广州地区2011—2013年儿童呼吸道合胞病毒流行特征分析

目的了解广州地区2011—2013年急性呼吸道感染患儿呼吸道合胞病毒（RSV）的流行情况。方法用实时荧光PCR方法对本院收治的27116例急性呼吸道感染患儿咽拭子标本进行RSV检测。随机取30例RSV阳性标本，扩增其G基因并测序。从30例阳性标本中随机取3例，扩增RSV全基因组并测序。结果27116例标本中共检出RSV阳性4421例，阳性率为16．30％（4421127116）。30株测序标本中，21株属于NA1型，2株属于ON1型，7株属于BA9型。27株G基因的GenBank登陆号是KM586819～KM586845。3株全基因组的GenBank登陆号是KM517572、KM578843、KM517573。结论RSV是引起2011—2013年广州地区儿童急性呼吸道感染的重要病原体。NA1型和BA9型分别是RSVA、B亚型的优势基因型。

人腺病毒致病机制研究进展

腺病毒(AdV)在自然界分布广泛,全球各国家或地区均有AdV感染出现。科学家于1953年初分离出AdV至今,已发现100多种血清型,可分成哺乳动物AdV和禽类AdV两属。依据AdV抗血清中和的能力,可将人腺病毒(HAdV)分成71种不同的血清型;结合生物学和免疫学特性又将其划分为A~G 7个亚群。AdV可感染上呼吸道、肺、结膜、泌尿道和胃肠道,引起相应部位的炎症,少数则表现为肝炎、胰腺炎、肾炎、出血性结肠炎、出血性膀胱炎、脑膜脑炎,在免疫功能低下的患者常可引起严重甚至致死性感染,因此对人类的健康造成了极大的威胁。本文以HAdV对机体的致病展开综述,讨论了AdV对人体致病的多种作用机制,并提出对HAdV未来致病机制与免疫逃逸研究的展望,并根据其新兴研究提出对新型抗HAdV药物开发的展望。

流感病毒研究进展

流行性感冒(简称流感)是由流感病毒感染所致的具有高度传染性的急性呼吸道疾病,具有强致病性和高病死率。近年来,针对流感病毒的研究已取得了一定的进展,但流感病毒的药物和疫苗研发仍存在不足。目前,对于流感病毒的发展趋势和病毒变异情况尚无法预测,仍需广大科研工作者对流感病毒的病原学和致病机制进行深入研究。文章就流感病毒的病原学、流行病学、致病机制、流感相关性肺炎和急性呼吸窘迫综合征、药物研发等进行综述。

清道夫受体蛋白的原核表达及初步鉴定

目的表达清道夫受体B2蛋白(SCARB2),初步鉴定表达产物。方法培养RD细胞,提取其mRNA经逆转录PCR(RT-PCR)方法扩增出scarb2基因片段,构建表达载体pET28a(+)/SCARB2,在原核表达系统(大肠杆菌BL21)中表达SCARB2蛋白,并用His单抗对表达蛋白进行免疫印迹法(Western blot)鉴定。结果构建的重组质粒pET28a(+)/SCARB2经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,重组蛋白SCARB2高效表达并纯化成功,经His单抗初步验证有目的蛋白表达。结论表达并初步鉴定了SCARB2蛋白,为肠道病毒71型(EV71)与清道夫受体蛋白的作用机制及清道夫受体的单克隆制备提供参考。

马尾藻岩藻聚糖硫酸酯抑制HepG2细胞的增殖研究

采用MTT方法考查不同浓度的马尾藻岩藻聚糖硫酸脂对HepG2细胞存活率的影响,进一步运用流式细胞仪和检测ROS含量探讨马尾藻岩藻聚糖硫酸酯抑制HepG2细胞增殖的机理。结果表明,在0.5~8.0 mg/mL内,HepG2细胞的存活率随着马尾藻岩藻聚糖硫酸脂浓度的升高呈下降趋势。研究发现,随着马尾藻岩藻聚糖硫酸脂浓度的增加,细胞内SubG1和G0/G1的细胞数量升高。而且,通过检测细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)含量,发现随着马尾藻岩藻聚糖硫酸脂浓度的增加,细胞内ROS含量显著升高。马尾藻岩藻聚糖硫酸脂抑制HepG2细胞增殖是通过诱导细胞内ROS的过量产生导致细胞发生凋亡和G0/G1阻滞。

胆道闭锁婴儿嗜肝病毒和非嗜肝病毒感染情况

目的探讨胆道闭锁（BA）婴儿嗜肝病毒和非嗜肝病毒感染情况，分析各种病毒感染与BA发生发展的关系。方法收集2010年1月1日至2014年12月31日广州市妇女儿童医疗中心收治的184例BA婴儿的病历资料和病原学检测结果，分析3类嗜肝病毒即甲肝病毒（HAV）、乙肝病毒（HBV）、戊肝病毒（HEV）和5类非嗜肝病毒即巨细胞病毒（CMV）、EB病毒（EBV）、单纯疱疹病毒（HSV）、肠道病毒（EV）、柯萨奇病毒（Cox）感染情况；选用同期门诊和住院非BA的无免疫缺陷患儿结果作对照。结果BA患儿3种嗜肝病毒（HAV、HBV、HEV）和5种非嗜肝病毒（CMV、EBV、HSV、EV、Cox）中，以CMV检出率最高（40.21%，39/97例），HBV、HEV、EBV、HSV、EV、Cox检出率均较低，9例存在病毒混合感染；BA患儿检出的主要感染病原体CMV IgM阳性率[34.94%（29/83例）]显著高于对照组患儿[15.69%（8/51例）]，差异有统计学意义（χ2＝5.86，P〈0.05）；CMV DNA定量检出率[28.57%（20/70例）]显著高于对照组患儿[3.70%（1/27例）]，差异有统计学意义（χ2＝7.10，P〈0.05）；≤60 d组与〉60 d组BA患儿CMV DNA检出率比较差异有统计学意义[45.45%（15/33例）比25.48%（5/37例），χ2＝8.72，P〈0.01]，但CMV IgM阳性率在≤60 d组、60～90 d组及≥90 d组比较差异无统计学意义[47.22%（17/36例）比20.00%（6/30例）比35.29%（6/17例），χ2＝5.62，P〉0.05]；CMV DNA检出组与未检出组BA患儿检测龄差异无统计学意义（P〉0.05）。CMV DNA和CMV IgM 2种方法检测一致性较差（Kappa值〈0.4）。结论BA患儿CMV感染率高，≤60 d的小婴儿CMV DNA检出率最高，各年龄段患儿CMV IgM阳性率无明显差异，不支持CMV是BA的继发感染，CMV可能参与BA的发生发展。

海蒿子多糖抗宫颈癌分子机制研究

宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤,高危型人乳头瘤病毒感染是其主要的致病因素。来源于海洋生物的多糖,具有结构新颖、安全性高,毒副作用小等优点,且显示出较好的增强免疫、细胞诱导分化、抗病毒、抗肿瘤生物活性,是潜在的抗HPV和抗宫颈癌药物,近年来已引起国内外学者的广泛关注。其抗肿瘤作用的主要机理是提高机体免疫功能的同时产生对肿瘤细胞直接细胞毒作用、诱导肿瘤细胞的凋亡、抑制肿瘤细胞周期有关。文章以海藻中的海藻子为例,详细讨论海蒿子多糖抗宫颈癌的分子机制,并提出海蒿子多糖在治疗宫颈癌未来研究开发和临床应用的展望。