原代培养的大鼠远端肺动脉平滑肌细胞的功能研究

目的探索原代培养的大鼠远端肺动脉平滑肌细胞(PASMC)是否具有血管平滑肌的功能,为缺氧性肺动脉高压等肺血管疾病发病机制及药物干预研究打下基础。方法采用显微操作和胶原酶消化法分离、培养大鼠远端PASMC,对培养细胞进行形态学观察、平滑肌α-actin免疫荧光染色鉴定,并用荧光显微镜法观测高钾(60 mmol·L-1KCl)溶液对大鼠远端PASMC的细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响。结果培养的大鼠远端PASMC呈血管平滑肌细胞典型的"峰、谷"状生长,平滑肌α-actin免疫荧光染色呈阳性反应,60 mmol·L-1KCl溶液使PASMC的[Ca2+]i明显增高,5μmol·L-1硝苯地平能完全阻断PASMC的[Ca2+]i对KCl溶液的反应。结论原代培养的大鼠远端PASMC具有典型血管平滑肌细胞形态学、免疫学特征,具有功能正常的电压依赖性钙通道(VDCC),可广泛用于缺氧性肺动脉高压等肺血管疾病发病机制及药物干预的研究。

常压慢性持续缺氧大鼠肺动脉高压模型的建立

目的探索大鼠肺动脉高压模型的建立方法,为慢性缺氧性肺动脉高压发病机制等方面研究提供实验动物模型。方法 Wistar大鼠常压持续缺氧3周,观测大鼠体重、平均肺动脉压(MPAP)、右心室收缩压(RVSP)、右心室肥大指数[RV/(LV+S)]、红细胞比容,并观测肺血管病理学改变及血管壁相对厚度指数(RTI)。结果缺氧组大鼠体重增长缓慢,MPAP、RVSP、RV/(LV+S)、红细胞比容明显高于对照组(P<0.05)。肺组织病理检查示缺氧组大鼠肺内血管管壁明显增厚,管腔狭窄,RTI较对照组显著增加(P<0.05)。结论常压慢性持续缺氧3周能形成较理想的大鼠肺动脉高压模型。

环匹阿尼酸对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞内钙浓度的影响

目的研究环匹阿尼酸(CPA)对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞(PVSMC)细胞内钙浓度([Ca2+]i)的影响及可能机制。方法原代培养大鼠远端PVSMC,并通过形态学和免疫荧光染色鉴定,利用荧光显微镜和InCyte细胞内钙浓度检测系统观测高钾(60 mmol/L KCl)溶液及CPA对PVSMC的[Ca2+]i影响。结果原代培养的PVSMC表现出典型血管平滑肌细胞生长特征,并对平滑肌α-actin免疫荧光染色呈阳性反应;高钾溶液使PVSMC的[Ca2+]i显著升高,5μmol/L硝苯地平能完全阻断PVSMC的[Ca2+]i对高钾溶液的反应;10μmol/LCPA能使含5μmol/L硝苯地平的无钙Krebs溶液孵育的PVSMC的[Ca2+]i短暂小幅升高,恢复细胞外Ca2+至2.5 mmol/L后,10μmol/L CPA能使含5μmol/L硝苯地平的Krebs溶液孵育的PVSMC的[Ca2+]i迅速升高。结论 CPA能够使大鼠远端PVSMC的[Ca2+]i升高,其机制可能与Ca2+从肌浆网释放,并诱发细胞外Ca2+通过钙池操纵性钙通道(SOCC)内流有关。

绝经后骨质疏松症的激素替代治疗

目的 观察绝经后骨质疏松症的激素替代治疗 (HRT)的疗效和安全性。方法 66例绝经后骨质疏松症病人每天口服蓓美力 0.625mg，安宫黄体酮（ MPA） 2.5mg，元素钙 1 000mg。 1年后，测量骨密度及骨代谢生化指标，子宫内膜厚度及乳房。结果 腰背痛积分明显减少（ P< 0.05）；骨密度明显增高（ P< 0.05)。子宫、乳房未见明显改变。结论 激素替代治疗是绝经后妇女骨质疏松症的安全、有效的治疗措施。

同种异体气管移植一例

目的 利用同种异体气管移植治疗病变长度超过 5cm的气管疾病。 方法 1999年 3月 17日为 1例喉癌复发患者行全喉和气管中上段切除 8cm ,供体气管长约 6cm ,经体外灭菌和除抗原处理 16 8h后 ,用 5 5cm一端与气管在隆突上 3cm处吻合 ,另一端与胸骨上皮肤及胸大肌皮瓣作吻合作气管外口。用带蒂胸大肌皮瓣和带蒂大网膜包裹供体气管解决血供。 结果 气管内吻合口生长良好 ,2 6d起供体气管内粘膜开始被自体气管内粘膜取代 ,6 5d复查证实同种异体气管生长良好 ,受体已接受供体 ,移植的气管己与受体气管共长为一体 ,受体气管粘膜已覆盖供体气管 ,比预想的提早了近 2 0d ,无排斥反应。患者术后 30d可带气管套管恢复生活自理 ,35d恢复晨操 ,6 5d可自行驾摩托车出院。 结论 同种异体气管移植治疗病变长度超过 5cm的气管疾病近期是可行的。

慢性咳嗽患者咳嗽敏感性的影响因素

目的探讨慢性咳嗽患者咳嗽敏感性的影响因素。方法按照慢性咳嗽病因诊断程序，入选并诊断慢性咳嗽患者。通过辣椒素咳嗽激发试验测定慢性咳嗽患者（治疗前）的气道咳嗽敏感性，以最先诱发5次或以上咳嗽的辣椒素溶液浓度（C5）的对数作为咳嗽阈值。分析咳嗽阈值与咳嗽积分、年龄、性别、病程、肺通气功能与诱导痰炎性细胞分类间的相关性。结果入选并获得明确诊断的不同病因慢性咳嗽患者共计150例。单因素相关分析显示，慢性咳嗽患者的咳嗽阈值与日间咳嗽积分、性别、年龄、咳嗽病程及诱导痰嗜酸细胞百分比有相关，r分别为-0．175、-0．305、-0．297、-0．238及0．173，P均〈0．05；咳嗽阈值与夜间咳嗽积分、痰中性粒细胞百分比、痰巨噬细胞百分比、痰淋巴细胞百分比及肺通气功能[第1秒用力呼气容积占预计值的百分比（FEV1／pred％）、用力呼气中段流速占预计值的百分比（MMEF／pred％）]均不相关，P均〉0．05。多元线性回归分析显示，咳嗽闽值仅与性别、咳嗽病程有关（P均〈0．01）。结论咳嗽敏感性与咳嗽症状积分反映咳嗽程度的不同特征，性别与咳嗽病程可能影响慢性咳嗽患者的咳嗽敏感性。