CDK4蛋白在胞浆中的表达与肺癌临床病理学特征及预后的关系

目的评估CDK4蛋白在胞浆中表达与肺癌患者临床病理学特征的关系。方法利用免疫组化和统计学方法分析CDK4蛋白在胞浆中表达以及与肺癌患者临床病理参数及预后之间的相关性。结果与正常肺组织相比,CDK4蛋白在肺癌胞浆中的表达并没有明显增高(P=1.000)。然而,在肺癌组织中,CDK4表达上调正向相关于患者的临床分期和淋巴结转移(P=0.001,P=0.00 1)。预后分析表明,CDK4蛋白在胞浆表达越高,患者生存时间越短。多变量分析显示,CDK4在胞浆中过表达是预测肺癌患者预后不利因素(P<0.001)。结论 CDK4蛋白在细胞胞浆中过表达也促进肺癌的发病过程,且其是预测肺癌患者预后的不利因子。

《肾脏病理》网络课件的研制

结合<肾脏病理>网络课件的研制与应用,介绍了网络课件制作的具体方法、常用软件及技术路线,总结了制作技巧及注意事项,为医学网络课件的制作提供经验.

基于网络资源的《病理学》课程教学改革试验研究

通过基于网络资源的《病理学》课程教学改革试验的研究和探索，建立了在网络环境下研究性学习模式，培养了学生主动探索精神、合作意识、创新能力，提高了学生的整体素质；激发了学生的学习兴趣，极大地调动了学生学习的积极性和主动性，具有显著提高学习效果的作用。

《肝脏病理》网络课件的研制与体会

通过对《肝脏病理》网络课件制作背景、设计方案、开发内容的介绍，总结了网络课件制作中应遵循的原则，为病理课程教学改革提供了实践经验。

胃肠道原发B细胞性淋巴瘤的病理学特征及播散机制

目的 研究胃肠道原发B细胞性淋巴瘤的病理学特征及淋巴细胞归巢受体CD44在其播散中的作用。方法 对 199例胃肠道原发B细胞性淋巴瘤进行病理组织学及免疫组化研究。结果 胃肠道原发B细胞性淋巴瘤以DL(70 .9% )发病率最高 ,MALT淋巴瘤 (9.5 % )次之。LN1染色在MALT淋巴瘤、MZC均为核周点状阳性。 1例MLP肿瘤细胞LN1染色特性及形态学特征与MALT淋巴瘤相同。 199例中单克隆性cIg检出率为 49.7% ,在MALT淋巴瘤为10 0 %。临床Ⅲ、Ⅳ期组的CD44阳性率明显高于Ⅰ、Ⅱ期组 (P <0 .0 0 1) ;在全身弥漫播散病例CD44阳性率高于MALT内播散者。结论 MALT淋巴瘤来源于MZC ,其惰性生物学行为与细胞来源有关。MLP除可为多中心起源的套细胞来源外 ,也可是MALT淋巴瘤晚期扩散的结果。cIg检测有助于胃肠道淋巴组织良恶性疾病的鉴别诊断。CD44表达与淋巴瘤的血道播散密切相关。

中西医院校《病理学》教学对比及引发的思考

文章主要对高等中、西医院校《病理学》教学概况进行比较,就存在的差距引发思考,并初步探讨中医院校《病理学》教学的改革和出路。

VEGF-A和VEGF-C在乳腺癌组织中的表达及其意义

背景与目的:VEGF家族都与血管生成相关,血管内皮生长因子-A(vascularendothelialgrowthfactorA,VEGF-A)和血管内皮生长因子-C(vascularendothelialgrowthfactorC,VEGF-C)与肿瘤的生长和转移关系密切。本研究探讨乳腺癌组织中VEGF-A、VEGF-C的表达与癌细胞增殖、微血管密度(microvesseldensity,MVD)和淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组织化学方法观察98例乳腺癌组织中VEGF-A、VEGF-C、增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)、CD34的表达情况。结果:98例乳腺癌组织中,VEGF-A阳性率为85.7%(84/98),VEGF-C阳性率90.8%(89/98),两者在淋巴结转移组表达均高于未转移组,差异具有显著性(P<0.05)。PCNA的表达随着VEGF-A、VEGF-C表达强度增强,肿瘤细胞增殖活性也随之增强(r=0.432,P=0.000;r=0.294,P=0.001)。淋巴结转移组MVD值(64.26±26.40)明显高于未转移组(50.29±29.35)(P<0.05),且随着VEGF-A表达增强,MVD也随之增高(r=0.327,P<0.001),VEGF-C表达与MVD无相关性(r=0.123,P>0.05)。结论:VEGF-A主要介导了血管生成、细胞增殖和转移;VEGF-C促进乳腺癌细胞增殖,与血管密度无关,与淋巴结转移密切相关。

VEGF-C在淋巴管生成及乳腺癌淋巴道转移中的作用

目的:探讨阻断VEGF-C/Flt-4调控系统对淋巴管生成和乳腺癌淋巴道转移的影响。方法:体外培养胎牛胸导管内皮细胞,观察VEGF-C和抗Flt-4抗体对淋巴管内皮细胞增殖的影响;设计合成VEGF-C反义脱氧寡核苷酸(ASODN),体外实验观察其对VEGF-C基因表达的影响;建立乳腺癌裸鼠原位移植瘤模型并观察ASODN对肿瘤淋巴管生成及肿瘤生长转移的影响。结果:加入前列腺癌细胞PC3(高表达VEGF-C)上清后,淋巴管内皮细胞增殖活跃;加入抗Flt-4抗体后各时段细胞计数均明显少于其它各组。体外实验RT-PCR及Western blotting显示ASODN作用的MCF-7细胞组VEGF-C mRNA及蛋白表达均低于对照组。体内RT-PCR检测表明ASODN组移植瘤VEGF-CmRNA表达明显受抑制;5-Nase-ALPase双重酶组织化学法结果显示ASODN组移植瘤的淋巴管生成明显减少;ASODN组肿瘤生长速度较对照组缓慢,且肿瘤体积、淋巴结转移明显低于对照组。结论:VEGF-C/Flt-4调控系统与乳腺癌组织的淋巴管生成及肿瘤的淋巴道转移密切相关。阻断淋巴管内皮细胞Flt-4表达,可在一定程度上抑制肿瘤细胞诱导的淋巴管内皮细胞增殖;ASODN通过下调乳腺癌VEGF-C的表达,减少肿瘤淋巴管的生成及淋巴结转移。

p21、CD44、IMVD预测乳腺癌转移潜能价值的研究

目的 研究 Ras基因编码蛋白 p2 1、CD44、IMVD预测乳腺癌转移潜能的价值。方法 应用免疫组化L SAB法对 76例乳腺癌、34例淋巴结转移灶进行 p2 1蛋白、CD44、V RAg、PCNA进行检测 ,并与淋巴结转移有无进行对比分析。结果 p2 1阳性率在乳腺癌为 76 .3% (5 8/ 76 ) ,伴淋巴结转移组 (30 / 34 )明显高于无转移组 (2 8/42 )。 CD44阳性率与 IMVD在转移组明显高于无转移组。 p2 1与 CD44、PCNA呈正相关 (r=0 .6 337,P<0 .0 1;r=0 .30 44 ,P<0 .0 5 )。 IMVD在 p2 1阳性组明显高于阴性组 ,两组间差异有极显著性 (P<0 .0 1)。结论 p2 1蛋白、CD44、IMVD联合检测可作为预测乳腺癌转移潜能敏感的指标。

人NESG1基因慢病毒载体的构建及其在293FT细胞中的表达

目的克隆人NESG1基因,构建与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合表达的慢病毒载体pGC-FU-NESG1-EGFP,包装慢病毒,感染293FT细胞并进行鉴定。方法以NESG1全长克隆为模板扩增其编码框序列,通过限制性内切酶AgeI酶切、T4 DNA连接酶连接,将NESG1插入慢病毒载体pGC-FU-EGFP,构建pGC-FU-NESG1-EGFP重组载体。质粒转化感受态细菌,筛选阳性克隆,经PCR及测序鉴定正确后通过脂质体将慢病毒三质粒系统共转染人胚肾细胞系293FT,进行慢病毒包装并测定病毒滴度。病毒感染293FT细胞,荧光显微镜下观察感染效率,Western blot方法检测NESG1-EGFP融合蛋白的表达情况。结果成功构建慢病毒表达载体pGC-FU-NESG1-EGFP,三质粒共转染293FT细胞后可见大量绿色荧光;浓缩病毒后测定其滴度为2×107 TU/ml;以复感染系数MOI为1感染293FT细胞,感染效率在90%以上。Western blot证实细胞表达NESG1。结论成功构建NESG1慢病毒表达载体,包装得到高滴度慢病毒,为后续感染鼻咽癌细胞,探索其在鼻咽癌发生和发展中的作用奠定了基础。

CD105在乳腺癌发生发展过程中表达的研究

目的:用CD105单克隆抗体(mAb)检测乳腺癌演变中微血管密度(MVD)变化,旨在探讨CD105在乳腺癌发生发展过程中的表达及分析其临床相关因素。方法:采用免疫组织化学(SP法)检测20例导管上皮不典型增生(ADH)、20例导管内癌(DCIS)和20例微浸润性癌(MDC)和60例浸润性导管癌[IDC(NOS)]的CD105表达,进行MVD计数。结果:用CD105标记乳腺ADH、DCIS、MDC和IDC(NOS)的MVD分别是8.25±5.78、10.05±4.23、25.35±7.62和36.82±7.11,4组两两组间差异有统计学意义,P<0.05,P值分别为0.035、0.001和0.001。在IDC(NOS)中,CD105标记的MVD与腋淋巴结转移有关,P<0.05;而与年龄、组织学分级、肿瘤直径及临床分期无关,P>0.05。结论:CD105标记的MVD可能与乳腺癌的预后有关,CD105可能会成为鉴别乳腺良恶性病变和靶向治疗及化学预防的标志之一。

蛋白质组学筛选抑癌基因CCDC19在鼻咽癌中的调控蛋白

目的本研究利用蛋白质组学筛选抑癌候选基因CCDC19在鼻咽癌中可能调控蛋白。方法提取CCDC19稳定高表达的鼻咽癌3D8和对照鼻咽癌C6细胞蛋白,并采用双向凝胶电泳(2D-PAGE)技术进行有效分离,图像扫描后获得高分辨率的2D-PAGE图谱。选用差异蛋白质组学技术筛选差异蛋白位点,然后用肽质量指纹谱(peptide mass fingerprinting,PMF)和数据库检索技术给予鉴定。荧光定量PCR和Western blot验证差异基因表达水平。结果质谱分析显示,FASN、CTSD和PGK1在CCDC19过表达的3D8细胞中表达下调,分别为-3.28、-1.64和-6.97倍。荧光定量PCR在mRNA水平验证了FASN、CTSD和PGK1以及Western blot在蛋白水平验证CTSD蛋白在3D8细胞中表达下调。结论 FASN、CTSD和PGK1可能是CCDC19在鼻咽癌中调控的靶基因。

靶向骨桥蛋白基因的RNA干扰对裸鼠肝癌影响的实验研究

目的检测骨桥蛋白(OPN)的核糖核酸(RNA)干扰技术对裸鼠肝癌的影响作用,探讨RNA干扰对肝癌基因治疗中的有效性和相关机制。方法体外化学合成骨桥蛋白序列特异性的短发夹RNA(shRNA)质粒载体,并导入肝癌细胞HepG2裸鼠皮下移植瘤,尾静脉注射OPNshRNA表达载体,观察其对肝癌生长的影响作用;酶联免疫吸附(ELISA)方法检测OPN在肿瘤组织中的蛋白浓度。结果全身系统性给予OPN shRNA后,空载体组、阴性shRNA组及OPN shRNA转染组肿瘤体积分别为235±5mm3、222±24mm3(P=0.2)、98±24mm3(P<0.05);瘤组织中OPN浓度在空载体组、阴性shRNA组及OPN shRNA转染组分别为498±8pg/mg、382±98pg/mg和122±56pg/mg(P<0.05)。结论OPN的RNA干扰明显抑制了肿瘤的生长,有望通过RNA干扰技术实现肝癌的基因治疗。

磷酸酰肌醇-3激酶抑制剂对小鼠气道炎症影响的实验研究

目的观察磷酸酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂LY294002对卵白蛋白(OVA)诱导哮喘小鼠气道炎症的影响。方法Balb/c小鼠30只,随机分为三组,每组10只:PI3K抑制剂治疗组(LY组),OVA组和正常对照组(NC组)。通过OVA多次腹腔注射致敏和反复雾化激发,建立哮喘小鼠模型。末次抗原激发后48h收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和骨髓标本,计数细胞总数和嗜酸性粒细胞(Eos),并行肺组织学检查。结果与OVA组比较,LY组BALF中细胞总数及Eos绝对数明显减少(p<0.05);肺组织中细支气管、血管周围Eos浸润得到控制,气道粘液分泌减少。结论PI3K抑制剂(LY294002)对卵白蛋白(OVA)致敏的哮喘小鼠气道炎症具有抑制作用。

CD105与肿瘤关系的研究进展

CD105(Endoglin)是血管内皮标记,已成为抗癌治疗研究中的热点。CD105是转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)家族受体蛋白,主要在血管内皮细胞表达,亦是调节细胞对TGF-β的反应成分之一。CD105主要在胚胎形成和恶性肿瘤表达较高,主要表达在肿瘤的血管。CD105标记的微血管密度(microvessel density,MVD)是一个独立的预后指标,同时MVD的数目和生存率成反比,故可能成为肿瘤诊断、发生发展及其预后的新指标。CD105与以往泛血管内皮标记因子相比,是一种较佳的新生血管生成标志,似可作为衡量血管内皮细胞增殖状态的指标之一。以CD105为靶分子判断恶性肿瘤发生发展与研究肿瘤预后可望成为一种有前途的方法。

急性髓细胞白血病免疫表型检测分析及临床意义

目的探讨免疫表型检测对急性髓细胞白血病的诊断、治疗、预后的临床意义。方法采用流式细胞仪对急性髓细胞白血病患者的骨髓样本进行免疫表型检测。结果 58例急性髓细胞白血病患者主要表达CD117(91.4%)、CD33(89.7%)及CD13(74.1%),淋系抗原在急性髓细胞白血病患者中也有阳性表达(Ly+AML),其中CD7表达率最高,占22.4%;M3较少表达CD34及HLA-DR。结论白血病免疫表型检测对急性髓细胞白血病诊断有重要意义,伴有CD7+的AML患者CR率低于CD7-的AML患者。

溶血磷脂酸在卵巢癌细胞内HER2/neu的激活作用

目的探索溶血磷脂酸(LPA)在卵巢癌细胞内HER2/neu的激活作用。方法通过免疫沉淀反应和蛋白印迹法检测卵巢癌细胞中HER2的变化。结果 LPA能诱导卵巢癌细胞中HER2的快速和瞬态的磷酸化。结论 LPA在卵巢癌细胞中作为HER2的上游分子,对卵巢癌细胞有强有力的刺激,可诱导卵巢癌细胞中HER2磷酸化。

Cyc1慢病毒干扰载体的构建及在鼻咽癌细胞中干扰效率检测

目的检测Cyc1在鼻咽癌中的表达。构建稳定干扰Cyc1慢病毒载体及检测其在鼻咽癌细胞中的干扰效率。方法应用基因芯片技术检测Cyc1基因在鼻咽癌组织中的表达。Real-time PCR确证Cyc1基因在鼻咽癌组织和细胞中高表达。构建重组靶向Cyc1的shRNA慢病毒质粒pLentiU6/Cyc1-shRNA。建立稳定干扰Cyc1基因的鼻咽癌细胞系,荧光定量PCR检测干扰效率。结果基因芯片检测显示,Cyc1基因在鼻咽癌组织中高表达。qRT-PCR确证了基因芯片结果的可靠性。在8个鼻咽癌细胞株中,Cyc1基因基本上都显示了高表达,其中最高的为鼻咽癌5-8F细胞。测序验证pLentiU6/Cyc1-shRNA重组质粒构建成功。重组质粒能明显稳定地抑制Cyc1基因在鼻咽癌细胞中的表达。结论 Cyc1基因在鼻咽癌中高表达。构建的靶向Cyc1基因的慢病毒载体能明显抑制其表达。这为研究Cyc1基因在鼻咽癌中的功能及分子机制奠定了基础。

《肾小球肾炎》网络课件的设计与制作

随着现代教育的发展,网络课件的设计与制作已成为现代教育技术研究的一个重要领域。该文介绍了根据肾小球肾炎教学内容及教学目标的要求进行网络课件的设计与制作的总体过程。网络课件给学生创造了立体学习空间,为医学专业课注入了新的内涵和新的信息。

肺癌A549耐药裸鼠移植瘤模型的建立

目的探讨肺癌A549耐药裸鼠移植瘤模型的建立方法,为克服肿瘤多药耐药新药的筛选提供体内研究的模型。为进行肿瘤的体内相关研究和抗癌药物的筛选提供实验基础。方法使用顺铂诱导肺癌A549细胞,以建立其多药耐药细胞株A549/DDP;MTT细胞毒实验检测细胞对顺铂的敏感性;皮下接种法建立裸鼠移植瘤模型;绘制移植瘤生长曲线,观察其增值特性。结果经过8个月的诱导建立了肺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP;MTT细胞毒实验结果显示与A549细胞比较,A549/DDP细胞对顺铂约耐药8倍,并且A549/DDP耐药细胞建立的裸鼠移植瘤仍然保持对顺铂的耐药性;生长曲线结果显示A549/DDP细胞裸鼠移植瘤的增殖速度与A549细胞之间没有显著性差异。结论成功建立了肺癌A549/DDP耐药细胞裸鼠移植瘤模型,可为肺癌耐药的研究提供较理想的动物模型。