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法桐花粉主要过敏原基因Pla a1重组表达及鉴定
被引量:
2
1
作者
王贵佐
陶爱林
+4 位作者
孙秀珍
李满祥
刘昀
邹泽红
吴媛媛
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期535-539,共5页
目的:表达、纯化和鉴定法国梧桐花粉主要变应原基因Platanus acerifolia pollen allergen1(Pla a1)。方法:首先根据文献查找并在GenBank获取法国梧桐花粉主要变应原基因序列Pla a1,利用DNAStar软件进行密码子优化;合成全基因;将Pla a1...
目的:表达、纯化和鉴定法国梧桐花粉主要变应原基因Platanus acerifolia pollen allergen1(Pla a1)。方法:首先根据文献查找并在GenBank获取法国梧桐花粉主要变应原基因序列Pla a1,利用DNAStar软件进行密码子优化;合成全基因;将Pla a1与载体pET-44a连接后转入大肠杆菌Rosetta中进行诱导并优化目的蛋白表达;利用亲和层析法纯化该外源表达蛋白;应用Western blot,利用法桐花粉过敏患者血清鉴定纯化后的目的蛋白的抗原性。结果:成功构建了pET44a-Pla a1阳性质粒;获得了法桐花粉主要变应原重组蛋白Pla a1;对该重组蛋白进行了亲和层析纯化;免疫印记法表明重组蛋白具有一定的抗原性。结论:首次利用密码子优化的方法获得融合Strep TagⅡ的法桐花粉过敏原重组蛋白Pla a1,为制备高纯度变应原、重组低致敏过敏原及变应原核酸疫苗奠定基础。
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关键词
法国梧桐花粉
主要过敏原
密码子优化
表达
纯化
鉴定
下载PDF
职称材料
题名
法桐花粉主要过敏原基因Pla a1重组表达及鉴定
被引量:
2
1
作者
王贵佐
陶爱林
孙秀珍
李满祥
刘昀
邹泽红
吴媛媛
机构
西安交通大学
医学院
第二
附属
医院
呼吸
病
研究室
广州医学院第二附属医院呼吸疾病国家重点实验室变态反应研究室过敏反应与临床免疫重点研究室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期535-539,共5页
基金
卫生部重点课题支气管哮喘重组变应原的特异性诊断和免疫治疗(No.2007353)
国家科技重大专项重大课题(2008ZX08011-005)及重点课题(2009ZX08011-004B)
+1 种基金
国家自然科学基金项目(30771240)
广州市教育系统科研创新学术团队(B94118)资助
文摘
目的:表达、纯化和鉴定法国梧桐花粉主要变应原基因Platanus acerifolia pollen allergen1(Pla a1)。方法:首先根据文献查找并在GenBank获取法国梧桐花粉主要变应原基因序列Pla a1,利用DNAStar软件进行密码子优化;合成全基因;将Pla a1与载体pET-44a连接后转入大肠杆菌Rosetta中进行诱导并优化目的蛋白表达;利用亲和层析法纯化该外源表达蛋白;应用Western blot,利用法桐花粉过敏患者血清鉴定纯化后的目的蛋白的抗原性。结果:成功构建了pET44a-Pla a1阳性质粒;获得了法桐花粉主要变应原重组蛋白Pla a1;对该重组蛋白进行了亲和层析纯化;免疫印记法表明重组蛋白具有一定的抗原性。结论:首次利用密码子优化的方法获得融合Strep TagⅡ的法桐花粉过敏原重组蛋白Pla a1,为制备高纯度变应原、重组低致敏过敏原及变应原核酸疫苗奠定基础。
关键词
法国梧桐花粉
主要过敏原
密码子优化
表达
纯化
鉴定
Keywords
Platanus Acerifolia Pollen
Major allergen
Codon optimization
Expression
Purification
Identification
分类号
R392.8 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
法桐花粉主要过敏原基因Pla a1重组表达及鉴定
王贵佐
陶爱林
孙秀珍
李满祥
刘昀
邹泽红
吴媛媛
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
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