文 医学检验系 人才培养途径 本科学生 复合型 毕业论文答辩 学生综合能力 学生综合素质
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广东地区高等检验医学人才素质结构研究
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作者 刘忠民 杨杰文 +6 位作者 向波 钟丽玲 彭明远 冼英 苏洁玲 叶润清 吴彤华 《西北医学教育》 2005年第1期45-47,共3页
广东地区对高等医学检验人才的素质要求主要包括思想道德素质;医学科学素质;人文科学素质和身体心理素质.用人单位对学生思想道德素质和医学科学素质的要求较高,其要求程度与学生的学历层次呈正相关,对本科学历以上的学生,用人单位希望... 广东地区对高等医学检验人才的素质要求主要包括思想道德素质;医学科学素质;人文科学素质和身体心理素质.用人单位对学生思想道德素质和医学科学素质的要求较高,其要求程度与学生的学历层次呈正相关,对本科学历以上的学生,用人单位希望他们有一定的人文科学素质和身体心理素质,但对专科学生在这两方面的要求很少. 展开更多
关键词 高等教学 检验医学 人才 素质结构 医学教育
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临床生化检验试题管理系统的开发和试用
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作者 林勇平 汤建新 +2 位作者 肖洪广 刘忠民 陈柏铭 《广州医学院学报》 1999年第S2期95-97,共3页
本文通过对采用面向对象编程的关系数据库VISUALFOXPRO5.0语言开发临床生化检验试题管理系统的实践分析,认为开发临床生化检验试题管理系统,实行教考分离,有利于提高教学和考试质量。
关键词 考试 试题库 计算机
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6σ质量标准在临床生化检验室内质量控制中的应用研究 被引量:27
4
作者 刘忠民 高月亭 +2 位作者 肖洪广 刘利东 伍众文 《国际检验医学杂志》 CAS 2010年第3期226-228,共3页
目的应用6σ质量标准分析临床生化检验质量控制数据,评价检验项目质量水平,改进检验质量。方法收集2007年度临床生化检验项目室内质量控制及室间质量评价数据;按照美国临床实验室改进修正法案中允许总误差(TEa)标准,采用公式σ=(TEa-bia... 目的应用6σ质量标准分析临床生化检验质量控制数据,评价检验项目质量水平,改进检验质量。方法收集2007年度临床生化检验项目室内质量控制及室间质量评价数据;按照美国临床实验室改进修正法案中允许总误差(TEa)标准,采用公式σ=(TEa-bias)/CV,计算各检验项目的σ值,绘制6σ性能决定图,评价分析性能,并设计质量控制方案。结果 28个临床生化常规检验项目中,检验项目总分析性能σ≥6、5、4和3者,分别占25%、35.7%、57.1%和71.4%,所有检验项目的平均σ=4.77;当σ≥5时,采用1_(3S)(n=2)质量控制规则能满足质量要求。结论 6σ质量标准的应用,有助于提高临床生化检验质量水平,6σ管理是一项有效的质量管理工具。 展开更多
关键词 全面质量管理 质量控制 参考标准 化学 临床
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标准化6σ方法性能决定图制作及在临床生化检验质量管理中的应用 被引量:12
5
作者 伍众文 车玉传 +4 位作者 黄金印 陈嘉俊 蓝银苑 马晓桂 刘忠民 《检验医学与临床》 CAS 2010年第5期387-389,共3页
目的应用6σ管理理论和Excel软件制作标准化6σ方法性能决定图,并研究其在临床生化检验质量管理中的应用价值。方法使用Excel软件制作标准化6σ方法性能决定图。采集广州医学院第一附属医院检验科生化室12个项目2009年上半年质控数据,... 目的应用6σ管理理论和Excel软件制作标准化6σ方法性能决定图,并研究其在临床生化检验质量管理中的应用价值。方法使用Excel软件制作标准化6σ方法性能决定图。采集广州医学院第一附属医院检验科生化室12个项目2009年上半年质控数据,计算各项目的偏倚(Bias%)和批内精密度(CV%);参考美国临床实验室改进法案(CLIA′88)中相关项目的总允许误差(TEa%),计算Bias%占TEa百分数和CV%占TEa%;以前值为纵坐标,后值为横坐标绘图。并根据σ=(TEa%-Bias%)/CV%画出西格玛性能线,最后根据各项目操作点所在σ区域判断检验项目的质量水平。结果使用Excel软件制作的标准化6σ方法性能决定图能同时对12个项目的性能水平进行评价,并了解整体质量水平。结果显示,12个检验项目的质量参差不齐,血液淀粉酶、三酰甘油(TG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)质量达到6σ水平,天门冬氨酸氨基转移酶(AST)达5σ水平,总蛋白(TP)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)位于4σ水平,葡萄糖(Glu)、总胆固醇(TC)处于3σ水平,清蛋白(Alb)、直接胆红素(DBIL)仅达到2σ水平。结论临床生化检验各个项目的性能好坏不一,标准化6σ方法性能决定图能有效进行质量评价。 展开更多
关键词 方法性能图 方法评价 临床生物化学 质量控制
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广州地区猫、犬弓形虫感染的唾液流行病学调查 被引量:10
6
作者 陈代雄 谭嘉庆 +6 位作者 胡颖 沈浩贤 李小敏 霍健 刘剑宁 张意钗 蔡悦清 《热带医学杂志》 CAS 2005年第5期639-641,共3页
目的了解广州地区猫、犬弓形虫的感染情况。方法用ELISA双抗夹心法对从广州市番禺、白云、荔湾、越秀、天河、芳村、东山7个区的201只猫、狗所采集的唾液进行弓形虫IgG抗体的检测。结果检查猫唾液样本114份,阳性27份,阳性率约为23.7%。... 目的了解广州地区猫、犬弓形虫的感染情况。方法用ELISA双抗夹心法对从广州市番禺、白云、荔湾、越秀、天河、芳村、东山7个区的201只猫、狗所采集的唾液进行弓形虫IgG抗体的检测。结果检查猫唾液样本114份,阳性27份,阳性率约为23.7%。狗唾液样本87份,阳性18份,阳性率为20.7%。在广州市的7个区中,猫犬弓形虫的感染率以白云区和番禺区较高。结论广州市宠物猫、狗的弓形虫感染率较高,感染水平与国内其它城市的调查结果相近。 展开更多
关键词 弓形虫 猫狗 唾液 调查
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广州管圆线虫感染大鼠血清IgG抗体水平动态观察 被引量:10
7
作者 金海 何娴 +5 位作者 刘丹霞 李榕娇 陈继业 陈代雄 沈浩贤 李小敏 《中国热带医学》 CAS 2006年第1期21-22,27,共3页
目的了解大鼠感染广州管圆线虫后血清特异性IgG抗体水平的动态变化。方法用ELISA方法对感染后不同时间采集的大鼠血清进行抗广州管圆线虫IgG抗体滴度的检测,以了解其抗体水平的动态变化。并比较了感染血清经过或不经过2-巯基乙醇处理和... 目的了解大鼠感染广州管圆线虫后血清特异性IgG抗体水平的动态变化。方法用ELISA方法对感染后不同时间采集的大鼠血清进行抗广州管圆线虫IgG抗体滴度的检测,以了解其抗体水平的动态变化。并比较了感染血清经过或不经过2-巯基乙醇处理和给大鼠灌服吡喹酮的情况下,ELISA检测值的变化。结果大鼠感染广州管圆线虫后,其血清特异性IgG抗体水平随时间的推移而逐渐升高。用2-ME处理后各时点采集的感染大鼠血清OD值均较不加处理者有不同程度的提高。服药结束后第3d大鼠血清IgG抗体ELISA检测值约为未服药组感染大鼠的2·2倍。结论以2-ME处理的血清及服用吡喹酮能提高阳性检出率。 展开更多
关键词 广州管圆线虫 IGG抗体 动态观察
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注重能力培养,创建检验本科教育毕业论文答辩育人新模式 被引量:2
8
作者 陈柏铭 刘忠民 +5 位作者 曹予明 何东苟 肖洪广 吴爱武 廖伟娇 徐霞 《广州医学院学报》 1999年第S2期25-28,共4页
医学检验系将学生完成毕业论文课题和毕业论文答辩工作纳入教学计划,先后共有5届医学检验本科学生顺利通过了毕业论文答辩,探索出医学检验本科教育的育人新模式。适应社会发展需要、明确培养目标、注重能力培养是开展毕业论文答辩工... 医学检验系将学生完成毕业论文课题和毕业论文答辩工作纳入教学计划,先后共有5届医学检验本科学生顺利通过了毕业论文答辩,探索出医学检验本科教育的育人新模式。适应社会发展需要、明确培养目标、注重能力培养是开展毕业论文答辩工作的动力,强化和拓展专业技能是开展论文答辩工作的基础,争取理解和支持、认真做好各项工作是论文答辩工作的关键。实践证明,毕业论文答辩是评价学生综合素质,培养创造性思维,促进教学改革,提高教育质量的有效途径,也是促进教师素质提高的好方法。 展开更多
关键词 医学检验教育 毕业论文
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鼻咽癌患者及患病风险者红细胞免疫调节因子活性与T细胞亚群的关系
9
作者 何东苟 陈柏铭 《江西医学检验》 1998年第3期121-123,共3页
目的探讨鼻咽癌患者及其患病风险者体内红细胞免疫调节功能与T细胞亚群的相互关系。方法检测了鼻咽癌患者和不同滴度IgA/VCA者的红细胞免疫调节促进因子及抑制因子活性、T细胞亚群的变化并分析其相互关系。结果鼻咽癌患者红细胞免疫促... 目的探讨鼻咽癌患者及其患病风险者体内红细胞免疫调节功能与T细胞亚群的相互关系。方法检测了鼻咽癌患者和不同滴度IgA/VCA者的红细胞免疫调节促进因子及抑制因子活性、T细胞亚群的变化并分析其相互关系。结果鼻咽癌患者红细胞免疫促进因子的活性降低、抑制因子活性升高,T细胞亚群失衡;鼻咽癌患病风险者(高滴度IgA/VCA者)的红细胞免疫调节因子活性及T细胞亚群与鼻咽癌患者的变化相似,只是程度不同;低滴度IgA/VCA者的T细胞亚群、红细胞免疫促进因子活性未发生显著变化,但红细胞免疫抑制因子活性升高;红细胞免疫调节因子活性的改变与T细胞亚群的变化相关。结论红细胞免疫调节功能和/或T细胞免疫功能的改变及其相互作用在NPC发病机制中具有一定的作用。 展开更多
关键词 红细胞免疫 T细胞亚群 患者 鼻咽癌 活性 调节因子 抑制因子 患病 结论 变化
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消化系统肿瘤患者红细胞免疫功能检测
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作者 何东苟 《医学检验进修杂志》 1997年第4期169-170,共2页
关键词 消化系统肿瘤 红细胞 免疫功能 检测
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乙型肝炎病毒血清标志模式与TNF_a的关系探讨
11
作者 何东苟 《江西医学检验》 1999年第2期91-91,105,共2页
关键词 乙型肝炎 HBV 血清标志模式 肿瘤坏死因子
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医学检验专业复合型人才培养途径探析 被引量:4
12
作者 刘忠民 徐霞 +2 位作者 吴爱武 肖洪广 陈柏铭 《医学教育》 2005年第3期15-16,19,共3页
医学检验系把学生科研能力的培养贯穿于整个教学活动之中,将学生完成毕业论文课题和通过毕业论文答辩作为培养和评价学生综合能力的手段,并纳入教学计划,先后已有9届医学检验专业本科学生顺利地通过了毕业论文答辩。适应社会发展需要是... 医学检验系把学生科研能力的培养贯穿于整个教学活动之中,将学生完成毕业论文课题和通过毕业论文答辩作为培养和评价学生综合能力的手段,并纳入教学计划,先后已有9届医学检验专业本科学生顺利地通过了毕业论文答辩。适应社会发展需要是探索医学检验专业复合型人才培养途径的动力;强化和拓展专业技能是学生科研工作的基础;争取理解和支持、建立稳定的支持体系是学生科研工作的保证;认真计划、组织和落实毕业论文答辩工作是提高学生科研能力的关键。实践证明,实施学生完成毕业论文课题和通过毕业论文答辩是培养和评价学生综合素质,培养学生创造性思维,促进教学改革,提高教育质量的有效途径。 展开更多
关键词 医学检验教育 科研能力 毕业论文 人才培养
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6σ质量管理方法在临床实验室质量控制中的应用研究 被引量:27
13
作者 刘忠民 高月亭 +2 位作者 肖洪广 刘利东 车玉传 《检验医学》 CAS 北大核心 2010年第3期224-227,共4页
目的应用六西格玛(6σ)质量管理方法分析临床检验项目质量控制数据,评价其分析性能,设计质量控制方法,指导质量改进。方法收集2007年度临床检验项目室内质量控制及室间质量评价的数据,按照美国临床实验室改进修正法案允许总误差(TEa)标... 目的应用六西格玛(6σ)质量管理方法分析临床检验项目质量控制数据,评价其分析性能,设计质量控制方法,指导质量改进。方法收集2007年度临床检验项目室内质量控制及室间质量评价的数据,按照美国临床实验室改进修正法案允许总误差(TEa)标准,采用公式σ值=[TEa-偏倚(bias)]/变异系数(CV),计算检验项目的σ值,绘制标准化6σ性能决定图,评价检验项目分析性能,绘制标准化操作过程规范图,设计质量控制方案,计算检验项目的质量目标指数,查找导致性能不佳的主要原因,提出优先改进方法。结果22个临床常规检验项目中,检验项目分析性能σ值≥6、5、4和3者,分别占27%、41%、59%和68%,全部检验项目的平均σ值为4.72;当σ值≥5时,采用13S(n=2)质量控制方法能满足质量控制要求,在16个σ值<6的检验项目中,需要优先改进精密度的项目占63%。结论6σ质量管理是临床实验室开展质量控制的一项有效的管理工具,有助于不断提高临床实验室质量水平。 展开更多
关键词 六西格玛 质量控制 临床实验室 操作过程规范图
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CEA和CA724联合检测在结直肠癌诊断中的应用 被引量:28
14
作者 黄妩姣 郑智明 +3 位作者 林素香 徐宁 黄宪章 庄俊华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第12期2252-2254,共3页
目的:探讨癌胚抗原(CEA)和糖链抗原724(CA724)联合检测对结直肠癌的诊断价值。方法:用化学发光法检测结直肠癌患者41例、结直肠良性病变患者46例、健康体检人群101例的血清CEA含量,用电化学发光法检测3组人群的血清CA724水平,统计分析CE... 目的:探讨癌胚抗原(CEA)和糖链抗原724(CA724)联合检测对结直肠癌的诊断价值。方法:用化学发光法检测结直肠癌患者41例、结直肠良性病变患者46例、健康体检人群101例的血清CEA含量,用电化学发光法检测3组人群的血清CA724水平,统计分析CEA和CA724在结直肠癌诊断中的应用价值。结果:结直肠癌患者血清CEA和CA72-4水平显著高于结直肠良性病变患者及健康体检人群的水平(P<0.05),结直肠良性病变患者血清CEA和CA72-4浓度显著高于健康体检人群的浓度(P<0.05)。单项检测CEA对结直肠癌诊断的敏感度、特异度和准确度分别为58.5%、76.0%、67.8%,CA724为34.1%、93.4%、65.5%;联合检测CEA和CA724为68.2%、71.7%、70.1%。结论:CEA和CA724对结直肠癌诊断和疗效监测有一定价值,两者联合检测可提高结直肠癌的检出率。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 肿瘤标志物 癌胚抗原 糖链抗原724 联合检测
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尿液标本中大肠埃希菌的耐药性分析及其产超广谱β-内酰胺酶监测 被引量:24
15
作者 袁春雷 叶国华 +3 位作者 李冬秀 李介华 徐辉 唐浩熙 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期241-243,共3页
目的分析清远地区2003年9月至2004年4月间门诊住院患者尿液标本中大肠埃希菌的耐药性及其产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况,以便更好地指导临床用药。方法应用微生物分析系统MicroScanAutoScan-4进行鉴定,并用仪器专家系统判断可疑ESBLs... 目的分析清远地区2003年9月至2004年4月间门诊住院患者尿液标本中大肠埃希菌的耐药性及其产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况,以便更好地指导临床用药。方法应用微生物分析系统MicroScanAutoScan-4进行鉴定,并用仪器专家系统判断可疑ESBLs菌株,用纸片扩散法表型确证试验检测ESBLs。结果尿液标本中的大肠埃希菌对亚胺培南、哌拉西林/三唑巴坦、头孢西丁的耐药性最低,分别为3%、5%、8%,而对氨苄西林/舒巴坦、头孢噻吩、哌拉西林的耐药性均>70%,产ESBLs的大肠埃希菌对亚胺培南、哌拉西林/三唑巴坦、头孢西丁的耐药性均<10%,对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻吩、环丙沙星均表现出很强的耐药性。结论尿路感染应根据抗生素敏感试验选择敏感药物进行合理用药并检测相应的产ESBLs情况。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 耐药性 超广谱Β-内酰胺酶
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某地区结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药相关基因突变特征分析 被引量:11
16
作者 杨辉 张国良 +3 位作者 张明霞 陈心春 陈建波 吴爱武 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第34期3591-3593,共3页
目的了解深圳地区结核分枝杆菌临床分离株利福平和异烟肼的耐药相关基因的突变特点。方法 60株结核分枝杆菌临床分离株通过全自动快速分枝杆菌培养鉴定系统(BACTEC-MGIT960)进行鉴定和药敏分析。在这60株菌株中,针对包括利福平耐药决定... 目的了解深圳地区结核分枝杆菌临床分离株利福平和异烟肼的耐药相关基因的突变特点。方法 60株结核分枝杆菌临床分离株通过全自动快速分枝杆菌培养鉴定系统(BACTEC-MGIT960)进行鉴定和药敏分析。在这60株菌株中,针对包括利福平耐药决定区(RRDR)在内的rpoB基因和异烟肼耐药相关位点katG315、inhA-15、kasA269、kasA312进行PCR扩增,并将扩增产物T-A克隆后进行测序。结果在60株结核分枝杆菌临床分离株中,检出利福平耐药株45株,敏感株15株;异烟肼耐药株41株,敏感株19株;利福平和异烟肼同时耐药的有14株。在45株利福平耐药株中,rpoB基因RRDR突变发生率为91.1%(41/45),共检测到12种突变形式,主要突变位点在531、526、516、533,以Ser531Leu突变最常见,占rpoB发生基因突变株的51.2%(21/45)。在41株异烟肼耐药株中,katG315位点有29株发生突变,包括28株katG315(AGC-ACC)和1株katG315(AGC-AAC)突变,突变发生率为70.7%(29/41);inhA-15位点有9株发生突变,均为(C-T)突变,突变发生率为21.95%(9/41)。kasA基因未发现常见突变形式。结论深圳地区结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药相关基因突变位点与国内外研究基本一致,但各位点频率有所不同。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 药物耐受性 突变
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2型糖尿病人群一级亲属的胰岛素抵抗分析 被引量:8
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作者 周强 曾连英 +4 位作者 邓英钊 杨静 林桢 陈波 周芸 《检验医学与临床》 CAS 2013年第5期545-547,549,共4页
目的探讨2型糖尿病人群一级亲属(FDR)的胰岛素抵抗指数的变化和临床意义。方法分别测定广州地区2型糖尿病家庭和健康人群家庭成员的体质量指数(BMI)、腰围、臀围、空腹胰岛素(FIN)、空腹血糖(FBG)、血脂的水平,计算胰岛素抵抗指数(IRI)... 目的探讨2型糖尿病人群一级亲属(FDR)的胰岛素抵抗指数的变化和临床意义。方法分别测定广州地区2型糖尿病家庭和健康人群家庭成员的体质量指数(BMI)、腰围、臀围、空腹胰岛素(FIN)、空腹血糖(FBG)、血脂的水平,计算胰岛素抵抗指数(IRI)。结果 (1)2型糖尿病与其一级亲属比较,FBG、体脂分布百分比(BF%)差异有统计学意义(P<0.05)。(2)2型糖尿病与健康对照组比较,BF、IR、FBG、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)差异有统计学意义(P<0.05)。(3)2型糖尿病其一级亲属与健康对照组比较,BMI、IR、FBG、TG、HDL差异有统计学意义(P<0.05)。(4)IR与BMI、BF、HBCI、TG、HDL有明显相关关系。结论推测2型糖尿病的一级亲属存在胰岛素抵抗高危易感性。肥胖和胰岛素抵抗在向2型糖尿病的发生和发展过程中起了一定作用。 展开更多
关键词 2型糖尿病 一级亲属 胰岛素抵抗 肥胖
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丁胺卡那霉素对EDTA依赖性凝集血小板的解离及其机制 被引量:13
18
作者 周小棉 赖金甜 +1 位作者 张伟红 邓伟雄 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期429-431,共3页
目的研究丁胺卡那霉素对EDTA抗凝剂依赖的聚集血小板的解离作用和机制,为血常规标本中血小板凝聚提供可靠的解决方法。方法在EDTA依赖的假性血小板减少症(PTCP)患者的EDTA-K2抗凝血样本中,于不同时间段加入不同浓度丁胺卡那霉素进行凝... 目的研究丁胺卡那霉素对EDTA抗凝剂依赖的聚集血小板的解离作用和机制,为血常规标本中血小板凝聚提供可靠的解决方法。方法在EDTA依赖的假性血小板减少症(PTCP)患者的EDTA-K2抗凝血样本中,于不同时间段加入不同浓度丁胺卡那霉素进行凝集血小板的解离试验,通过血小板计数和涂片观察解离效果;用流式细胞仪检测血小板膜表面CD41、CD61、CD62p、PAC-1和IgG的表达百分率。结果抽血后1h内加入丁胺卡那霉素对血小板凝集的解离作用明显,血小板计数可恢复到即时检测的水平,血小板CD62p、PAC-1和IgG的表达量被显著抑制,而CD41和CD61未受明显影响。结论PTCP患者血常规样品抽血后1h内加入丁胺卡那霉素能有效解离凝集的血小板,作用机制可能与抑制患者血小板膜表面CD62p、PAC-1和IgG的表达有关;此法有助于解决EDTA所致的血小板计数的假性减少。 展开更多
关键词 假性血小板减少 血小板聚集 丁胺卡那霉素 解离
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EBV-LMP1 cDNA的克隆测序与原核表达质粒构建 被引量:4
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作者 林勇平 吴淑华 +2 位作者 杨英 汤郡 马桂璋 《热带医学杂志》 CAS 2002年第4期337-340,共4页
 目的 克隆EBV LMP1cDNA ,构建EBV LMP1基因的原核表达重组质粒。方法 通过RT PCR技术从B95 8细胞中扩增EBV LMP1cDNA ,克隆至pGEM Teasy载体上并测序 ;利用引物上的BamHⅠ与HindⅢ酶切位点将LMP1基因插入载体pET 32a,转化JM10 9菌...  目的 克隆EBV LMP1cDNA ,构建EBV LMP1基因的原核表达重组质粒。方法 通过RT PCR技术从B95 8细胞中扩增EBV LMP1cDNA ,克隆至pGEM Teasy载体上并测序 ;利用引物上的BamHⅠ与HindⅢ酶切位点将LMP1基因插入载体pET 32a,转化JM10 9菌。提取质粒 ,限制性内切酶消化 ,琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果 扩增的LMP1cDNA长度为 115 8bp ,测序结果与已知序列吻合 ,重组原核表达质粒经酶切鉴定表明获得正确重组子。结论 成功克隆了EBV LMP1cDNA ,并构建了pET 32a LMP1原核表达载体 。 展开更多
关键词 LMP1 CDNA 克隆 测序 原核表达 EB病毒
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产AmpC酶铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药机制的研究 被引量:12
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作者 李小燕 吴爱武 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2008年第6期423-428,共6页
目的研究产AmpC酶的铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的分子机制。方法2003—2007年从临床标本中分离到铜绿假单胞菌220株,采用三维试验筛选产β内酰胺酶(包括AmpC酶)的铜绿假单胞菌,应用多重PCR检测产AmpC酶的铜绿假单胞菌质粒携带的AmpC耐... 目的研究产AmpC酶的铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的分子机制。方法2003—2007年从临床标本中分离到铜绿假单胞菌220株,采用三维试验筛选产β内酰胺酶(包括AmpC酶)的铜绿假单胞菌,应用多重PCR检测产AmpC酶的铜绿假单胞菌质粒携带的AmpC耐药基因,应用荧光定量RT-PCR的方法检测染色体AmpC酶基因和oprD2基因的表达情况。结果共检出40株产β内酰胺酶的菌株,其中产AmpC酶、ESBLs、金属酶(MBL)和未知酶型铜绿假单胞菌的构成比分别是62.5%(25/40)、20%(8/40)、7.5%(3/40)和10%(4/40)。25株产AmpC酶菌株均有不同程度AmpC酶基因表达量升高,其中,仅1株细菌携带DHA质粒型AmpC酶基因,12株菌oprD2基因表达量减低,这些菌株均对亚胺培南耐药,13株菌oprD2基因表达量正常,其中仅5株菌对亚胺培南耐药;7株菌(占产AmpC酶菌株的28%,不产金属酶)的酶粗提物能微弱水解IPM,这7株菌AmpC酶基因的表达量均有明显升高,其中5株菌同时伴有oprD2基因表达量降低。结论铜绿假单胞菌产生的AmpC酶可微弱水解亚胺培南,且其水解亚胺培南可能与AmpC酶产生量有一定关系;产AmpC酶铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的原因可能是细菌AmpC酶表达量增加和oprD2表达量减低两者共同作用的结果。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 AMPC酶 OprD2蛋白 荧光定量反转录聚合酶链反应
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