职业接触粉尘和烟雾对慢性阻塞性肺疾病及呼吸道症状的影响

目的探究职业接触粉尘和烟雾对COPD及呼吸道症状的影响。方法在中国7省市(北京、上海、广东、辽宁、天津、重庆和陕西)城乡40岁及以上人群的COPD横断面调查的基础上,分析职业接触粉尘和烟雾对COPD及呼吸道症状的影响。对入选人群进行问卷调查和肺功能检测。以支气管舒张试验后的FEV1/FVC<70%作为COPD的诊断标准,并排除其他不完全可逆气流受限疾病。患者自我报告经常有咳嗽、咳痰、气喘或气促症状之一,定义为有呼吸道症状。结果20.5%的被调查者曾经职业接触粉尘和烟雾超过1年。多因素分析显示,职业粉尘烟雾暴露是罹患COPD的危险因素,其OR值及95%CI为1.20(1.04,1.39),其中谷尘为COPD可能的危险因素,其OR值及95%CI为1.48(1.18,1.86);职业粉尘烟雾暴露、采矿、采石、水泥粉尘、油漆、化工和其他职业暴露为患呼吸道症状的危险因素,其OR值及95%CI分别为1.37(1.25,1.49)、2.31(1.67,3.20)、1.71(1.09,2.70)、1.92(1.47,2.52)、1.46(1.16,1.84)、1.58(1.37,1.83)和1.46(1.29,1.64);职业粉尘烟雾暴露与吸烟存在协同作用,可使患呼吸道症状的危险度增加(P=0.006);职业粉尘烟雾暴露对患COPD和呼吸道症状的人群归因危险度(PAR)分别为3.94%和7.05%。结论职业粉尘烟雾暴露与患COPD和呼吸道症状有关;职业粉尘烟雾暴露与吸烟对患呼吸道症状存在协同作用。

无氧阈和高强度运动康复对慢性阻塞性肺疾病患者生活质量的影响

目的比较无氧阈和高强度肺康复运动方案对中重度COPD患者生活质量的影响。方法采用随机、前瞻、对照的研究方法,将41例稳定期中重度COPD患者随机分为无氧阈组15例,高强度组17例,对照组9例。无氧阈组以无氧阈为运动强度,高强度组采用最大可耐受的运动强度,进行每周2次、共12周的踏车运动康复计划。康复治疗前后分别测定静态肺功能、心肺运动试验及圣.乔治呼吸疾病问卷(SGRQ)评分。结果高强度组的运动强度达到最大预计功率的(69±14)%,无氧阈组运动强度为最大功率的(52±7)%,差异有统计学意义(t=-3.850,P<0.01)。康复治疗后无氧阈组SGRQ总分由(44.1±20.7)分下降至(32.2±16.0)分,高强度组SGRQ总分由(40.9±16.1)分下降至(32.6±16.6)分,两组均获得显著改善(P均<0.05),其改善值分别为(11.9±15.5)U和(8.4±9.5)U,均达到临床显著意义(改善大于4U即为显著)。但两组的改善程度差异无统计学意义(Z=-0.540,P=0.589)。SGRQ各部分评分显示康复治疗后高强度组在症状、影响两方面有统计学显著意义的改善(P均<0.01),无氧阈组的症状在康复后有统计学显著意义的改善(P<0.05),而对照组康复前后四项评分差异均无统计学意义。运动能力的改善与SGRQ各项评分的改善无显著线性相关。结论无氧阈和高强度的肺康复运动方案均可显著改善COPD患者疾病相关生活质量,两种方案比较改善程度无显著差异。

人体上呼吸道热态快速自动评测系统对上呼吸道炎症筛查的可行性分析

目的:探讨人体上呼吸道热态快速自动评测系统对上呼吸道炎症筛查的可行性。方法:利用红外热成像技术(IRTI)采集集训期间170名新兵头颈部的红外热像图,采用人体上呼吸道热态快速自动评测系统对受试者的上呼吸道红外热图进行自动评判,与临床问诊及体检进行比较,并进行敏感度、特异度、预检率、假阳性、假阴性和诊断符合率的评价。结果:人体上呼吸道热态快速自动评测系统自动评判结果显示,阴性表达84例、阳性表达86例;临床问诊和体检结果显示,有症状者93例、无症状者77例。人体上呼吸道热态快速自动评测系统对上呼吸道炎症筛查的敏感度为79.57%、特异度为84.42%、阳性预检值为86.05%、阴性预检值为77.38%、假阳性和假阴性分别为20.43%和15.58%,诊断符合率为81.76%。结论:人体上呼吸道热态快速自动评测系统具有较好的应用价值。

沙美特罗/丙酸氟替卡松治疗慢性阻塞性肺疾病的临床疗效

目的观察沙美特罗/丙酸氟替卡松吸入剂(舒利迭)对稳定期、重度及重度以上的慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能的影响和总经济费用的改变。方法将明确诊断的90例COPD患者随机分为对照组和试验组,对照组给予溴已新(必嗽平)和缓释茶碱片(舒弗美),必嗽平16mg口服,每日3次,舒弗美0.2g口服,每12小时1次,试验组在对照组治疗基础上给予舒利迭50/500μg,每次1吸,每12小时1次。观察期为6个月,期间各组均可按需使用短效扩张剂。在疗程前后分别检测肺功能指标和症状评分,并记录两组的总经济费用。结果与对照组比较,治疗后试验组1秒用力呼气容积(FEV1)(1.68±0.28)L vs(1.46±0.16)L(P<0.05)、用力肺活量(FVC)(3.43±0.5)L vs(3.02±0.4)L(P<0.05)、FEV1/FVC(53.4±9.0vs 48.9±5.8,P<0.01);症状评分(37.6±0.9)分vs(42.5±0.8)分均有不同程度的改善,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组的急性加重次数、住院次数及天数、总经济费用明显低于对照组(均P<0.01)。结论舒利迭能够改善稳定期、严重程度为重度及重度以上COPD患者的肺功能,降低总经济费用。

博莱霉素诱导α平滑肌肌动蛋白Cre重组酶转基因小鼠肺纤维化上皮细胞-间质转分化的研究

目的探讨在博莱霉素诱导的肺纤维化中是否发生了上皮细胞-间质转分化(EMT)现象,支气管上皮细胞是否参与了这一过程。方法采用α平滑肌肌动蛋白Cre重组酶转基因小鼠(α-SMA-Cre/R26R双转基因鼠)为实验动物,构建博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化模型,进行组织X-gal染色和α平滑肌肌动蛋白免疫荧光检测。结果气管内灌注博莱霉素的转基因小鼠支气管上皮下部分X-gal蓝染明显增多,终末小气道周围和肺血管壁蓝染细胞出现或增多,部分地区出现了支气管周围肺泡上皮细胞(ACE)阳性蓝染和浸润。结论在博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠模型中可以观察到EMT现象,气道上皮细胞和肺泡上皮细胞能向间充质细胞转化,参与肺纤维化病理过程。

下肢深静脉血栓的诊断研究现状

下肢深静脉血栓形成（deep venous thrombosis,DVT）是临床常见疾病,发病率在国内外均呈逐年增多趋势,文献报道约80%～90%的肺栓塞（pulmonary thromboembolism,PTE）栓子来源于下肢DVT[1,2].另外,急性下肢DWT、常导致深静脉栓塞后综合征（post-thrombotic syndrome,PTS）,给患者健康造成不同程度的危害并导致生活质量降低[3].

呼出气一氧化氮浓度测定与白三烯D4支气管激发试验对支气管哮喘的诊断和评估价值

目的比较呼出气一氧化氮浓度(FENO)测定与白三烯D4(LTD4)支气管激发试验结果对支气管哮喘的诊断和评估价值。方法对83例受试者(20例未控制、22例部分控制、20例完全控制的哮喘患者及21例正常受试者)分别进行FENO测定(瑞典Aerocrine NIOX MINO)和LTD4支气管激发试验,分析两者结果的分布特点及相关性,并通过受试者工作特征曲线(ROC)比较两者对支气管哮喘的诊断价值。结果 80.7%哮喘受试者FENO>25.0 ppb。未控制组与部分控制组落在26.0～49.0 ppb区间的比例高于完全控制组。未控制组与部分控制组PD20FEV1-LTD4中位数及四分位间距均小于完全控制组。PD20FEV1-LTD4的ROC曲线下面积[AUC:0.914,95%CI:(0.855,0.974)]大于FENO测定[AUC:0.820,95%CI:(0.718,0.921)]。PD20FEV1-LTD4≤4.800 nmol的灵敏度(0.8710比0.8065)及特异度(0.9048比0.7619)均高于FENO≥26.0 ppb作为阳性阈值。结论与FENO测定相比,LTD4支气管激发试验的灵敏度和特异度更高,对哮喘的诊断价值更大。

应用酶切富集PCR法检测非小细胞肺癌患者胸腔积液表皮生长因子受体基因突变

目的探讨酶切富集PCR法检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者胸腔积液表皮生长因子受体基因(EGFR)外显子19缺失和外显子21 L858R突变的临床意义。方法采用EGFR基因突变酶切富集及非酶切富集PCR法对30例NSCLC患者胸腔积液游离核酸EGFR基因外显子19缺失和外显子21 L858R突变进行分析。结果30例NSCLC患者中,酶切富集PCR法分别检出EGFR基因外显子19缺失10例(33.3%)和外显子21 L858R突变5例(1.7%),非酶切富集PCR法则仅能分别检出6例(20.0%)和1例(3.3%);两种方法检出率差异有统计学意义(P=0.032)。在接受吉非替尼治疗的4例患者中,2例检出EGFR基因突变患者治疗后肿瘤均部分缓解。结论酶切富集PCR法可以高效、经济、准确地检测NSCLC患者胸腔积液游离核酸EGFR基因突变,可能成为临床NSCLC患者选择EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗的预测方法。

肝X受体激动剂T0901317抑制TGF-β1诱导的人正常肺成纤维细胞α-SMA的表达

目的探讨肝X受体激动剂T0901317对TGF-β1诱导的人正常肺成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法组织块贴壁法培养人正常肺成纤维细胞,波形蛋白和角蛋白免疫细胞化学鉴定。T0901317和/或TGF-β1刺激人正常肺成纤维细胞后,分别应用RT-PCR,Western blot和免疫荧光观察α-SMA mRNA和蛋白水平的表达。结果人肺成纤维细胞表达波形蛋白而不表达角蛋白。RT-PCR,Western blot,免疫荧光结果均显示正常肺成纤维细胞基态下组成性表达少量的α-SMA,TGF-β15ng/ml即可以诱导α-SMA mRNA和蛋白表达的明显上调,而T09013175μg/ml时可以明显抑制这种表达的上调。结论肝X受体激动剂T0901317可以在基因和蛋白水平抑制TGF-β1诱导的体外人正常肺成纤维细胞α-SMA表达的上调,可能具有潜在抗纤维化应用价值。

非小细胞肺癌患者外周血表皮生长因子受体基因突变的检测及临床意义

目的探讨外周血表皮生长因子受体(EGFR)基因突变在非小细胞肺癌(NSCLC)吉非替尼治疗适宜患者筛选中的价值。方法对2005年12月至2007年12月在广州医学院第一附属医院肿瘤血液中心治疗的170例NSCLC患者,应用EGFR基因突变酶切富集PCR法分析血浆游离核酸EGFR基因外显子19缺失和外显子21L858R突变。分析血浆EGFR基因突变与性别、吸烟史、病理类型、TNM分期、吉非替尼治疗客观缓解率和疾病无进展生存期间的关系。结果 170例血浆标本共检出血浆EGFR基因突变77例,突变率为45.3%。血浆EGFR基因突变主要见于肺腺癌患者(P<0.001)及非吸烟者(P=0.001)。在33例接受吉非替尼治疗的患者中,血浆EGFR基因突变阳性患者的客观有效率和中位疾病无进展生存期均显著优于血浆EGFR基因突变阴性患者(P=0.001)。结论血浆游离核酸酶切富集PCR法能够灵敏而特异地检测NSCLC的EGFR基因突变。突变检测阳性者对吉非替尼的反应率明显高于野生型患者。

高迁移率族蛋白B1和α平滑肌肌动蛋白在博莱霉素诱导肺纤维化中的表达

目的检测高迁移率族蛋白B1（HMGB1）和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）在博莱霉素（BLM）致小鼠肺纤维化模型肺内的表达水平，探讨HMGB1在肺纤维化发病机制中的作用。方法取20只4．6周龄C57BL／6雄性小鼠，随机分为BLM组和生理盐水（NS）对照组，每组10只。分别向气管内灌注BLM（3mg／kg）和NS，10d后处死小鼠。应用RT—PCR法检测两组肺组织HMGB1和α—SMA的mRNA表达水平，应用免疫组织化学检测两组肺组织中HMGB1和α-SMA的蛋白表达水平。结果RT-PCR半定量和免疫组织化学半定量分析结果显示，BLM组HMGB1的mRNA和蛋白表达均较NS对照组显著增加（0．61±0．08比0．15±0．02，13．12±1．33比7．92±1．10，P均〈0．01）；BLM组α—SMA的mRNA和蛋白表达均较NS对照组显著增加（0．89±0．12比0．60±0．07，13．66±1．01比8．18±1．33，P均〈0．01）。结论在BLM诱导的肺纤维化中肺组织的HMGB1和α—SMA表达增加。肺纤维化病理过程可能与HMGB1表达增加并活化α—SMA的表达有关。

支气管内超声的应用进展

支气管镜检查是呼吸系统疾病重要的检查手段,但由于气道表面以及管壁的限制,对于管壁内以及纵隔病变,医生只能通过观察支气管黏膜改变、管腔狭窄、管壁压迹等间接征象作出判断。近年来,随着超声技术的发展,使得微型超声探头可以经支气管镜的操作通道进入气道。

人骨髓间充质干细胞在心肌损伤裸鼠体内的归巢与分化

目的:探讨在心肌细胞移植中机体内环境因素对人骨髓间充质干细胞(MSC)向心肌细胞(CM)定向分化的影响。方法:取人骨髓血,用Percoll(1 073 g/L)进行密度梯度离心及贴壁筛选结合的方法,体外培养扩增人骨髓MSC,以流式细胞仪鉴定其纯度,并进行免疫细胞化学染色。随后将人骨髓MSC植入异丙肾上腺素所致急性心肌损伤的裸鼠体内。3周后,取心脏组织块进行免疫组织化学染色检测。结果:体外分离纯化培养扩增的人骨髓MSC,可高表达CD44,CD105和波形蛋白,不表达CD31,CD34,CD45,肌钙蛋白I和结蛋白。细胞移植3周后,人骨髓MSC在心肌损伤区域均能分化为表达肌钙蛋白I,结蛋白和波形蛋白的细胞。结论:体外分离培养扩增的人骨髓MSC可归巢于受损心脏,并参与体内心肌损伤的修复,具有向CM分化的潜能。

酶切富集PCR法在非小细胞肺癌患者EGFR基因突变检测中的应用

目的评价酶切富集PCR法在非小细胞肺癌患者EGFR基因突变临床检测中的可行性。方法应用酶切富集PCR及非酶切富集PCR法分析非小细胞肺癌患者EGFR基因突变状况。结果在50份肿瘤组织、55份血浆、15份血清标本中,酶切富集PCR法分别检出EGFR基因突变22例(44.0%)、29例(52.7%)、9例(60.0%),而非酶切PCR法则仅能检出EG-FR基因突变16例(32.0%)、7例(12.7%)、2例(13.3%),P=0.216、<0.001和0.008;应用酶切富集PCR法检测15例配对血浆、组织标本和15例配对血浆、血清标本EGFR基因突变,其检出率无明显差异(53.3%vs 46.7%和66.7%vs 60.0%)。结论酶切富集PCR法适用标本广泛、简便易行,便于临床非小细胞肺癌患者EGFR基因突变筛查。

二种不同的诱导方法诱导人骨髓间充质干细胞分化的心肌样细胞L型钙电流的变化

目的利用膜片钳技术检测体外两种不同诱导方法诱导人骨髓间充质干细胞(hMSCs)分化为心肌样细胞的L型钙电流(ICa-L)。方法体外培养扩增hMSCs,采用①5-氮胞苷(5-Aza,10μmol/L)化学诱导4周;②原代分离培养SD乳鼠搏动心肌细胞(CMs)制备的心肌微环境诱导10天直至CMs停止搏动。利用膜片钳技术检测两种不同方法诱导分化的心肌样细胞、hMSCs及原代CMs的ICa-L。结果 5-Aza与心肌微环境诱导分化的心肌样细胞较hMSCs的ICa-L增强(112.60±8.26,120.50±9.35pAvs96.67±13.50pA,P均<0.05);低于CMs组(263.86±39.01pA,P<0.01)。结论两种诱导方法诱导的心肌样细胞ICa-L均增强。

模拟新收患者在临床教学中的应用

探讨模拟新收患者的方法在临床医学教学中的意义。医学实习生出科考核时,对照组予专业理论闭卷考试,实验组进行模拟新收患者的考核;追踪观察1年。实验组学生工作较为冷静,善于主动与患者沟通和向带教老师提问,在临床实践中具有较强的动手能力;毕业成绩优良,顺利通过试工。出科模拟新收患者比出科理论闭卷考试能增强学习效果,提高学生的科研创新和解决问题等能力。

胶原酶消化法培养大鼠远端肺静脉平滑肌细胞

目的：探索大鼠发病机制远端肺静脉平滑肌细胞（PVSMC）的原代培养方法,为体外研究肺血管疾病提供实验材料.方法：采用显微操作和Ⅰ型胶原酶消化法原代培养大鼠远端PVSMC,对培养的细胞进行形态学观察、平滑肌α-actin免疫荧光染色鉴定,并用激光扫描共聚焦显微镜计算纯度.结果：镜下培养的细胞呈典型的＂峰-谷＂状生长,平滑肌细胞特异的平滑肌α-actin蛋白阳性表达,细胞纯度达98.5%.结论：用胶原酶消化法能够原代培养大鼠远端PVSMC,所获细胞数量多、纯度高.

哮喘患者一磷酸腺苷支气管激发试验的临床应用价值

目的探讨一磷酸腺苷(AMP)支气管激发试验在哮喘中的临床应用价值。方法纳入健康志愿者24例(正常对照组),哮喘患者60例[哮喘未控制组19例、部分控制组22例、完全控制组19例],急性上呼吸道感染患者20例(上炎组)。均进行AMP支气管激发试验。分析各组FEV1下降20%时AMP累积剂量(PD20FEV1-AMP)、激发试验敏感性、特异性及不良反应。随访23例患者(未控制组11例和部分控制组12例),分别予以规范吸入ICS治疗3和6个月后再次行AMP支气管激发试验,并在每次试验前1周行哮喘症状评分。分析PD20FEV1-AMP值与哮喘症状评分的相关性。PD20FEV1-AMP数据以中位数(四分位间距)[M(QR)]表示。结果对照组阳性率为0(0/24);哮喘未控制组阳性率为100%(19/19),哮喘部分控制组阳性率为86.4%(19/22),哮喘完全控制组阳性率为26.3%(5/19);上炎组阳性率为0(0/20)。对照组和上炎组的PD20FEV1-AMP均>40mg;哮喘未控制组、部分控制组、完全控制组的PD20FEV1-AMP分别为0.6mg(0.4mg)、5.38mg(32.67mg)、40mg(29.3mg)。AMP支气管激发试验的灵敏度、特异度分别为72%、100%。lgPD20FEV1-AMP与哮喘症状评分的对数呈负相关(r=-0.598,P<0.01)。不良反应包括喘息(37.5%)、咳嗽(21.2%)、气促(15.4%)、咽部刺激感(7.7%)、胸闷(7.7%)、咳痰(4.8%)、发绀(1.0%)。结论AMP支气管激发试验能够诊断和鉴别诊断哮喘,评估哮喘的严重程度和控制情况,监测哮喘的治疗疗效,对哮喘治疗方案有指导性意义,且不良反应轻微,具有较好的临床应用前景。