脂质组学在皮肤病学中的应用进展

脂质不仅作为生物膜组成的一部分,且作为能量来源以及具有信号分子功能,随着生理、病理和环境条件的变化而不断变化[1]。脂质谱的改变可影响多种疾病的发生发展,包括各种代谢性疾病、心血管疾病、癌症及神经退行性变等。脂质组学是一门通过系统全面分析生物样品中的脂质以及与其相互作用的分子。

桉树脑对HaCaT细胞水通道蛋白3和透明质酸表达的影响

目的:探讨桉树脑(Cin)对人永生化角质形成细胞(HaCaT)水通道蛋白(AQP)3及透明质酸(HA)转录和翻译的影响。方法:以倍他米松(BT)为对照,不同浓度Cin(0.01%、0.001%、0.0001%和0.00001%)分别孵育HaCaT细胞36 h后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(q-PCR)检测AQP3 mRNA表达水平,免疫印迹法(western blot)分析AQP3蛋白表达,以及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞外基质中HA的含量。结果:与空白对照组相比,qPCR结果示0.01%和0.001%Cin均显著增加了AQP3基因的转录(P<0.05);而10μmol/L BT明显下调AQP3基因转录(P<0.05);0.01%和0.001%Cin分别与10μmol/L BT共同孵育HaCaT细胞后,均可逆转10μmol/L BT引起的AQP3 m RNA表达下调(P<0.05)。Western blot结果表明,与空白对照组比较,0.01%Cin组和0.001%Cin组AQP3蛋白表达均显著增加(P<0.05);10μmol/L BT组AQP3蛋白表达明显下调(P<0.05)。与空白对照组比较,0.01%Cin+10μmol/L BT组和0.001%Cin+10μmol/L BT组AQP3蛋白表达均下降(P<0.05);与10μmol/L BT组比较,AQP3蛋白表达均明显提高(P<0.05)。ELISA结果表明,与空白对照组比较,10μmol/L BT组HA表达水平下调(P<0.05);与10μmol/L BT组比较,0.01%Cin+10μmol/L BT组和0.001%Cin+10μmol/L BT组HA表达水平均上调(P<0.05),但均低于空白对照组(P<0.05)。结论:Cin可不同程度逆转BT对角质形成细胞AQP3和HA的抑制作用。

微小RNA-148a-3p在寻常型银屑病患者外周血CD4^+T淋巴细胞中的表达及临床意义

目的检测微小RNA(miRNA)-148a-3p在寻常型银屑病患者外周血CD4^+T淋巴细胞中的表达,探讨其在寻常型银屑病发病中的作用。方法2017年7月至2018年4月在广州市皮肤病防治所收集寻常型银屑病患者20例,健康对照20例。抽取受试者外周静脉血,采用免疫磁珠法分选CD4^+T细胞,实时定量PCR检测外周血CD4^+T细胞中miRNA-148a-3p的表达;利用生物信息学软件预测miRNA-148a-3p的潜在靶基因,并通过双萤光素酶报告系统进行验证;采用Western印迹法检测受试者CD4^+T细胞中miRNA-148a-3p潜在靶基因Bim蛋白表达水平。采用SPSS20软件,对于符合正态分布的资料,两个独立样本均数比较采用t检验,对双变量资料计算Pearson相关系数;对不符合正态分布的资料,两样本均数比较采用非参数Mann WhitneyU检验,对双变量资料计算Spearman相关系数。结果寻常型银屑病组18例患者CD4+T细胞中miRNA-148a-3p的表达水平为5.61±1.66,健康对照组12例为1.00±0.26,两组比较,U=12,P<0.05。银屑病患者miRNA-148a-3p表达量与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)呈正相关(r=0.93,P<0.001)。生物信息学软件预测B淋巴细胞瘤2相互作用的细胞死亡调节因子(Bim)是miRNA-148a的潜在靶基因之一,并通过双萤荧光素酶报告系统得到验证。患者组(11例)CD4^+T细胞Bim表达水平为0.69±0.07,健康对照组8例为0.93±0.06,两组比较,t=4.38,P<0.01。银屑病患者Bim表达量与PASI评分呈负相关(r=-0.774,P<0.01)。结论miRNA-148a-3p在寻常型银屑病患者外周血CD4+T细胞中过度表达,并可能通过调控Bim蛋白的表达,导致CD4+T细胞异常活化,进而参与银屑病的发生、发展。