IVM及IVO桑椹胚全基因组CpG岛甲基化模式比较

目的:比较来自体外成熟(IVM)和体内成熟(IVO)卵子的桑椹胚全基因组Cp G岛甲基化模式,从表观遗传学角度分析IVM胚胎发育潜能低下的机制。方法:收集2012年1月至2013年11月单精子显微注射(ICSI)患者和短时受精患者的未成熟MⅠ期卵子168枚进行IVM,成熟MⅡ卵行ICSI受精后继续培养至桑椹胚作为试验组,对照组来自助孕患者成功后捐赠的D3丢弃胚胎,继续培养至桑椹胚,两组来源桑椹胚提取DNA后进行甲基化芯片分析。结果:IVM和IVO的桑椹胚,在形态学上无差异,但在全基因组Cp G岛甲基化模式上两组存在差异,IVM桑椹胚的甲基化程度相比IVO桑椹胚更高;IVM桑椹胚甲基化的信号总数(n=3 281)多于IVO桑椹胚甲基化的信号总数(n=611);IVM桑椹胚Cp G岛高中甲基化的比例高于IVO桑椹胚,相反低甲基化区域却低于对照组;IVM桑椹胚的Cp G岛甲基化水平相对值在Intragenic、intergenic及Promotor各区域均高于IVO桑椹胚。结论:来自体外成熟卵与来自体内成熟卵的桑椹胚,在表观遗传学甲基化方面表现出了较大的差异,这个差异可能与之后发育潜能差、妊娠率低下有关。

精液优选对精子DNA碎片的影响及其对体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响

目的评估密度梯度离心联合上游法改善精子DNA碎片(sperm DNA fragmentation)的效率及其对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的影响。方法收集120份处理前后的精液,用精子染色质扩散法检测精子DNA碎片,评估其对100个新鲜移植患者妊娠结局的影响。结果优选后,男性不育组精子DNA碎片率(SDFI)由22.75(14.44,30.25)降至11.5(5.60,22.79),对照组则由20.86(15.00,26.81)降至7.5(3.63,15.44);妊娠组精子DNA碎片明显低于非妊娠组,ROC曲线下面积是0.667;高水平组(DFI≥20%)的妊娠率和出生率低于低水平组(DFI<20%),差异有统计学意义。结论密度梯度离心联合上游法可减少精子DNA碎片;优选后DNA碎片对IVF-ET妊娠结局具有预测价值,一旦超过阈值,虽可正常受精,但妊娠率和出生率下降。

低氧培养对未成熟卵体外成熟及胚胎发育潜能的影响

目的:研究辅助生殖技术超促排卵治疗中获得的未成熟卵在低氧培养体系中的发育潜能。方法:卵胞质内单精子显微注射(ICSI)或体外受精-胚胎移植中(IVF-ET)短时受精中挑选出的GV(germinal vesicle)期卵母细胞80枚,MI(metaphase I)期卵母细胞124枚,随机分为实验组和对照组,实验组置于低氧分压(体积分数5%)的三气培养箱中、对照组置于高氧分压(体积分数20%)常规培养箱中进行体外成熟培养(IVM)及随后的囊胚和胚胎培养。IVM后成熟的卵母细胞进行ICSI受精,观察受精率、卵裂率及囊胚形成率。结果:实验组GV期未成熟卵体外培养至MII卵的成熟率、双原核(2PN)率、卵裂率、囊胚形成率及优质囊胚率与对照组无统计学差异(P>0.05)。但实验组MI期卵培养至MII卵的成熟率[96.8%(60/62)]、2PN率[80%(48/60)]、囊胚形成率[43.8%(21/48)]及优质囊胚率[20.8%(10/48)]均高于对照组[分别为58.1%(36/62),52.8%(19/36),11.8%(2/17)和0.0%(0/17)],差异有统计学意义(P<0.05),而2种培养体系的卵裂率无统计学差异。结论:超促排卵中获得的未成熟卵,特别是MI期裸卵在低氧培养体系中进行体外成熟及后续的胚胎培养,有利于获得优质囊胚。

激光辅助孵化对胚胎移植妊娠结局影响的Meta分析

目的:探究激光辅助孵化(LAH)对行胚胎移植不孕患者妊娠结局的影响。方法:计算机检索Pub Med、Ovid SP、Medline、Cochrane Library、CNKI、CBM、万方和维普等数据库,纳入LAH与其他多种辅助孵化方法和不作任何处理组比较的随机对照试验(RCT),检索年限截至2015年10月,语言不限,按照Cochrane协作组建议对纳入文献行质量评价和异质性分析,数据分析采用Rev Man 5.3.5软件。结果:纳入25个RCT;激光组分别与酸化组、机械组和对照组(不作任何处理)进行比较,继续妊娠率、流产率、活产率等差异均无统计学意义(P>0.05);对选择行冻融胚胎移植(FET)的患者,激光组较对照组有较高的种植率及临床妊娠率,差异有统计学意义(P<0.000 01;P<0.05);但多胎率显著增加(P<0.05)。结论:对选择行FET的患者,LAH较不做任何处理更有优势,可以提高种植率和临床妊娠率,值得推广及应用,但LAH会增加多胎发生的风险。

胎儿游离DNA在单基因遗传病检测的研究进展

单基因遗传病种类多而复杂,且有不断增长的趋势,总体发病率较高,临床表现各异,通过产前筛查和诊断,及早阻止致死或严重致残的单基因遗传病患儿的出生,是行之有效的防控策略。基于胎儿游离DNA的无创产前单基因遗传病检测技术已应用于临床,检测的疾病种类不断增加,技术也在不断取得突破,本文就该领域的研究进展做一综述。