维甲酸X受体α在组蛋白去乙酰化酶抑制剂及芬维A胺诱导人肝癌细胞凋亡中的作用

目的:前期研究发现,组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid、曲古抑菌素A(TSA)分别联合芬维A胺能诱导人肝癌细胞凋亡,本研究将探讨维甲酸X受体α(RXRα)在其中的作用。方法:Scriptaid(10μmol/L)、TSA(1μmol/L)联合芬维A胺(10μmol/L)分别处理人肝癌细胞株(Huh-7、HepG2)及正常的人原代肝细胞,采用RT-PCR及Western-blot分别检测RXRαmRNA及蛋白表达。结果:Scriptaid(10μmol/L)、TSA(1μmol/L)联合芬维A胺处理能显著降低人肝癌细胞株Huh-7、HepG2 RXRα表达(P<0.01),而对正常的人原代肝细胞RXRα表达无影响。结论:组蛋白乙酰化酶抑制剂Scriptaid、TSA联合芬维A胺可能通过下调RXRα表达诱导肝癌细胞凋亡。

19例异时原发结直肠癌的临床特点分析

目的探讨异时原发结直肠癌的临床特点。方法回顾性分析2000年～2012年间19例异时原发结直肠癌的临床特点及治疗效果。结果我科在2000年～2012年施行1304例结直肠癌根治术的患者中，发现19例异时原发结直肠癌，概率约为1．4％。第二癌出现在首发癌治疗后15到135个月，中位77个月，平均时间为术后74．2±29．5个月。约68．4％的患者（13／19）第2癌发生时间超过5年。与首发癌比较，第2癌体积更小，多发于升结肠。78．6％的患者存在错配修饰基因蛋白表达缺失。5年存活率达100％，全部患者在观察期内均未发现局部复发和血道转移。结论异时原发结直肠癌的发病率较低，错配修饰基因突变率较高．其预后较好。

转染胸苷磷酸化酶基因对5＇-脱氧氟脲苷抗结肠癌细胞株活性的影响

目的 探讨人结肠癌细胞系SW480和LOVO细胞株转染胸苷磷酸化酶（TP）基因后转化5′-脱氧氟脲苷（5′-DFUR）为氟尿嘧啶（5-FU）能力的变化及5′-DFUR抗癌细胞株活性的变化.方法 构建包含TP cDNA的真核表达载体,用慢病毒包装后转染结肠癌细胞株SW480和LOVO.转染5代后以免疫荧光法和流式细胞技术检测转染效率;RT-PCR和Western blot法分别检测2株细胞的TP mRNA和TP蛋白表达.然后以高效液相色谱法（HPLC）检测2株细胞转染前后转化5′-DFUR为5-FU的量;MTT法检测5′-DFUR对2株细胞转染前后半数抑制浓度（IC50）.结果 转染TP基因后SW480-TP与LOVO-TP 5代细胞转染效率稳定在95％左右.2株转染细胞的TP mRNA表达分别比野生型细胞增加（695±172）倍（t=-7.00,P=0.002）和（282±87）倍（t=-5.61,P=0.030）,Western blot显示TP蛋白表达也明显增强.转染后的SW480-TP与LOVO-TP在培养基中分别使5′-DFUR转化为5-FU的量增加（t=19.406 ～66.921,P＜0.01）.5′-DFUR对SW480的IC50由（1641±53） μmol/L降至（587±17） μmol/L（t=-32.59,P＜0.01）;对LOVO的IC50由（1607±57） μmol/L降至（1088±89） μmol/L（t=-8.52,P＜0.01）.结论 慢病毒载体能够高效地将TP cDNA转染至人结肠癌细胞SW480和LOVO并稳定传代,转染后2株细胞的TP mRNA和TP蛋白表达明显增高,使5′-DFUR转化为5-FU的量增加,对结肠癌细胞株SW480和LOVO的抑制作用增强.