增强的等长运动超声心动图负荷试验检测冠心病的应用研究

目的:设计一种在上肢握力负荷的同时再增加下肢等长运动负荷方法即增强的等长运动负荷,并结合超声心动图对冠心病(CAD)进行初步研究,探讨其检测冠心病的价值。方法:采用自行研制的等长运动心脏负荷试验机对一组临床上疑似CAD的胸痛病例(45例)进行增强的等长运动超声心动图负荷试验及冠脉造影检查,并根据冠脉造影结果将上述45例患者分为CAD组和正常组。结果:(1)负荷后的血流动力学变化明显,心率、动脉收缩压、心率-收缩压乘积显著性增加;(2)诊断敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为79.3%、81.3%、88.5%、57.9%;(3)CAD组在负荷后左室舒张、收缩功能指标二尖瓣口血流E峰/A峰、LVEF明显低于负荷前以及正常组的负荷前、后(P<0.05)。结论:增强的等长运动超声心动图负荷试验方法对于CAD诊断的准确率较高,并可有效评价CAD患者舒张、收缩功能的变化,有推广应用价值。

超顺磁性氧化铁标记脂肪干细胞移植入大鼠心脏后的活体磁共振示踪成像

目的探讨超顺磁性氧化铁(SPIO)标记脂肪干细胞(ADSCs)移植入大鼠心脏后的活体磁共振成像(MRI)示踪的可行性。方法使用左旋多聚赖氨酸-SPIO共培养方式标记ADSCs。采用普鲁士蓝染色及透射电镜观察细胞内铁颗粒,台盼兰染色检测细胞活力,并对标记的干细胞进行体外MRI成像。将经过SPIO标记的干细胞移植入正常大鼠心脏,使用MRI进行活体成像观察并与病理结果进行对照分析。结果普鲁士蓝染色于ADSCs胞浆内可见蓝色颗粒,电镜检查见铁颗粒位于内涵体/溶酶体内;台盼兰染色检测细胞活力实验组与对照组差异无显著性(P>0.05);标记了SPIO的干细胞体外MRI成像时,实验组信号显著低于阴性对照组和空白对照组;标记后的干细胞移植到心脏后,MRI显示细胞移植区域信号缺失,对应区域病理切片普鲁士蓝染色可见胞浆内染色阳性的细胞。结论MRI可以对移植入心脏的经SPIO标记的干细胞进行无创、动态的活体示踪成像,有助于了解移植细胞在体内的存活及迁徙情况。

微泡造影剂联合超声介导KDR启动子-胸苷激酶基因靶向血管治疗小鼠肝癌

目的 评估微泡造影剂SonoVue联合超声辐照介导KDR启动子-单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（HSV—TK）系统（KDR—TK）结合更昔洛韦（GCV）靶向血管治疗小鼠肝癌的有效性。方法 建立小鼠（C57BL／6J）肝癌皮下移植瘤模型40只，随机分为4组，分别经尾静脉团注磷酸缓冲盐溶液（PBS）、KDR—TK、KDR—TK、KDR—TK＋SonoVue，后两组分别给予1MHz、2W／cm^2、5min的超声辐照，24h后治疗组分别腹腔注射GCV0．1ml（100mg·kg^-1·d^-1），连续10d，检测肿瘤大小，计算抑瘤率，28d后处死小鼠行肿瘤微血管密度及组织病理学检查。结果 抑瘤率在PBS组（A组）、KDR—TK／GCV组（B组）、KDR—TK＋超声／GCV组（C组）、KDR—TK＋超声＋SonoVue／GCV组（D组）分别为0%、3．6％±2．7％、21．4％±2．9V0和40．7％±4．5％（D组与B组，P〈0．01；D组与C组，P〈0．05；C组与B组，P〈0．05）；肿瘤微血管密度分别为48．8±5．1、44．2±6．4、27．4±3．2和12．3±1．4（B组与A组，P〉0．05；C组与A组，P〈0．05；D组与A组，P〈0．01；D组与C组，P〈0．05）；HE染色C组、D组坏死病变明显。结论 微泡造影剂增强超声辐照介导的KDR—TK基因靶向破坏小鼠肝癌微血管的效应，为肝癌的基因治疗提供一种可行、有效的方法。

微泡造影剂联合超声辐照短暂性增加血管内皮细胞膜通透性

目的探讨微泡造影剂联合超声辐照对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）膜通透性改变及作用持续时间。方法用连续多普勒超声辐照HUVEC，照射条件为频率1．9MHz，软组织热指数（TJS）0．8，增益80％，输出声强ISATA为80．0mW／cm^2，照射时间60s。悬浮HUVEC，加入2％微泡造影剂SonoVue，于照射后0、1、5、30min、2h时点分别加入大分子荧光素物质FD500，荧光显微镜下观察FD500进入细胞内的情况，用流式细胞仪测FD500荧光染色阳性的细胞。锥虫蓝染色观察各组样本细胞活性。结果0.1min组荧光显微镜下大部分HUVEC荧光染色阳性，贴壁后观察可见细胞质内呈现不均质的绿色荧光显影，而细胞核不显影；5、30min、2h组仅见少数HUVEC胞质内绿色荧光显影。0、1、5、30min、2h组流式细胞仪测荧光染色阳性率分别为（61．63±18．35）％、（57．26±13．53）％、（14．66±6．07）％、（4．12±0．96）％、（5．93±1．45）％，前两组与后者比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论微泡造影剂联合诊断级别超声辐照具有增加HUVEC膜通透性的作用，其作用持续时间较为短暂，可能的机制为超声空化导致细胞膜“声穿孔”效虚。