小鼠Foxp3片段的表达和多克隆抗体的制备

克隆了小鼠Foxp3片段,采用基因重组方法,构建重组表达载体pGEX4T1Foxp3。应用在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导产生的GSTFoxp3融合蛋白免疫家兔,制备兔抗Foxp3多克隆抗体。经过ELISA检测,抗血清的效价达1∶128000;采用Westernblot检测,转染Foxp3MIGR载体的Ψam细胞中表达Foxp3蛋白,而仅转染MIGR空载体的Ψam细胞中为阴性表达,表眀抗体具有特异性。

重组人粒细胞集落刺激因子注射液局部治疗化疗后口腔黏膜炎的疗效观察

目的探讨重组人粒细胞集落刺激因子注射液局部治疗患者化疗后口腔黏膜炎的疗效及护理方法。方法按抽签随机法将100例化疗后口腔黏膜炎患者分为两组,对照组用常规药物0.9%氯化钠溶液+庆大霉素+维生素B12漱口液,观察组用0.9%氯化钠溶液+重组人粒细胞集落刺激因子注射液稀释液含漱,分别按WHO口腔黏膜反应0～4级标准,观察患者口腔黏膜的愈合情况及愈合的时间。结果观察组与对照组的治愈率比较,χ2=5.263,P<0.05,两组治愈时间比较,Z=4.704,P<0.01,差异有统计学意义,即观察组个治疗效果优于对照组。结论用0.9%氯化钠溶液+重组人粒细胞集落刺激因子注射液稀释液含漱显著提高了化疗后口腔黏膜炎的治愈率,缩短了治疗的时间,提高了患者的生存质量。

嗜碱粒细胞性白血病认识现状

急性嗜碱粒细胞性白血病(ABL)是急性白血病(AL)中的罕见类型,占造血系统恶性疾病不到2%.它具有一般AL的临床表现 且急性起病,病程短,多死于颅内出血,少数发生DIC,高组胺血症以消化性溃疡为主要表现,ABL对治疗有抗药性.诱导缓解后可出现类过敏反应和DIC,大量肺出血,与嗜碱粒细胞(BC)溶解,脱颗粒释放肝素有关,血清类胰蛋白酶也有异常升高1988年9月在北京召开的第二届全国血细胞学术会议定出ABL的诊断标准(1)具有AL、慢性白血病急变型的临床症状;(2)血及骨髓BC>20%;(3)排除其它引起BC增多的因素.目前诊断ABL还开展了免疫表型、超微结构、染色体和细胞酶学的分析等.

正电子发射计算机断层摄影显像与CT在判定非小细胞肺癌术前分期的比较

目的比较正电子发射计算机断层摄影显像(PET-CT)和CT显像在判定可切除非小细胞肺癌(NSCLC)患者原发灶和纵隔淋巴结有无转移上的临床价值。方法42例可切除非小细胞肺癌患者于手术前常规进行PET-CT和CT胸部显像,判定纵隔淋巴结有无转移。1个月以内行开胸手术纵隔淋巴结清扫以获取原发灶及纵隔淋巴结病理标本,对切除的纵隔淋巴结进行常规染色,病理学检查结果与术前影像学检查比较。结果CT显像诊断纵隔淋巴结的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为71.8%(23/32),60.0%(15/25),69.7%(23/33)和62.5%(15/24)。PET-CT显像诊断纵隔淋巴结的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为92.8%(39/42),87.5%(42/48),86.7%(39/45)和93.3%(42/45)。PET-CT诊断淋巴结的Kappa值为0.714,优于CT的0.396(P<0.05)。结论PET-CT能提高检查非小细胞肺癌纵隔淋巴结的敏感性,明显优于CT,有利于术前分期。

支持人AML-CFU克隆生长的SFC体系的实验研究

本文报道了一适宜人类急性髓系白血病祖细胞(AML-CFU)良好克隆性生长的无血清培养(SFC)体系。采用正交设计,得出主要血清替代物牛血清白蛋白(BSA)、饱和人转铁蛋白(STf)、胆固醇(Chol)、牛胰岛素(Ins)和牛氯化血红素(Hem)浓度依次为0.6％、2×10^(-6)M、2.8μg/ml、15μg/ml和0.06mM。重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白介素3(rhIL-3)在SFC体系中的种植率分别为0.776±0.621％和0.574±0.510％((?)±s％),与有血清培养(SCC)体系中的种植率无显著性差异(n=14,P>0.05)。

重组人干细胞因子治疗骨髓增生异常综合征的临床可能性

为明确骨髓增生异常综合征(MDS)患者造血祖细胞对重组人干细胞因于(rhSCF)的反应性,使用无血清培养体系体外培养,比较MDS与正常人红、粒系克隆性生长能力.结果表明,两例难治性贫血(RA)在rhSCF+重组人白介素3(rhlL-3)+重组人促红素(rhEPO)三因于联合刺激作用下,早期红系祖细胞(BFU-E)克隆生长接近正常水平.促粒系造血方面,rhSCF+rhIL-3或重组人粒/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)联合作用下,粒/巨噬祖细胞(CFU-GM)克隆生长虽未达正常水平,却较单一rhIL-3或rhGM-CSF高7～29倍或5.6～12倍.结论:至少部分MDS患者的红系祖细胞数量并未减少.rhSCF与其它造血生长因子联合治疗MDS有重要临床意义.

液体培养与甲基纤维素半固体培养孰能反映干/祖细胞的自我更新能力?

自我更新能力是干／祖细胞产生具有增殖潜能的子代，维持正常或恶性造血克隆的必备能力．临床上，自我更新能力则是筛选AML治疗药物的一个重要方面．因观察表明，2次接种率（PE2，可反映自我更新能力<下讨论>)大者，对治疗反应差；反之，则较佳．研究造血生长因子在造血调控中的作用，探讨其对造血干，祖细胞自我更新能力的影响非常重要。这不但有助于认识AML的发病机理，且能指导造血生长因子的临床正确使用．因此，研究自我更新的技术是解决上述问题的关键。

白细胞过滤器预防非溶血性输血反应的临床观察

目的:探讨临床应用白细胞过滤器预防非溶血性输血反应的效果及其护理要点。方法:2004年1月～2006年12月我院输血患者200例分为观察组和对照组各100例,对照组采用普通输血器输血,观察组则采用一次性去白细胞过滤器。比较两组非溶血性输血反应的发生率。结果:观察组非溶血性输血反应发生率为2.0%,明显低于对照组的16.0%,P<0.05。结论:使用白细胞过滤器输血可有效降低非溶血性输血反应发生率,且操作简单,护理人员易于掌握,值得提倡。

骨髓涂片和骨髓活检在骨髓增生异常综合征诊断中的意义

对33例初诊骨髓增生异常综合征病人的骨髓涂片及骨髓活检进行分析,表明涂片在初诊筛选中能对MDS作出诊断,而骨髓活检对判断增生度,显示各系病态造血,提供预后信息及确诊MDS合并骨髓纤维化中意义重大,后者对前者起补充、修正的作用.

hSALL4基因逆转录病毒载体的构建及在小鼠髓系祖细胞中的表达

目的:构建含人SALL4B基因的逆转录病毒载体并证明其在小鼠髓系祖细胞中的表达。方法:①用PCR方法从质粒pcDNA3-hSALL4B扩增包括有全部编码序列的人SALl4BcDNA,将其定向克隆至逆转录病毒载体pLXSN,构建成含hSALL4的重组逆转录病毒载体;②将重组质粒在包装细胞系PT67中进行包装,用病毒上清感染32D细胞;③RT-PCR分析其mRNA表达;④Western blotting分析其蛋白质的表达。结果:①限制型内切酶酶切,PCR及DNA测序均证实hSALL4B成功地克隆入pLXSN;②转染的32D细胞在mRNA水平及蛋白水平均有SALL4B表达。结论:成功地构建了含人SALL4B的逆转录病毒表达载体;且表达于32D细胞中,为研究SALL4基因过表达对造血功能的作用及其机制奠定了基础。

促血小板生成素研究进展

从要世纪60年代至今，人们一直致力于调节巨核细胞系造血的体液因子的研究，尽管IL-1，IL-3、IL-6、IL-11、LIF、EPO．GM-CSF及SCF等细胞因子对巨核细胞的发育有一定影响，但它们主要的生物活性并非调节巨核细胞系造血．以莅认为与巨核细胞系造血有关的因子有巨桉细胞增强因子、巨核细胞刺激因子．

间充质干细胞在HLA半相合移植中的应用

造血干细胞移植是治愈恶性血液系统疾病的唯一方法,但寻找HLA完全相合的供者越来越难,HLA半相合移植显示出它独特的优势。骨髓间充质干细胞是骨髓微环境中具有自我更新和多向分化的非造血干细胞,在造血干细胞移植中发挥重要的作用,它能够促进造血重建,与造血干细胞共输注能增强造血干细胞的植入。

脐血红系祖细胞扩增的研究

脐血通过体外培养定向扩增为红系祖细胞及前体细胞作为新生红细胞血源有可行的实验室基础 .红细胞生成涉及复杂过程 ,包括转录因子、生长因子、信号分子、红细胞相关蛋白 .选择单个核细胞或CD3 4 + 为起始细胞对红系的区别不大 ,红系祖细胞CD71+ CD3 6+ CD3 4 + CD117+ CD48-CD12 3 -.对CD3 4 + 造血干 /祖细胞起作用有早期作用因子FL、TPO、SCF、IL - 3、IL - 6、SCF、IL - 11,晚期作用因子如EPO、IGF - 1、INS、TGFβ、ActivinA .低氧促进造血祖细胞向红系定向 ,基质细胞对红系的扩增作用的影响不大 .造血细胞向红系定向包括TAL1、LMO2、GATA - 2转录因子参与 ;定向红系祖细胞分化包括NF

应用SCL-90评价心理干预对恶性肿瘤患者的效果

目的探讨心理干预对恶性肿瘤患者生存质量的影响。方法通过对本科室2008～2009年100例恶性肿瘤患者采用心理支持法,心理疏导法,协助行为矫正,积极心理暗示,及引导有效应对实施心理干预。结果采用症状自评量表(SCL-90)[1]评估应用心理干预前及心理干预后的心理健康状况。结论肿瘤患者心理健康水平差,对肿瘤病人实施心理干预能减轻不良心理反应,提高治疗效果。

去甲基化治疗白血病的研究进展

自1983年Feinberg等发现在肿瘤细胞中存在着基因总体低甲基化和局部高甲基化的现象后，国内外围绕DNA甲基化问题进行了大量的研究，并取得了很大的进展。越来越多的证据表明，DNA甲基化异常状态尤其是抑癌基因的高甲基化表达在白血病的发生发展、诊断治疗及预后评估等方面发挥了重要的作用。现作者就近年来DNA异常甲基化与白血病的关系及去甲基化药物地西他滨在治疗白血病中的应用作一综述。

重组人干细胞因子对人类急性髓系白血病干／祖细胞自我更新作用的实验研究

应用无血清液体一半固体二次培养法，观察了重组人干细胞因子（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｓｔｅｍｃｅｌｌｆａｃｔｏｒ，ｒｈＳＣＦ）对人类急性髓系白血病干／祖细胞（ＡＭＬ－ＣＦＵ）自我更新的影响。认为ｒｈＳＣＦ是一作用阶段早于白介素３（ＩＬ－３）和粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的造血生长因子（ＨＧＦ）。无论单一，还是与其它ＨＧＦ联合，ｒｈＳＣＦ对绝大部分ＡＭＬ患者，均有强大的维持其ＡＭＬ－ＣＦＵ自我更新的作用。但不同ＦＡＢ亚型及ＦＡＢ亚型相同的患者之间，这种维持作用差异较为显著。提示ＳＣＦ在ＡＭＬ病理过程中起重要作用。

无血清培养体系对人类急性髓系白血病祖细胞克隆性生长的意义

无血清培养体系对人类急性髓系白血病祖细胞克隆性生长的意义唐继森，李崇渔，王辨明，刘秀芳，喻东姣，陈智超我们用支持急性髓系白血病祖细胞（ＣＦＵ－ＡＭＬ）生长的无血清培养（ＳＦＣ）体系，观察重组人红细胞生成素（ｒｈＥｐｏ）、重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子...

重组人干细胞因子促进正常人早期造血功能

重组人干细胞因子促进正常人早期造血功能唐继森，王辨明，李崇渔，马军干细胞因子是９０年代新发现的造血生长因子。我们报道基因重组产品重组人干细胞因子（ｒｈＳＣＦ）对正常人早期造血功能的作用。材料和方法（１）研究对象和骨髓去粘附细胞、去Ｔ淋巴细胞的单个核细...

MCF-7荷瘤裸鼠不同树突状细胞亚群凋亡的研究

目的:通过建立MCF-7荷瘤裸鼠模型,研究树突状细胞(DCs)不同亚群的凋亡,为设计新的免疫治疗方法和新的疫苗提供详尽信息。方法:建立MCF-7裸鼠模型,随机分为荷瘤组和对照组,肿块达5 mm后处死裸鼠,取骨髓单个核细胞进行DCs诱导、分化,流式细胞仪上检测表面分子标志CD86、CD83、MHC-Ⅱ及CD34,AnnexinⅤ检测CD11c及CD123了解DCs亚群的凋亡率。结果:骨髓起源单个核细胞培养至第9天出现典型DCs形态特征,荷瘤组和对照组细胞均高表达CD86、CD83及MHC-Ⅱ,而CD34表达两组均较低。荷瘤组CD11c+CD123-细胞为(52.01±1.43)%,对照组为(56.36±1.76)%;CD123+CD11c-细胞荷瘤组为(32.19±1.71)%,对照组为(28.95±1.39)%。荷瘤组mDC凋亡率为(23.64±2.43)%,较对照组(20.05±2.49)%高,P<0.05。荷瘤组小鼠pDC凋亡率为(11.53±2.92)%,较对照组(14.96±2.96)%低,P<0.05。结论:MCF-7乳腺癌小鼠体内DCs存在mDC和pDC两种亚型,mDC凋亡率增加,使诱导Th1免疫反应能力减低;而pDC凋亡率减少,诱导体内免疫耐受的发生,机体抗肿瘤免疫反应能力因而下降。

Ⅰ期非小细胞肺癌的预后因素

Ⅰ期非小细胞肺癌（NSCLC）临床预后因素包括肿瘤大小和患者年龄、手术方式和胸膜浸润情况等。分子生物学预后因素包括肿瘤细胞信号通路中的表皮生长因子及其受体、细胞周期素和凋亡基因Bcl-2、p53的异常表达等，以及肿瘤血管生成中基质金属蛋白酶（MMP）、血管内皮生长因子（VEGF）的异常表达等。因此，需要将Ⅰ期NSCLC临床和分子生物学预后因素两方面综合考虑，才能准确判断预后。