《特殊紧急抢救输血推荐方案》应用实践

目的分析《特殊情况紧急抢救输血推荐方案》(简称《紧急输血方案》)在医院紧急医疗抢救工作中实施的效果及意义。方法根据《紧急输血方案》的应用范围,从广州市第一人民医院2013-2015年46 061例输血病例中,收集《紧急输血方案》公布前后3年符合特殊情况紧急抢救输血的524例病例做回顾性总结分析和比较,包括《紧急输血方案》实施前后特殊情况紧急抢救输血的一般及变化情况、ABO及Rh血型同型输注与相容性输注比例、输血适应证种类、病例的临床科室分布、实验室检测处理时间以及输血不良反应发生率等。结果在《紧急输血方案》的指导下,完成374例特殊情况需要紧急抢救输血的临床输血病例,医院输血科及相关科室执行紧急特殊输血治疗的能力和时间效率都有很大提高,尤其是《紧急输血方案》公布前后处理ABO疑难血型患者紧急抢救输血病例的实验室处理时间(h)由1.37±0.21缩短至0.32±0.10(P<0.05)、库存不足导致需要不同型血液成分输注的实验室处理时间(h)由0.31±0.10缩短至0.22±0.10(P<0.05),并体现在RhD阴性血患者紧急抢救的病例中。结论《紧急输血方案》为输血科和临床科室提供了科学、规范、标准的输血急救治疗依据和指导,使得抢救输血能有效缓解患者病情和赢得治疗时间。

储存血小板差异性长链非编码RNA表达谱研究

目的探讨机采血小板储存过程中差异性lncRNA表达谱变化及其差异表达的lncRNA在血小板储存损伤中潜在的生物学功能。方法收集13（人）份O型健康男性机采血小板各50 m L,于（22±2）℃下震荡储存,应用lncRNA芯片技术检测储存2、5、8 d机采血小板中lncRNA和mRNA表达谱变化;运用GO分析及KEGG分析预测差异表达的lncRNA功能分布,通过顺式调控分析预测lncRNA调控邻近蛋白编码基因表达的分子机制;采用实时PCR（RT-PCR）技术,验证8条lncRNA（MARCH2-2∶1、SLC2A2-1∶1、WBSCR16-3∶6、WEE1-2∶1、ENTPD6-2∶1、NKD2-1∶1、FOXS1-2∶1、MAPK13-3∶1）和4条mRNA（BCL2L1、CAPN2、MAPK14、VAMP8）的表达。结果芯片检测：血小板储存5与2 d相比,有162种lncRNA的表达量发生明显变化,表达升高的4种、降低的158种;8与2 d相比,有691种lncRNA表达量发生明显变化,表达升高的20种、降低的671种;8与5 d相比,246种lncRNA表达量发生明显变化,升高的2种,降低的244种。GO和KEGG分析：差异表达的lncRNA可能参与的生理过程有血小板激活、血小板聚集、内吞、凋亡、肌动蛋白纤维聚集、肌动蛋白骨架的调节;顺式调控分析：lncRNA具有调控血小板相关mRNA表达的功能,USP39-1调控VAMP8的表达、TMEM86B-2调控GP6的表达、FOXS1-2调控BCL2L1的表达等。RT-PCR验证：与芯片检测结果一致,其中lncRNA MARCH2-2∶1、WEE1-2∶1和NKD2-1∶1表达量升高,WBSCR16-3∶6、SLC2A2-1∶1、ENTPD6-2∶1、FOXS1-2∶1和MAPK13-3∶1表达量下降,BCL2L1,CAPN2,MAPK14和VAMP8的表达量也下降。结论血小板中含有大量的lncRNA,其表达量随着血小板储存时间延长而呈不同的变化趋势,总体来讲下调的lncRNA数量较多,且下调的幅度较大。部分变化的lncRNA可能与血小板生理功能密切相关,并且在血小板储存损伤中发挥作用。

添加SNP改变储存红细胞血流变学和一氧化氮含量研究

目的探索储存红细胞添加NO供体SNP后血液流变学各项指标以及红细胞内胞浆NO、总NO、Hb结合NO含量变化,并与新鲜红细胞内3种NO含量比较,探索其可能的临床意义。方法血样采自10名健康献血者,制成悬浮红细胞后分为新鲜红细胞组和储存红细胞组。新鲜红细胞组滤除白细胞后检测红细胞内3种NO含量。储存红细胞组储存d20时滤除白细胞,分为2部分,1部分与终浓度分别为1、10μmol/L的SNP孵育,检测流变学各项指标;另1部分与终浓度分别为0.2、1、5、25μmol/L的SNP孵育,检测红细胞内3种NO含量。结果当储存红细胞添加1μmol/L SNP时,各项流变学指标与未加SNP组相比均无统计学意义(P>0.05);当添加10μmol/L SNP时,红细胞低切粘度、中切粘度、还原低切粘度、还原中切粘度、聚集指数、电泳指数分别为4.16±0.74、2.94±0.41、9.41±1.19、5.92±0.48、1.64±0.10、4.30±0.28,均显著低于未加SNP组(P<0.05)。新鲜红细胞内3种NO含量分别是11.09±2.95、16.63±4.46、5.54±3.53,储存红细胞(未加SNP组)3种NO含量分别是4.93±1.01、7.20±0.93、2.27±1.18,后者3种NO含量均明显低于前者(P<0.05)。当储存红细胞与0.2μmol/L SNP孵育时,3种NO含量与未加SNP组比较均无统计学差异(P>0.05);当增加至1μmol/L时,3种NO含量分别是5.93±1.41、9.57±1.56、3.74±1.36,均显著高于未加SNP组(P<0.05);当增加至5μmol/L时,总NO、Hb结合NO含量分别为8.45±2.12、3.29±1.54,继续增加至25μmol/L时,总NO、Hb结合NO含量分别为8.86±1.16、3.65±0.91,均明显高于未加SNP组(P<0.05)。结论添加适当浓度NO供体SNP可以明显改善储存红细胞变形性,显著增加红细胞内NO含量。

添加硝普钠对储存红细胞内凋亡相关microRNA表达的影响

目的探寻储存红细胞添加一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)后红细胞内特定microRNA表达水平的变化,以了解体外添加NO对与红细胞衰老、凋亡相关的microRNAs表达的影响。方法 3(人)份血样来自健康无偿献血者血液制备的悬浮红细胞,滤除白细胞后均分为4℃储存20 d红细胞组(储存组)和4℃储存20 d红细胞添加1μmol/L SNP组(SNP组);对2组标本用基因芯片检测,根据差异倍数≥2或P≤0.05 2个条件,以火山图筛选出差异基因,并结合已有文献报道从中筛选出与细胞衰老、凋亡相关的microRNAs作RT-qPCR验证。结果基因芯片检测:SNP组与储存组比较,发现有69个上调基因和52个下调基因;RT-qPCR验证试验:筛选出与细胞衰老、凋亡相关的13个microRNAs没有明显变化(P>0.05)。结论体外添加NO供体SNP后储存红细胞内microRNAs的基因表达有变化,但NO短期内不影响与红细胞衰老、凋亡相关的microRNAs表达,显示其对红细胞的寿命可能无影响。

添加SNP的储存红细胞在37℃孵育后NO及ATP含量变化

目的探讨于储存红细胞中添加一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)在37℃体温环境下孵育后红细胞中NO及三磷酸腺苷(ATP)含量变化。方法采集5名健康捐血者血液标本100 m L/(人)份,与CPDA-1保存液混合制备成悬浮红细胞后,分为新鲜组:血液采集时间<1 h;储存组:储存红细胞20 d;添加组:在储存红细胞中添加1、5、25μmol/L SNP后37℃孵育30 min;保存组:添加5μmol/L SNP,孵育30 min于4℃保存0、1、4 h。新鲜组、储存组及添加组和保存组每个处理均为5份。采用总NO试剂盒检测各组红细胞中总NO、胞浆NO、结合NO含量;运用ATP含量测试盒检测红细胞中ATP含量水平。结果总NO、胞浆NO、结合NO含量(μmol/L)和ATP含量水平(μmol/g Hb),储存组与新鲜组分别为:7.63±2.62 vs 15.56±2.26,、2.21±1.68 vs 5.81±1.79、5.42±2.00 vs 9.75±2.73和3.16±0.91 vs 8.10±1.21(P<0.05);在37℃环境添加1、5、25μmol/L SNP孵育30 min时,添加5μmol/L SNP的储存组为14.15±1.76、5.82±3.38、8.33±2.69和6.16±1.29,较储存组明显升高(P<0.05)。添加25μmol/L SNP可以提高红细胞内NO水平至正常的5-10倍,但不能进一步提高细胞内ATP水平。添加5μmol/L SNP在37℃孵育30 min后继续在4℃保存1 h时3种NO含量以及ATP含量可恢复到新鲜组水平,保存4 h后NO含量与保存0和1 h相比含量明显下跌至储存组水平,而ATP在保存4 h时均维持高水平状态。结论在储存红细胞中添加5μmol/L SNP或可能改善储存红细胞的质量。

酒精能够减少斑马鱼胚胎的神经前体细胞并抑制其神经元和神经胶质细胞的分化（英文）

目的研究不同浓度的酒精对斑马鱼的神经前体细胞、神经元和神经胶质细胞的影响。方法在斑马鱼卵受精后5 h,在斑马鱼培养液中加1%、2%或2.5%的酒精。采用原位杂交和实时定量PCR的方法检测不同细胞的mRNA水平的变化,以反映酒精对斑马鱼胚胎神经发育的影响。结果不同浓度酒精处理后,斑马鱼胚胎神经前体细胞和神经元显著减少,并且随着酒精浓度的增加其数量减少更加显著。早期的神经胶质细胞标志物的表达随着酒精浓度的增加在尾部减少,而在头部增加。成熟的神经胶质细胞标志物表达随着酒精浓度的增加而显著减少。结论酒精可以导致斑马鱼胚胎神经前体细胞、神经元和胶质细胞数量减少,并抑制神经元和神经胶质细胞的分化。

骨髓间充质干细胞移植炎症性肠上皮组织中Wnt/β-catenin信号分子的表达

背景:Wnt/β-catenin信号通路是干细胞调控中最关键的信号通路之一,参与调控细胞的增殖与分化。目的:观察Wnt/β-catenin信号通路中主要信号分子在骨髓间充质干细胞移植修复炎性肠疾病过程中的表达状况。方法:采用三硝基苯磺酸灌肠法制作SD大鼠炎症性肠病模型,并将绿色荧光蛋白标记的骨髓间充质干细胞经尾静脉注入体内,以注射生理盐水为移植正常对照,于移植第14和28天处死大鼠,取其大肠组织,采用q RT-PCR的方法进行检测Wnt/β-catenin信号通路中信号分子的表达情况。结果与结论:q RT-PCR检测结果显示,wnt3a和β-catenin在炎症性肠组织中相对表达量明显增加(P<0.05),而c-myc的表达量没有明显变化(P>0.05)。骨髓间充质干细胞移植修复后,wnt3a、β-catenin和c-myc的表达量都显著下降(P<0.05)。结果表明Wnt/β-catenin信号通路在炎症性肠病以及移植骨髓间充质干细胞后的修复过程中起着重要的作用,协助骨髓间充质干细胞向肠上皮细胞分化,促进肠炎症的好转,并修复炎症区域,恢复肠组织的稳态。

血浆微RNA-27b-3p作为胃癌早期诊断生物标志物的可行性研究

目的:探讨血浆微RNA-27b-3p(micro RNA-27b-3p,mi R-27b-3p)作为生物学标志物用于胃癌早期诊断的可行性。方法:采用实时荧光定量PCR法检测46例胃癌患者及40例年龄和性别均匹配的健康人血浆中mi R-27b-3p的表达水平,同时检测其中12例胃癌患者和12例健康人外周血细胞的mi R-27b-3p表达水平。统计分析血浆mi R-27b-3p水平与胃癌患者临床病理特征的关系。运用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线及曲线下面积(area under the curve,AUC)分析mi R-27b-3p对胃癌诊断的敏感度和特异度。结果:相对于健康人组,胃癌患者中血浆miR-27b-3p水平明显降低(P<0.05);而胃癌患者与健康人外周血细胞的miR-27b-3p表达水平无明显差异(P>0.05);miR-27b-3p水平下调与胃癌分化程度降低相关(P<0.05),而与胃癌TNM分期、淋巴结转移及远程转移均无关(P>0.05)。mi R-27b-3p的ROC曲线分析结果显示,AUC值为0.724;以血浆mi R-27b-3p来鉴别诊断胃癌患者的灵敏度为60.0%,特异性为76.1%。结论:血浆mi R-27b-3p水平下调可能预示着胃癌的发生。推测mi R-27b-3p可能成为胃癌早期诊断的一个生物学标志物。