CCAAT增强子结合蛋白δ在前列腺癌进展及预后中的作用

目的研究CCAAT增强子结合蛋白δ(CEBPD)在前列腺癌组织中的表达,分析其表达与临床病理特征的关系。方法通过免疫组织化学技术检测前列腺癌组织芯片中的CEBPD表达情况,结合Taylor数据库,分析CEBPD的表达水平与前列腺癌患者临床病理特征和生存期的关系。结果前列腺癌患者组织中CEBPD表达与患者的年龄(P=0.041)、格里森(Gleason)评分(P<0.01)、临床分期(P=0.018)、是否转移(P<0.01)、是否死亡(P=0.029)、是否生化复发(P<0.01)呈负相关,CEBPD低表达的前列癌患者的无生化复发生存率显著降低(P<0.01),单因素和多因素COX回归分析显示CEBPD高表达的前列腺癌患者的生化复发的风险较低(单因素:P<0.01;多因素:P=0.032)。结论CEBPD在前列腺癌组织中表达与癌症的进展与临床预后相关,有望成为前列腺癌新的生物标记物。

GPD1酶在毕赤酵母中的表达及纯化

目的构建可以分泌表达GPD1酶的毕赤酵母,并使用Profinia蛋白纯化系统获得纯度90%以上的GPD1酶,扩大GPD1酶的制备,以进一步研究其在肿瘤中的功能及作为抗肿瘤靶点的临床应用研究。方法提取人细胞的总RNA,逆转录成cDNA,以此为模板通过PCR扩增GPD1基因,PCR产物与表达载体pPICZα-C用EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切,连接构建重组表达质粒pPICZα-C-gpd1;pPICZα-C-gpd1质粒电转至毕赤酵母X-33中,筛选阳性转化子,经甲醇诱导表达,采用固化金属亲和层析(IMAC)纯化分泌的目的蛋白。结果经SDS-PAGE鉴定,成功表达和纯化了GPD1酶,纯度达90%以上。结论本研究建立了毕赤酵母分泌表达GPD1酶的方法,可用于制备GPD1酶,为进一步的肿瘤机制研究和应用研究奠定基础。