人NESG1基因慢病毒载体的构建及其在293FT细胞中的表达

目的克隆人NESG1基因,构建与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合表达的慢病毒载体pGC-FU-NESG1-EGFP,包装慢病毒,感染293FT细胞并进行鉴定。方法以NESG1全长克隆为模板扩增其编码框序列,通过限制性内切酶AgeI酶切、T4 DNA连接酶连接,将NESG1插入慢病毒载体pGC-FU-EGFP,构建pGC-FU-NESG1-EGFP重组载体。质粒转化感受态细菌,筛选阳性克隆,经PCR及测序鉴定正确后通过脂质体将慢病毒三质粒系统共转染人胚肾细胞系293FT,进行慢病毒包装并测定病毒滴度。病毒感染293FT细胞,荧光显微镜下观察感染效率,Western blot方法检测NESG1-EGFP融合蛋白的表达情况。结果成功构建慢病毒表达载体pGC-FU-NESG1-EGFP,三质粒共转染293FT细胞后可见大量绿色荧光;浓缩病毒后测定其滴度为2×107 TU/ml;以复感染系数MOI为1感染293FT细胞,感染效率在90%以上。Western blot证实细胞表达NESG1。结论成功构建NESG1慢病毒表达载体,包装得到高滴度慢病毒,为后续感染鼻咽癌细胞,探索其在鼻咽癌发生和发展中的作用奠定了基础。

拉贝洛尔与硝酸甘油治疗重度子痫前期的疗效对比研究

目的评价拉贝洛尔与硝酸甘油治疗重度子痫前期的疗效和安全性。方法回顾性分析本院收治150例重度子痫前期患者的临床资料，按治疗方法不同分为2组，拉贝洛尔组（101例）：采用拉贝洛尔100mg＋5％葡萄糖注射液250ml静脉滴注，依据降血压情况调控滴速。硝酸甘油组（49例）：用硝酸甘油40mg＋生理盐水32ml静脉泵人。比较两组患者降压情况及母婴结局。结果治疗前两组收缩压、舒张压比较差异无统计学意义（P〉0．05）；两组治疗后1、24h收缩压、舒张压较治疗前均有不同程度下降，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。两组治疗后收缩压、舒张压下降幅度相当（P〉0．05），其分娩方式、新生儿结局比较差异无统计学意义（P〉0．05），不良反应少。结论拉贝洛尔、硝酸甘油治疗重度子痫前期的降压疗效均满意，可减少产科并发症，安全性好，值得临床推广。