蟾酥活性成分及其药理作用的研究进展

目的对蟾酥活性成分及其药理作用的研究进展进行综述。方法通过查阅近十年来国内外的文献,对蟾酥的活性成分及其药理作用进行归纳和分析。结果蟾酥的化学成分包括蟾蜍二烯内酯类、吲哚生物碱类、甾醇类及其他类化合物,近年来关于蟾蜍二烯内酯类活性单体成分的研究较多。蟾酥及其活性成分具有抗肿瘤、强心、抗炎、镇痛、抗菌等药理作用,目前的研究主要集中于抗肿瘤作用及强心作用。结论蟾酥作为中国传统中药材之一,在临床上具有广泛的应用。本文详细地归纳了蟾酥的活性成分,综述了其药理作用,特别是其抗肿瘤作用,以期为基于蟾酥及其活性成分的研究提供一定的依据。

虚拟仿真辅助药学专业有机化学实验教学的实践

有机化学实验是有机化学教学的重要环节,为培养学生的创新能力和提高其综合素质打下了坚实的基础.通过分析高校有机化学实验教学模式的现状,利用本校虚拟仿真实验中心,对原有实验教学进行改革,提出了以虚拟仿真实验为辅、实操实验为主的有机化学新实验教学模式.实践证明,虚拟仿真实验激发了学生的学习兴趣,提高了其学习效率,实操实验培养了学生的动手能力和实践能力,虚实结合有力推动了有机化学实验教学质量的提高.

基于微流控芯片的新型冠状病毒检测研究进展

微流控芯片是集成化、高通量、低成本、便携式的生物分析检测工具,近年来在新型冠状病毒(SARS-CoV-2)检测中备受关注。本文综述了微流控芯片及其系统在SARS-CoV-2检测中的最新进展,介绍并对比了微流控芯片的制备材料和成型工艺,着重阐述了基于微流控芯片的核酸分子检测、血清学检测和即时检测(POCT)技术的应用研究进展,为检测方法的创新设计和芯片制备提供参考。将现有生物检测技术与微流控设备有效结合,可以实现SARS-CoV-2的高效、灵敏和准确检测,基于微流控芯片的病毒检测方法呈现出多样化、集成化的特点,是传统病毒检测方法的有效替代方案。本文探讨了各种检测技术的适用性和现有挑战,将帮助学者开展更为广泛深入的生物医学分析检测研究,深化认识先进检测技术与微流控技术的发展前景。

思政引领+能力导向的波谱解析“5E”教学模式思路探讨

波谱解析是应用现代物理手段研究有机化合物结构的一门多学科交叉课程,应用范围广、实践性强。然而,该课程教学中存在学生学习兴趣低、吸收内化难度大、迁移应用训练少、能力价值提升慢等问题。在前期教学经验总结和学生学习效果反馈的基础上,作者开展将“5E”教学模式应用于药学波谱解析课程的探索研究。课前通过线上发布情景问题或热点案例吸引学生兴趣,引导其进行基础探究;课中进行线下深入探究、解释、知识迁移和初评价;课后通过线上作业/线下实践深化知识迁移并完善评价。“5E”教学模式有利于促进线上与线下的混合,加强理论与实践的结合,实现思政教育与课程的深度融合。

术德兼修视角下医学院校专业课程思政的探索与实践

高校立身之本在于立德树人。以钟南山院士为首的广医人在抗击“非典”、防控“新冠”等重大公共事件中体现的人文情怀是我校课程思政的重要基石。该文以临床药学专业药物毒理学为例,阐述了在医学院校中对于专业课程开展课程思政的教学理念、教学策略以及在实践中的运用方法与反思。

药学专业“产-学-研”协同育人模式的探索

目的:探索广州医科大学药学院"产-学-研"相结合的药学人才培养新模式。方法:通过建立科研-教学互动平台、确定学生专业规划和培养目标、增强学生创新创业意识和形成教学-科研良好互动的局面,共同建立"产-学-研"协同育人平台。结果:广州医科大学药学院制定"产-学-研"培养方案,确定了学生的课程体系、专业规划和培养目标,对应用型药学人才培养具有重要作用。结论:通过对"产-学-研"协同育人机制的探索,拓宽了学生与用人单位合作的机会,增强了学生的创新创业意识,使广州医科大学药学院学生成为能力出众、市场需求的工程型、技术型和技能型药学人才。

常山酮通过Wnt/β-catenin信号通路抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭和迁移

目的:探讨常山酮抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的作用机制。方法:采用MTT法检测常山酮对MDA-MB-231细胞活力的影响;划痕实验、Transwell实验分别检测细胞的体外迁移和侵袭能力,Western blot实验检测增殖和转移通路相关蛋白的表达水平。结果:常山酮对人乳腺癌细胞MDA-MB-231有强大的细胞毒性作用,IC_(50)为(0.108±0.005)μmol/L;划痕及Transwell实验显示,随着常山酮给药浓度的升高,相对迁移率显著降低,侵袭细胞数目显著减少;Western blot结果显示,其可使与细胞增殖和转移通路相关蛋白Wnt3a和β-catenin表达显著降低,提示MDA-MB-231细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力均被常山酮显著抑制。结论:常山酮对人乳腺癌细胞MDA-MB-231有较好的抑制活性,能显著抑制其体外增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关。

丹参酮Ⅱ_(A)对人非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:研究丹参酮Ⅱ_(A)对人非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:采用MTT比色法考察丹参酮Ⅱ_(A)对A549和H1299细胞增殖的抑制作用,并计算其半抑制浓度(IC_(50))。选用A549细胞为研究对象,分别用不同浓度的丹参酮Ⅱ_(A)(0、5.0、10.0、20.0μmol/L)处理,采用平板克隆形成实验、划痕和Transwell实验检测细胞体外增殖能力、迁移和侵袭能力的变化。采用qRT-PCR检测细胞中integrinα_(2)、integrinβ_(1)、MMP2、MMP9、β-catenin、N-cadherin、E-cadherin mRNA表达。结果:MTT实验结果显示丹参酮Ⅱ_(A)可呈浓度依赖性地抑制A549和H1299细胞的增殖,其作用72 h的IC_(50)分别为(11.74±1.24)、(47.74±1.30)μmol/L。与对照组比较,丹参酮Ⅱ_(A)可显著减少细胞克隆团的数目和大小,抑制A549细胞的体外增殖能力。丹参酮Ⅱ_(A)处理后的A549细胞侵袭和迁移能力均降低,细胞内integrinα_(2)、integrinβ_(1)、MMP2、MMP9、β-catenin、N-cadherin mRNA表达降低,E-cadherin mRNA表达升高。结论:丹参酮Ⅱ_(A)可抑制人非小细胞肺癌A549细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力。

千金子二萜醇衍生物抗非小细胞肺癌的作用及机制

目的:非小细胞肺癌占所有肺癌的85%,具有较高的发病率和病死率。非小细胞肺癌的治疗研究和新药开发迫在眉睫。本研究主要探讨千金子二萜醇衍生物的活性及其抑制非小细胞肺癌细胞生长的作用机制。方法:以千金子二萜醇为原料合成3个千金子二萜醇衍生物,采用磁共振验证结构;采用MTT法检测上述衍生物对非小细胞肺癌细胞(A549和H1299细胞)增殖活力的影响,筛选出活性最佳的化合物进行后续实验。集落形成、划痕、Transwell实验分别用于检测A549和H1299细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力,实时荧光定量PCR(real-time RT-PCR)和蛋白质印迹法用于检测A549细胞中E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、MMP2等mRNA和蛋白质的表达水平。结果:3个千金子二萜醇衍生物均呈剂量依赖性地抑制A549和H1299细胞的生长,且对正常细胞Beas-2B和16HBE细胞抑制作用较弱,具有一定的选择性杀伤作用。其中C-5苯甲酰化千金子二萜醇的活性最佳,作为后续实验的药物。与对照组相比,处理组的A549和H1299细胞克隆团明显变小且数目明显减少,相对迁移率明显降低,侵袭细胞数目明显减少(均P<0.05)。在mRNA水平上,integrinα2、integrinβ1、MMP2、MMP9、β-catenin、N-cadherin表达均降低,E-cadherin表达增高(均P<0.05);在蛋白质水平上,N-cadherin、β-catenin、MMP2和integrinαV表达均降低,E-cadherin表达增高(均P<0.05)。结论:本研究合成的千金子二萜醇衍生物抑制非小细胞肺癌的活性较好,其中C-5苯甲酰化千金子二萜醇可能通过调控上皮间质转化过程显著抑制非小细胞肺癌细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力。

单核/巨噬细胞调控心梗后心肌纤维化的研究进展

急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)是一种严重的缺血性心脏病,持续的心肌缺血可导致心肌细胞大量凋亡或坏死而丢失。心肌纤维化(myocardial fibrosis,MF)是指在心肌的正常组织结构中胶原纤维过量积聚、心脏组织中胶原浓度显著升高或胶原成分发生激剧改变,导致心脏僵硬度增加、心功能下降。MF是心肌梗死的主要病理生理学过程,可导致心脏重构(cardiac remodeling),并逐渐发展为慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)[1]。

水葫芦根、茎、叶中总黄酮的提取及其镇痛、抗炎作用的研究

本文通过不同溶剂(乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、石油醚)对水葫芦的不同部位(根、茎、叶)进行提取,并对提取物中的黄酮含量的测定。初步研究了水葫芦提取物的镇痛抗炎的作用。研究结果表明:水葫芦的根、茎、叶提取物中均含有黄酮成分。水葫芦的根、茎提取物较叶提取物具有较好镇痛抗炎作用。表现为在热板法和扭体法实验中,水葫芦的根、茎提取物能明显提高阈值,但叶子在扭体法实验中没有提高阈值的作用。水葫芦根、茎提取物比叶子的提取物有较好的抑制毛细血管通透性作用。本文的研究可以为水葫芦在医药方面的研究开发及综合利用提供科学的依据。

miR-142-3p靶向HMGB1逆转乳腺癌细胞MCF-7对阿霉素的耐药性

目的化疗耐药是乳腺癌复发转移、治疗效果不理想的主要因素。本文探讨miR-142-3p通过靶向高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)提高乳腺癌化疗敏感性的分子机制。方法实时荧光定量PCR检测人乳腺癌MCF-7细胞及阿霉素耐药株MCF-7/DOX细胞中的miR-142-3p水平;MTT法检测阿霉素(doxorubicin,DOX)处理后各组的增殖情况、流式细胞术检测凋亡率、Western blot检测HMGB1和自噬有关蛋白的表达水平;双荧光素酶报告实验评价miR-142-3p对HMGB1的靶向调控作用。结果阿霉素耐药株MCF-7/DOX细胞中的miR-142-3p水平明显下调。miR142-3p的过度表达增强了乳腺癌细胞对阿霉素的敏感性和提高阿霉素诱导的凋亡比率。HMGB1是乳腺癌细胞中miR-142-3p的直接功能靶点,HMGB1的过表达可以明显解除由miR-142-3p上调所产生的细胞凋亡和自噬抑制。结论miR-142-3p的过表达可能通过抑制自噬靶向HMGB1,增强乳腺癌细胞对阿霉素的化学敏感性。miR-142-3p/HMGB1为提高乳腺癌对药物的敏感性提供了新的靶点,具有一定价值。

n-3多不饱和脂肪酸对糖尿病心肌病小鼠心脏的保护作用

目的:探讨n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFAs)对糖尿病心肌病(DCM)小鼠心脏的保护作用及调控机制。方法:将6~8周龄雄性野生型(WT)C57BL/6J小鼠和Fat-1(编码n-3脂肪酸脱饱和酶,促n-3 PUFAs合成)转基因(Fat-1^(+/+))小鼠随机分成4组:WT组、Fat-1^(+/+)组、WT+DCM组和Fat-1^(+/+)+DCM组。通过腹腔注射50 mg/kg链脲佐菌素并以45%高脂饲料喂养20周建立DCM模型;对照组则腹腔注射等体积柠檬酸缓冲液并给予普通饲料喂养。造模期间每隔2周测定小鼠血糖及体重,并采用小动物超声仪检测小鼠左心室收缩及舒张功能变化。DCM造模结束后进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),并采用RT-qPCR和Western blot检测心肌凋亡、纤维化及NLRP3炎症小体通路相关分子的mRNA和蛋白水平。结果:DCM造模20周后,WT+DCM组和Fat-1^(+/+)+DCM组小鼠血糖比造模前均显著升高且体重显著降低(P<0.05),但Fat-1^(+/+)+DCM组与WT+DCM组相比血糖显著降低,体重显著升高,OGTT曲线下面积显著减少(P<0.01)。心脏超声检测结果显示DCM造模20周后WT+DCM组和Fat-1^(+/+)+DCM组小鼠左心室收缩功能(LVEF和LVFS)和舒张功能(E/A和E´/A´)与造模前相比均显著降低,但Fat-1^(+/+)+DCM组小鼠左心室收缩和舒张功能较WT+DCM组显著改善(P<0.01)。RT-qPCR和Western blot检测结果显示,心肌组织中凋亡执行蛋白caspase-3和促纤维化蛋白TGF-β的表达在DCM造模后均显著升高,但Fat-1^(+/+)+DCM组两者表达均比WT+DCM组显著减少(P<0.05)。此外,经DCM造模后心脏组织中NLRP3炎症小体及相关炎症细胞因子(NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β和IL-18)的mRNA和蛋白表达水平较造模前均显著升高,但其在Fat-1^(+/+)+DCM组较WT+DCM组显著降低(P<0.05)。结论:n-3 PUFAs对糖尿病小鼠的血糖、体重及左心室收缩和舒张功能均有显著改善作用;其机制可能是通过减少心肌细胞凋亡和纤维化并抑制NLRP3炎症小体及相关炎症因子的转录激活,从而减轻心肌损伤。

高效液相色谱法同时测定功劳木药材中9种化学成分含量

目的建立同时测定功劳木药材中9种化学成分含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Waters XBridge C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为0.1%磷酸水溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm,柱温为25℃,进样量为10μL。结果氯化木兰花碱、绿原酸、小檗胺、四氢药根碱、非洲防己碱、盐酸药根碱、粉防己碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱质量浓度分别在0.04~81.06μg/mL(r=0.9999)、0.06~60.05μg/mL(r=0.9976)、0.02~10.44μg/mL(r=0.9985)、0.008~10.44μg/mL(r=0.9998)、0.05~49.67μg/mL(r=0.9999)、0.12~248.03μg/mL(r=0.9999)、0.42~39.18μg/mL(r=0.9999)、0.34~353.08μg/mL(r=0.9997)、0.29~295.53μg/mL(r=0.9999)范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3.0%(n=6);平均回收率分别为99.38%,99.17%,106.60%,99.58%,99.59%,99.72%,100.00%,99.58%,99.55%,RSD分别为0.28%,0.44%,1.86%,1.47%,0.68%,0.39%,0.87%,0.37%,0.32%(n=6)。结论该方法操作简便,专属性和重复性均良好,结果准确可靠,可用于同时测定功劳木药材中9种化学成分的含量。

人结肠癌5-氟尿嘧啶耐药细胞株SW620/Fu和LoVo/Fu的构建与鉴定

目的构建耐5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)的人结肠癌SW620/Fu和LoVo/Fu细胞株,以建立稳定的体外实验模型。方法选取亲本人结肠癌细胞SW620和LoVo进行培养传代,通过药物逐步递增法建立体外5-Fu诱导的耐药细胞株,并对耐药细胞株进行短串重复序列(STR)分析;采用MTT法分别检测5-Fu对亲本株和耐药株的半数抑制浓度(IC_(50)),并计算5-Fu耐药指数(RI)。结果耐药细胞株与STR分析结果高度匹配,表明成功构建人结肠癌细胞5-Fu耐药细胞株SW620/Fu和LoVo/Fu。5-Fu对SW620和SW620/Fu细胞的IC_(50)值分别为58.17±3.54和443.71±14.27μmol/L;对LoVo和LoVo/Fu细胞的IC_(50)值分别为152.53±13.95和1049.54±70.51μmol/L(均P<0.05),SW620/Fu和LoVo/Fu细胞的耐药指数分别为7.63和6.88。结论药物逐步递增法成功构建了5-Fu耐药细胞株,为结肠癌耐药机制研究建立了平台,有利于逆转肿瘤耐药的研究。

功劳木HPLC指纹图谱与其抗乙酰胆碱酯酶作用的谱效关系研究

目的:考察功劳木甲醇提取物HPLC指纹图谱与其抗乙酰胆碱酯酶的谱效关系。方法:采用Waters XBridge C_(18)色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm;柱温为25℃;进样量为10μL;建立HPLC指纹图谱后,采用中药指纹图谱相似度评价软件进行相似度分析,且采用SPSS16.0进行相关分析和回归分析。结果:通过共有模式分析共得到30个共有峰,且共有峰的相似度结果为0.803~0.956;通过功劳木提取物30个共有峰的峰面积和其抗乙酰胆碱酯酶活性数据进行皮尔逊相关分析,最终得到13个具有显著性相关峰,和对照品比对,成功指认出5个,分别为绿原酸(13号峰),小檗胺(15号峰),四氢药根碱(16号峰),粉防己碱(20号峰),小檗碱(22号峰);此外,通过回归分析得到方程Y=0.428 X22+0.425 X20+0.639;从中可知,峰20(粉防己碱)和峰22(小檗碱)为药效相关峰。结论:通过谱效分析,得到了多个相关峰,其中20号峰(粉防己碱)为功劳木药效相关峰但并未被药典收载,该结果可为功劳木药典标准进行有效补充。

MMP2介导Sonic hedgehog信号通路对糖尿病内皮祖细胞功能的影响

目的:研究MMP2介导Sonic hedgehog信号通路对糖尿病内皮祖细胞(EPC)功能的影响。方法:成年C57BL/6雄鼠给予链脲佐菌素(STZ)诱导为1型糖尿病模型饲养8-12周,取骨髓培养内皮祖细胞(EPCs),于第七天给予过表达Shh腺病毒(Adv-Shh)处理48 h或给予Sonic hedgehog(Shh)信号通路配体蛋白Shh处理24 h,或给予MMP2-siRNA干扰MMP2的表达后再给予Shh蛋白处理。Western印迹法检测Shh、MMP2的表达;体外小管形成和细胞迁移实验,观察糖尿病EPCs小管形成能力和迁移功能的变化。结果:Adv-Shh显著提高糖尿病EPCs的Shh表达水平,改善糖尿病EPCs的小管形成和迁移能力。糖尿病EPCs的MMP2下调,给予Shh蛋白处理后增加MMP2表达,在此基础上给予MMP2-siRNA削弱Shh蛋白对糖尿病EPCs小管形成和迁移能力的改善。结论:MMP2介导Sonic hedgehog通路激活对糖尿病内皮祖细胞功能的改善。

缺氧心肌细胞来源外泌体对Gli1^+细胞纤维化表型转换的作用机制

目的 观察缺氧心肌细胞来源外泌体对Gli1 +细胞纤维化过程的影响,并探讨其可能的机制。方法 分离Gli1 +细胞和SD乳鼠心肌细胞。心肌细胞分别进行常氧和缺氧培养,收集培养基并提取外泌体,用透射电镜、Nanosight、Western blot等方法对其鉴定。两种外泌体分别与Gli1 +细胞共培养。RT-qPCR法检测这两种外泌体并对比分析,明确其中起关键调控作用的miRNA。转染miRNA模拟物观察Gli1 +细胞中纤维化相关蛋白的表达水平。结果 Gli1 +细胞强阳性表达CD29、CD105和Gli1,不表达CD31、CD34和CD45。心肌细胞表达cTnT和α-Actinin,其外泌体直径约100 nm,并检测到Flotillin-1、Alix、HSP-70和CD63。缺氧处理外泌体中miR-223明显上调( P <0.01);Gli1 +细胞经缺氧外泌体和 miR-223 mimic处理,纤维化相关的蛋白α-SMA( P <0.01, P <0.05)、DDR-2( P <0.01, P <0.01)和collagen I( P <0.05, P <0.01)的表达都明显升高。结论 缺氧心肌细胞外泌体能促进Gli1 +细胞内纤维化相关蛋白的表达,使其向纤维化表型转换,这一作用可能与外泌体中高表达的miR-223有关。

非编码RNA对肺源性心脏病的表观遗传调控

肺源性心脏病(肺心病)是中国常见心血管病,其晚期致死率高。目前肺心病的治疗主要为延缓疾病进程,无法有效改善并治愈疾病,亟需寻找新的治疗手段。表观遗传调控在疾病的发生和病理进程中发挥重要作用,通过非编码RNA(ncRNA)影响疾病进程为开发新药提供了全新思路。由于肺心病中的ncRNA研究尚处于少且浅、杂和散的阶段,本文首次总结了与肺心病各种疾病表型相关的ncRNA,探讨了ncRNA对肺心病的表观遗传调控。

抗肿瘤中药活性成分千金子素L1的单酰化修饰研究

为了考察千金子素L1(1)中的3-苯乙酰基、5-乙酰基及15-乙酰基对抗肿瘤活性的影响,本文以碳酸钾为碱,甲醇为溶剂,将1的3、5、15位酯键水解得脱酰基中间体2,对2的羟基进行选择性乙酰化、丙酰化、苯甲酰化、琥珀单酰化修饰,预期得5-酰基-3,15-二羟基千金子素L1衍生物(3)。经TLC、HPLC、MS检测,结果显示单酰化产物不稳定,化合物3可通过分子内酯交换生成相应的化合物4。