顺铂诱导上皮间质转化在耐药喉癌细胞中的作用

目的:观察顺铂(CDDP)诱导的人喉癌耐药细胞(hep-2/CDDP)中的上皮间质转化(EMT)情况,探讨EMT在喉癌顺铂耐药中的机制。方法:利用hep-2细胞和前期培养的hep-2/CDDP细胞株;Transwell、划痕实验检测细胞的侵袭迁移能力;分别提取人喉癌顺铂耐药细胞hep-2/CDDP及其亲代细胞hep-2mRNA、总蛋白,应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blot方法检测上皮表型E-cadherin、Zo-1,上皮间质转化转录因子Snail、Slug、Twist1,间质表型分子Vimentin mRNA及蛋白表达水平。结果:Transwell结果显示耐药细胞穿过基质胶的数量高于亲本细胞(P<0.05),划痕实验示hep-2/CDDP细胞划痕愈合面积百分比高于hep-2细胞(P<0.05),hep-2/CDDP细胞上皮表型E-cad、Zo-1mRNA及蛋白表达水平较hep-2细胞降低(均P<0.01),EMT转录因子Snail、Slug表达水平较hep-2细胞升高(均P<0.01),Twist1蛋白水平表达无明显变化(P>0.05),间质表型Vimentin mRNA及蛋白表达水平较hep-2细胞升高(均P<0.01)。结论:hep-2细胞的耐药性和侵袭迁移能力改变与顺铂诱导的上皮间质转变可能有关,抑制EMT相关通路可能为逆转喉癌顺铂耐药提供新思路。