先天性膈疝肺动脉高压的实验研究

目的研究先天性膈疝（Congenital diaphragmatic hernia，CDH）肺发育不良中肺动脉高压（Dulmonary hypertension，PH）的量化指标，探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在CDH胎肺中的表达及在CDH肺动脉高压发生中的可能作用，探讨地塞米松（Dexamethasone，Dex）对VEGF和CDH肺发育的影响。方法采用Nitrofen诱导CDH模型胎鼠并分组：Dex组予以产前Dex治疗，CDH组未给予Dex，另取正常胎鼠为对照组。采用组织学测量、肺蛋白含量检测等方法，测定出平均肺泡面积、平均肺泡间隔厚度、每高倍视野肺血管数、动脉中膜厚度占外径比（MT％）、管壁面积占血管总面积比（WA％）、管腔面积占血管总面积比（LA％）、左肺与体重比、左肺蛋白含量与体重比等；实时荧光定量PCR（QPCR）和免疫蛋白印迹（Western blotting）方法检测各组胎肺中VEGF的表达及相对含量。结果与对照组相比，CDH组胎肺显著发育不良，包括肺微小动脉结构明显异常，表现为每高倍视野肺血管数减少、MT％增大、WA％增大，LA％减小（均P〈0．05）；另外VEGFmRNA及蛋白水平均明显升高（P〈0．05）。与CDH组相比，Dex组胎肺发育明显改善，表现为每高倍视野肺血管数增加、动脉中膜厚度占外径比减小、管腔面积占血管总面积比增大（均P〈0．05）；但VEGF mRNA及蛋白水平未发现明显变化（P〉0．05）。结论VEGF在CDH胎肺中的表达增高可能是CDH肺发育不良形成机制之一；产前地塞米松治疗可明显改善肺微小动脉结构异常及肺发育不良，但未发现对VEGF的表达有影响，提示Dex可能并非通过调节VEGF的表达而发挥改善肺动脉高压及肺发育不良的作用。

影响小儿急性骨髓炎治疗转归的因素

目的:探讨影响小儿急性骨髓炎治疗转归的因素。方法:回顾性分析本院1995年至2005年共11年间收治的小儿急性骨髓炎47例,按治疗转归分为4组:优组(A组,n=20),良组(n=9),差组(B组,n=15)和死亡组(n=3),比较A,B两组的临床特征,采用非参数直线相关分析方法筛选与慢性骨髓炎转归关系密切的因素。结果:B组中位年龄较低[90 d(26 d^7岁)比2岁(30 d^13岁)]、扁平骨受累的比例较高(26.7%比0%)、贫血的比例较高(40.0%比0%)、从发病到获确诊的时间较长[(5.5±2.3)d比(2.7±1.7)d],与A组比较均有统计学差异(P<0.05)。两组间性别、诱因、典型临床表现、血培养、X线征象出现时间、抗生素使用时间以及是否手术等方面均无统计学差异(P>0.05)。相关分析结果显示,慢性骨髓炎转归与发热的持续时间、局部肿胀以及活动受限的持续时间呈正相关关系(r=0.506,P<0.05)。结论:影响小儿急性骨髓炎转归的主要因素是全身及局部症状的持续时间,早期确诊及有效治疗对减少本病慢性骨髓炎转归有积极作用。

腹腔镜辅助下先天性巨结肠升结肠拖出根治术

目的 运用腹腔镜及超声刀技术对不能用经肛门拖出术式的小儿长段型巨结肠病例施行根治手术 ,充分发挥腹腔镜的微创手术优点 ,探讨其操作方法和特点。方法 对 2 0 0 0年 6月至2 0 0 1年 11月收治的 8例长段型先天性巨结肠患儿 ,使用腹腔镜及超声刀技术施行升结肠逆时针翻转拖出 (Deloyers法 )的先天性巨结肠根治术 (改良Soave术 )。观察手术过程、术中出血、术后合并症的出现、大便排出等情况。术后门诊随访。结果 8例手术均获成功 ,手术时间 190～ 2 40min ,平均2 18min。手术出血最多 1例为 2 0ml,余均少于 5ml,无术后继发性出血 ,无术中和术后早期并发症。8例术后均在门诊复诊 ,随访 3～ 2 0个月 ,所有患儿每日排便 1～ 8次 ,无大便失禁或污粪。 5例术后3个月大便稀糊状 ,半年后转成形大便。结论 应用腹腔镜超声刀技术可有效地施行升结肠拖出手术治疗长段型巨结肠 ,手术可弥补经肛门拖出手术和开腹手术的不足 。

胰岛素样生长因子-Ⅰ在Nitrofen诱导的先天性膈疝大鼠模型胎肺中的表达

目的研究IGF-Ⅰ在先天性膈疝胎肺上的表达及探讨其在CDH肺发育不良中的作用。方法采用免疫组化和图像分析方法检测IGF-Ⅰ在胎肺中的表达及相对含量。结果IGF-Ⅰ在对照组表达微弱或缺如,在实验组明显表达于细支气管上皮细胞的胞浆及部分神经丛,其相对含量显著高于对照组。IGF-Ⅰ与平均肺泡面积具有显著的负相关。结论CDH肺发育不良可能是原发性;IGF-Ⅰ的表达增高,具有组织特异性;IGF-Ⅰ与肺泡面积呈负的直线相关性。

成纤维细胞生长因子-7在除草醚诱导的先天性膈疝大鼠模型胎肺中的表达

目的研究成纤维细胞生长因子-7(FGF-7)在先天性膈疝(CDH)胎肺中的表达及探讨其在CDH肺发育不良中的作用。方法采用免疫组织化学和图像分析方法半定量地检测FGF-7在胎肺中的表达部位及表达相对含量。结果CDH肺发育不良,处于假腺体期。FGF-7在对照组显示强表达于支气管和细支气管上皮细胞,在除草醚(nitrofen)组中表达微弱,其表达的相对含量显著低于对照组,Nitrofen组中CDH组和noCDH组间差异没有显著性意义。FGF-7的表达与肺泡面积呈显著正相关性,与肺泡间隔呈显著负相关性。结论FGF-7在CDH胎肺中表达降低,且降低具有组织特异性；FGF-7可作为提示CDH胎肺成熟度的重要指标；FGF-7表达降低可能是CDH肺发育不良形成机制之一。

Hoxa5基因在先天性膈疝大鼠模型胎肺中的表达

目的研究Hoxa5基因在先天性膈疝（congenital diaphragmatic hernia，CDH）胎肺中的表达特点以及探讨其在CDH肺发育不良发生机制中的可能作用。方法采用实时荧光定量PCR（real time quantitative PCR，QPCR）方法检测Hoxa5基因在妊娠第17．5天、19．5天、21．5天的nitrofen诱导CDH大鼠模型胎肺及正常对照大鼠胎肺中的相对表达量。结果正常对照组胎肺中Hoxa5 mRNA的表达水平随着胎龄的增加呈下降趋势，其中第21．5天胎肺中Hoxa5 mRNA的表达水平显著下降，与其他二胎龄点相比差异有统计学意义（P〈0．05）；CDH组中Hoxa5 mRNA的表达趋势与正常胎肺相似，即随胎龄的增加其表达量下降，其当中第21．5天胎肺中Hoxa5 mRNA的表达水平明显降低，与其他二胎龄点相比差异有统计学意义（P〈0．05）。第17．5天与19．5天胎龄CDH组胎肺中Hoxa5 mRNA的表达水平分别与相应对照组相比，差异无统计学意义；而妊娠晚期（第21．5天胎龄）CDH组胎肺中Hoxa5 mRNA的表达水平高于对照组，差异具有统计学意义。结论正常对照组中第21．5天胎龄时Hoxa5 mRNA的表达水平显著降低，提示Hoxa5 mRNA在孕晚期的低表达是正常肺发育的分子基础之一；而CDH组中第21．55K胎龄时Hoxa5 mRNA的表达水平明显高于对照组，提示Hoxa5在孕晚期CDH胎肺中Hoxa5的高表达可能是CDH肺发育不良形成机制之一。

胆道闭锁患儿5种嗜肝DNA病毒感染状况检测报告

目的 检测几种常见嗜肝DNA病毒在胆道闭锁患儿肝脏组织中的感染率,探讨其与胆道闭锁发生的关系.方法 用荧光定量PCR（FQ-PCR）检测随机选取的85例胆道闭锁和10例对照组患儿肝脏组织中的5种嗜肝DNA病毒,包括人巨细胞病毒（HCMV）、腺病毒（ADV）、EB病毒（EBV）、单纯疱疹病毒（HSV）和乙肝病毒（HBV）,同时进行石蜡切片的病理染色和巨细胞病毒晚期蛋白PP65免疫组化方法检测.结果 在85例胆道闭锁患儿肝脏组织中,嗜肝DNA病毒阳性56例（65.9%）,其中HCMV阳性51例（60.0%）,ADV阳性5例（5.9%）,EBV阳性3例（3.5%）,HSV和HBV阳性0例（0%）,对照组10例中均未检测到以上病毒的存在.免疫组织化学结果显示：HCMV多集中于肝脏组织中的肝细胞、血管内皮细胞、炎症浸润细胞当中,胆管上皮细胞呈强阳性反应.结论 胆道闭锁与嗜肝DNA病毒感染之间存在相关性,其中以人巨细胞病毒感染关系最为密切.