成体心肌干细胞的研究进展

近来的研究表明无论在正常还是病理情况下心室肌细胞中均存在处于分裂周期的细胞,即成体心脏内存在具有特异性心肌分化潜能的多能干细胞———成体心肌干细胞。本文综述了成体心肌干细胞的发现、特征、功能和目前研究中仍存在的问题与展望。

冠状动脉粥样硬化性心脏病合并糖尿病患者冠状动脉病变与C反应蛋白的相关性研究

目的探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)合并糖尿病患者冠状动脉病变程度与高敏C反应蛋白(hsCRP)的关系。方法接受冠状动脉造影检查的患者161例进入此研究,冠心病但血糖正常组52例,冠心病伴有糖耐量异常组24例,冠心病合并2型糖尿病组85例。记录各组临床资料、冠状动脉造影评分,并检测各组患者血浆hsCRP水平。结果冠心病合并2型糖尿病组冠状动脉造影评分明显高于血糖正常组,差异有统计学意义(P<0.01);冠心病合并2型糖尿病组患者hsCRP水平明显高于血糖正常组(P<0.01)。冠状动脉造影评分与hsCRP水平之间呈正相关(r=0.309)。结论冠心病合并糖尿病患者的冠状动脉病变严重程度与血浆hsCRP水平正相关。

急性心肌梗死溶栓治疗过时了吗?

资料显示．心血管疾病是目前人类第一杀手．我国不到10秒就有1人患有心血管疾病。每13秒就有1人死于心血管疾病。世界卫生组织2000年的报告显示．2000年高收入国家和中低收入国家的心血管死亡患者人数分别高达500万例和1000万例，而预计到2020年．该数字将分别增至600万例和1900万例。无疑，包括我国在内的中低收入国家．已成为未来几年心血管疾病的重灾区。

雷公藤内酯醇洗脱支架抑制支架内再狭窄及对PCNA、P27^(kip1)表达的影响

目的研究雷公藤内酯醇洗脱支架对冠脉支架植入术后再狭窄的有效性及安全性,及其对冠脉增殖细胞核抗原(PCNA)、P27kip1表达的影响。方法采用20只国内杂种幼猪,随机分成裸支架组和雷公藤内酯醇洗脱支架组,每组各植入支架10枚。比较支架植入后4周各组的冠脉造影、组织病理学、免疫组化及血生化结果。结果雷公藤内酯醇洗脱支架组支架内最小内径相似,大于裸支架组(P<0.05);雷公藤内酯醇洗脱支架组新生内膜面积小于裸支架(P<0.05)。雷公藤内酯醇洗脱支架组PCNA阳性细胞少于裸支架组(P<0.05),而P27kip1表达多于裸支架组(P<0.05)。未发现明显的毒副作用。结论雷公藤内酯醇能抑制新生内膜的形成,在支架植入后4周能预防再狭窄的形成,可能通过影响PCNA和P27kip1蛋白的表达抑制血管平滑肌细胞增殖发挥作用。

神经肽Y诱导血管平滑肌细胞凋亡相关基因表达与细胞内液pH变化的关系

为探讨细胞内液pH在神经肽Y诱导血管平滑肌细胞凋亡过程中的变化 ,以体外培养血管平滑肌细胞模型为研究对象 ,运用激光共聚焦显微镜和免疫荧光组织化学技术 ,定量和动态观察研究神经肽Y诱导血管平滑肌细胞凋亡相关基因bcl 2和bax表达与细胞内液pH变化之间的关系。结果发现 ,在神经肽Y作用下 ,体外培养的血管平滑肌细胞凋亡相关基因bcl 2和bax表达的平均荧光值分别为 134 9.6 7± 10 8.2 8和 1397.5 0± 10 4.43,与对照组的 986 .6 4± 91.2 2和 10 6 0 .44± 10 7.5 4相比 ,差异明显 (P <0 .0 1) ,bax与bcl 2两者平均荧光值之比为 1.0 4;神经肽Y还可降低血管平滑肌细胞内液pH的平均荧光值 ,使细胞浆酸化。此结果提示 ,神经肽Y诱导血管平滑肌细胞凋亡相关基因的表达与神经肽Y降低细胞内液酸碱度、细胞浆酸化有关。

神经肽Y对血管平滑肌增殖细胞核抗原、血小板源性生长因子和c-myc基因表达的影响

以体外培养的血管平滑肌细胞模型为研究对象，在运用免疫荧光细胞组织化学技术和激光共聚焦显微镜定量研究神经肽Ｙ的作用下，观察血管平滑肌细胞中增殖细胞核抗原、血小板源性生长因子和ｃ－ ｍｙｃ 原癌基因表达的平均荧光值变化，以阐明神经肽Ｙ 参与高血压和动脉粥样硬化等心血管疾病发生的病理机制。结果发现，对照组中增殖细胞核抗原、血小板源性生长因子和ｃ－ ｍｙｃ 原癌基因表达的平均荧光值分别为１５４２．７１ ±２００．０４ 、８１５．２８±１１６．４８ 和１６２０．２６±１７４．５８，神经肽Ｙ则可促进增殖细胞核抗原、血小板源性生长因子和ｃ－ ｍｙｃ 原癌基因在血管平滑肌细胞中的表达，其平均荧光值分别为１６４８．５６±２３２．７１、１２２５ ．４６±１０１ ．８４ 和１７４０ ．３５ ±２０５ ．９１，其中以血小板源性生长因子的表达差异最为明显（ Ｐ＜ ０．０１）。结果提示，神经肽Ｙ可促进血管平滑肌细胞的增殖，并诱导血小板源性生长因子和ｃ－ ｍｙｃ 原癌基因表达增强。

神经肽Y对血管平滑肌细胞凋亡相关基因表达的诱导作用

为探讨神经肽 Ｙ 对血管壁平滑肌细胞凋亡相关基因表达的诱导作用，以体外培养血管平滑肌细胞模型为研究对象，运用免疫荧光组织化学技术和激光共聚焦显微镜定量研究神经肽 Ｙ 对血管平滑肌细胞凋亡相关基因ｂｃｌ－ ２ 、ｂａｘ 和ｆａｓ 表达的影响，以阐明神经肽 Ｙ 参与高血压和动脉粥样硬化等心血管疾病发生的分子机制。结果发现，神经肽 Ｙ 浓度为１０ － ６ ｍｏｌ／ Ｌ 时，血管平滑肌细胞凋亡相关基因ｂｃｌ－ ２ 和ｂａｘ 表达的平均荧光值分别为１８３４ ．２５ ±１３８ ．５５ 和１８７０ ．８２ ±１６２ ．４３ ，明显高于对照组的１６８２ ．８７ ±９４ ．４７ 和１６８８ ．０４ ±１１０ ．９１（ Ｐ＜ ０ ．０１） ；当神经肽 Ｙ 浓度为１０ － ７ ｍｏｌ／ Ｌ 时，ｂｃｌ－ ２ 和ｂａｘ 的表达降低（ Ｐ＜ ０ ．０５） ；而神经肽 Ｙ 浓度为１０ － ８ ｍｏｌ／ Ｌ 时，ｂｃｌ－ ２ 和ｂａｘ 的表达已接近对照组的表达水平（ Ｐ＞ ０ ．０５） 。但ｆａｓ 仅在神经肽 Ｙ 浓度为１０ － ６ ｍｏｌ／ Ｌ时，其平均荧光值为１９８７ ．６８ ±１８５ ．３９ ，与对照组的１８８２ ．３８ ±１６０ ．８４ 相比明显增高（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。结果提示，神经肽

细胞内游离钙离子在神经肽Y刺激血管平滑肌细胞增殖中的作用

为探讨细胞内游离钙离子在神经肽Y刺激血管平滑肌细胞增殖过程中的变化 ,以体外培养的血管平滑肌细胞模型为研究对象 ,运用激光共聚焦显微镜和免疫荧光组织化学技术 ,定量和动态观察了神经肽Y对血管平滑肌细胞内游离钙离子浓度与血管平滑肌细胞增殖间的相互关系。结果发现 ,神经肽Y组中血管平滑肌细胞的增殖活度 (MTT法 )和增殖细胞核抗原的表达较对照组明显增强 ;与此同时 ,神经肽Y作用下体外培养的血管平滑肌细胞内游离钙离子浓度也逐渐升高。此结果提示 ,神经肽Y刺激血管平滑肌细胞增殖的细胞内信号传导机制与神经肽Y提高细胞内游离钙离子浓度有关。

赛格列酮能抑制血管紧张素Ⅱ诱导的人内皮细胞表面粘附分子上调

目的研究赛格列酮对血管紧张素Ⅱ诱导人脐静脉内皮细胞表达细胞间粘附分子1和血管细胞粘附分子1上调的影响。方法以不同浓度的赛格列酮(0.1μmol/L、1μmol/L1、0μmol/L和100μmol/L)预处理人脐静脉内皮细胞24 h,再与10-7mmol/L血管紧张素Ⅱ共孵育12 h。通过半定量逆转录聚合酶链反应和Western Blot分别检测细胞间粘附分子1和血管细胞粘附分子1 mRNA和蛋白表达的情况。结果与血管紧张素Ⅱ组相比,0.1μmol/L和1μmol/L赛格列酮预处理24 h组对血管紧张素Ⅱ诱导人脐静脉内皮细胞表达细胞间粘附分子1 mRNA上调无抑制作用(1.107±0.091比1.104±0.081和1.062±0.051,P>0.05),而10μmol/L和100μmol/L组则有明显的抑制作用(0.814±0.016和0.766±0.026,P<0.01和P<0.001);细胞间粘附分子1蛋白表达分别下调52.9%和55.5%(P<0.01和P<0.001)。而不同浓度的赛格列酮(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L和100μmol/L)使血管细胞粘附分子mRNA表达分别下调14.2%、19.5%、45.1%和60.7%(0.1μmol/L时P<0.01,余P<0.001);蛋白表达分别下调17.8%、33.8%、54.5%和58.9%(0.1μmol/L时P<0.01,余P<0.001)。结论赛格列酮抑制血管紧张素Ⅱ上调人脐静脉内皮细胞表达血管细胞粘附分子1,并呈浓度依赖效应;但对细胞间粘附分子1无论是mRNA还是蛋白水平,在低浓度(0.1μmol/L和1μmol/L)时无抑制作用,在较高浓度(10μmol/L和100μmol/L)可有较明显的抑制作用。

AngⅡ对血管内皮细胞表达粘附分子和释放NO的影响

目的:观察AngⅡ对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达粘附分子(ICAM-1和VCAM-1)及内皮NO生成的影响,讨论三者之间的关系和可能机制。方法:采用胰蛋白酶消化法进行HUVECs的原代培养,3-5代用于实验;通过RT-PCR和W estern B lot检测两种粘附分子的mRNA和蛋白表达水平;利用G riees反应原理测定上清NO释放量。结果:HUVECs未活化时不表达VCAM-1而ICAM-1呈低表达状态;AngⅡ在生理浓度时(10-9mol/L)即可刺激HUVECs表达ICAM-1和VCAM-1 mRNA,随浓度增加表达增强;10-7mol/L AngⅡ在不同时间点刺激HUVECs 6 h即有ICAM-1 mRNA和VCAM-1 mRNA较高表达,但高峰有所不同,前者在10 h左右,后者为12 h。在AngⅡ刺激下两种粘附分子的蛋白表达水平和趋势与mRNA相似;并随浓度增加而明显抑制NO生成。结论:AngⅡ明显增强HUVECs表达粘附分子,并抑制其NO生成,具有显著的促炎和促动脉粥样硬化作用。

赛格列酮对HUVECs表达eNOS和NO生成的作用

目的探讨过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPARγ)激动剂赛格列酮,对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达一氧化氮合酶(eNOS)及其一氧化氮(NO)生成的影响。方法体外培养HUVECs,用1×10-6～10-4mol/L赛格列酮预处理HUVECs24h,再与10-7mol/LAngⅡ共同孵育12h;通过RT-PCR和WesternBlot分别检测eNOSmRNA和蛋白表达水平;通过Griees反应测定上清NO释放量。结果与无刺激组比较,10-7mol/LAngⅡ刺激HUVECs12h后明显抑制eNOSmRNA及蛋白表达,P<0.001;基础状态下,HUVECseNOSmRNA及其蛋白表达较强,10-7mol/LAngⅡ刺激12h后明显下调eNOSmRNA和蛋白表达(与对照组相比,P<0.001)。各浓度赛格列酮预处理24h明显减弱AngⅡ对HUVECseNOSmRNA的下调作用(与AngⅡ组相比,P<0.001)。同样赛格列酮也明显减弱AngⅡ对HUVECseNOS蛋白表达的下调作用(与AngⅡ组相比,0.1、1μmol/L时P<0.01,10、100μmol/L时P<0.001,但0.1、1、10μmol/L赛格列酮组间比较P>0.05)。与无刺激组比较10-7mol/LAngⅡ明显减少NO的释放,P<0.05;与AngⅡ组比较,赛格列酮干预24h后呈浓度趋势增加NO的释放,P<0.001。结论赛格列酮呈浓度效应上调HUVECs表达eNOS,并呈浓度趋势增加内皮NO的释放。

口服钙拮抗剂降压药的剂型及其对疗效的影响

随着医药科学研究的进展，抗高血压药物的种类日益增多，同类降压药也因治疗的需要而出现多种不同的剂型。高血压病的治疗原则是：有效平稳降压，兼顾脏器功能，提高(至少不降低)患者的生活质量。因此，口服降压药的选用应符合长效安全，耐受性好，副作用少的标准。

急性心肌梗死静脉溶栓后早期和晚期冠状动脉造影的改变

对100例急性心肌梗死（AMI）患者应用尿激酶和链激酶静脉溶栓后进行早期和晚期的冠状动脉（冠脉）造影（CAG），结果发现：100例AMI溶栓再通成功60例，失败40例，再通率60．0％。CAG示有残留血栓的84例（84．0％），其中40例（47．6％）为冠脉完全阻塞。早期溶栓成功的60例及溶栓和补救性经皮腔内冠脉成形术（PTCA）均失败的8例，经3～4周后再次CAG发现，有8例狭窄加重，10例狭窄减轻。表明：AMI是由突然冠脉血栓性闭塞所致并可用溶栓剂或机械的方法使闭塞的冠脉再通。溶栓通常是不完全的，使用PTCA可作为改善严重残留狭窄病变的重要疗法。

糖尿病并发急性心肌梗死溶栓后冠状动脉开通者的近期预后

目的 :研究糖尿病并发急性心肌梗死 (AMI)溶栓治疗冠状动脉完全开通后的近期预后。方法 :对 2 1例糖尿病并发 AMI溶栓后 ,急诊冠状动脉造影显示梗死冠状动脉开通者的冠状动脉造影结果进行分析 ,并于梗死后 3～ 4周内行核素心室造影和 2 4h动态心电图检查 ,观察心功能、心肌缺血和心律失常的情况 ,且随访梗死后 3～ 5周内心绞痛等并发症的发生率 ,并与 37例非糖尿病 AMI溶栓后冠状动脉开通者进行比较。结果 :与非糖尿病组相比 ,糖尿病组冠状动脉的残余狭窄较重 ,冠状动脉病变积分较高 ;梗死后近期左室功能较差 ,心肌缺血的发生率较高。结论 :糖尿病并发 AMI溶栓后冠状动脉开通者冠状动脉病变仍然较重 。

神经肽Y刺激肾动脉平滑肌热休克蛋白表达及Losartan的干预作用

目的 探讨以HSP70作为神经肽Y (NPY)和losartan间在肾动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖活动相互作用为信号 ,在高血压肾动脉重塑中的作用。方法 应用快速微量MTT比色法和荧光免疫组织化学定量技术 ,观察神经肽Y作用下肾动脉VSMC增殖活动中热休克蛋白 (heatHSP)表达以及Losartan对NPY作用的干预作用。结果 神经肽Y刺激体外培养肾动脉平滑肌细胞的增殖度 (吸光度A值为 0 2 6 2 6± 0 0 0 2 5 )与细胞内因损伤产生的HSP70表达 (A值为 0 2 44 0±0 0 0 13)明显高于对照组 (A值为 0 2 2 3 9± 0 0 0 10 ) (P <0 0 1)。losartan可降低NPY对肾动脉平滑肌细胞的增殖度 (A值 )的刺激作用 ,减少细胞内HSP70的表达。结论 神经肽Y可影响肾动脉平滑肌细胞增殖引起高血压 ,而HSP70表达水平是肾动脉平滑肌细胞增殖的重要信号。

神经肽Y剌激肾动脉平滑肌热休克蛋白表达的实验研究

目的 以热休克蛋白 70 (HSP 70 )作为神经肽Y (NPY )刺激肾动脉平滑肌细胞增殖活动为信号 ,探讨高血压肾动脉重塑中发挥的作用。方法 应用快速微量MTT比色法和荧光免疫组织化学定量技术观察神经肽Y作用下肾动脉平滑肌细胞 (VSCM )增殖活动中HSP70表达作用。结果 神经肽Y可刺激体外培养肾动脉平滑肌细胞的增殖 ,其增殖度 (MTT A值 )和细胞内因损伤产生的HSP 70表达明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 神经肽Y可影响肾动脉平滑肌细胞增殖 ,而HSP 70表达水平是肾动脉平滑肌细胞增殖的重要信号。