循环miRNA在肝胆疾病诊断中的研究进展

微小核糖核酸(microRNA),简称miRNA,参与着生命活动的病理生理过程,在人体血清、血浆等体液中存在丰富而稳定的循环miRNA。简述了循环miRNA与病毒性肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌、药物性肝炎等肝胆疾病或疾病不同阶段的表达谱存在明显差异性,其中一些循环miRNA可作为相关疾病早期诊断、病情进展和预后评估的新型无创性生物标志。本文就循环miRNA在肝胆疾病诊断研究中的最新进展作一综述。

妊娠糖尿病患者外周血γδ T细胞的改变及临床意义

目的比较分析妊娠糖尿病(GDM)患者及健康孕妇外周血中γδ T细胞的组成变化,为探讨γδ T细胞在GDM发病中的作用和意义提供线索。方法采用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离GDM患者(病例组)及健康孕妇(对照组)外周血单个核细胞(PBMC),加入荧光标记鼠抗人T细胞抗原抗体(TCR)γδ单克隆抗体(McAb)及鼠抗人CD3 McAb双染,流式细胞术分析γδ T细胞所占比例。结果病例组PBMC中γδ T细胞的比例为(6.89±3.22)%,占CD3+T细胞的(10.87±4.91)%,对照组为(4.26±1.64)%,占CD3+T细胞的(8.21±0.35)%,病例组显著高于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05);初诊组GDM患者外周血PBMC中γδ T细胞的比例为(8.79±2.33)%,占CD3+T淋巴细胞的(12.27±5.45)%,显著高于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 GDM患者γδ T细胞在外周血PBMC及CD3+T细胞中的比例增高,提示疾病发生影响和改变了T细胞亚群的分布。

IL-17在米非司酮诱导的早产大鼠模型外周血中的表达水平及其意义

目的 探讨米非司酮诱导的早产大鼠模型外周血中IL-17的表达水平及其意义。方法SPF级10-12周龄Sprague-Dawley大鼠适应性喂养1周后雌雄合笼,阴道涂片发现精子者标记为妊娠第1日。将8只孕鼠随机分为对照组与早产组,每组4只。早产组大鼠在妊娠第18日皮下注射米非司酮10 mg/kg,建立米非司酮诱导的早产大鼠模型,对照组大鼠在相同时间注射芝麻油,分别于注射后6 h及24 h采集2组大鼠外周血,检测血清中IL-17、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）的水平。比较早产组和对照组间IL-17、GM-CSF水平的差异。结果 早产组大鼠在妊娠第18日皮下注射米非司酮后的发动分娩时间间隔明显短于皮下注射芝麻油的对照组（P〈0.01）。早产组大鼠在注射米非司酮后6 h时血清IL-17水平与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,24 h时血清IL-17水平高于对照组（P〈0.01）。2组大鼠在注射米非司酮后6、24 h时血清GM-CSF水平比较差异均无统计学意义（P均〉0.05）。结论 米非司酮诱导的早产大鼠外周血中IL-17水平升高,提示炎症因子IL-17可能参与了激素诱导的早产发生过程。

人MutS同源蛋白2(hMSH2)过表达的肺癌细胞模型的构建

目的构建人Mut S同源蛋白2(h MSH2)过表达的肺癌细胞模型,探究h MSH2分子介导γδT细胞杀伤肺癌细胞的效应。方法 PCR扩增h MSH2编码序列,同源重组法构建h MSH2-EGFP融合蛋白过表达载体;转染肺癌细胞系NCI-H520细胞以构建h MSH2分子过表达的NCI-H520细胞模型;Western blot检测细胞中h MSH2分子表达,流式细胞计量术检测细胞膜上h MSH2分子表达,体外扩增人外周血单个核细胞中的γδT细胞,乳酸脱氢酶释放法检测γδT细胞对过表达h MSH2的NCI-H520细胞的杀伤效率。结果获得h MSH2编码序列(2 805 bp),构建Fugw-h MSH2重组载体,酶切鉴定结果与预期目的条带大小相符;h MSH2-EGFP融合蛋白在NCI-H520细胞中得到表达,过表达h MSH2的NCI-H520细胞表面的h MSH2分子水平显著升高(P<0.001);γδT细胞对过表达h MSH2的NCI-H520细胞的杀伤效率较野生型NCI-H520细胞显著升高(P<0.05)。结论成功构建h MSH2分子过表达的肺癌细胞模型;细胞膜上表达水平上调的h MSH2分子增强了γδT细胞对肺癌细胞的细胞毒作用。

血清超敏C反应蛋白、转铁蛋白、补体C3和C4在儿童全身炎性反应综合征中的临床价值

目的 探讨全身炎性反应综合征（SIRS）患儿血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）、转铁蛋白（TRf）和补体C3、C4水平的变化及意义.方法 2012年7月至2013年6月本院PICU、NICU和急诊综合病区符合SIRS诊断的患儿93例（SIRS组）,对照组为年龄、性别与患儿相匹配的健康体检儿童65例,测定两组儿童血清中hs-CRP、TRf、补体C3和C4的水平.对93例患儿进行SIRS评分,根据评分分成A组（SIRS 2分）37例、B组（SIRS 3分）32例、C组（SIRS 4分）24例,比较3组血清中hs-CRP、TRf、补体C3和C4的水平并统计病死率,与SIRS评分进行相关分析.结果 SIRS组患儿血清hs-CRP水平高于对照组[（33.85±17.76）mg/L比（2.34±1.54） mg/L,P＜0.05].SIRS组血清TRf、补体C3和C4的水平均低于对照组[血清TRf：（1.26±0.48）g/L比（2.81±0.57）g/L,补体C3：（0.48±0.19）g/L比（1.14±0.21）g/L,补体C4：（0.19±0.09）g/L比（0.39±0.10）g/L,均P＜0.05].SIRS患儿血清hs-CRP水平随SIRS评分升高而升高,呈正相关（r=0.863,P＜0.05）,血清TRf、补体C3和C4的水平则随SIRS评分的升高而降低,呈负相关（r=-0.834、-0.715、-0.691,均P＜0.05）.病死率也随SIRS评分的升高而逐渐升高,呈正相关（r=1.00,P＜0.05）.结论 血清中hs-CRP、TRf、补体C3和C4的水平对评估SIRS患儿的病情和预后有重要意义.

孕24～28周GDM孕妇部分急性时相反应蛋白和胰岛素功能的研究

目的：研究妊娠妇女部分急性时相反应蛋白与妊娠期糖尿病的相关性。方法：采用病例对照研究方法，按年龄、孕周、BMI等匹配妊娠期糖尿病患者（GDM）36例和健康妊娠妇女（HPW）44例，分析其孕24～28周血浆超敏c反应蛋白（hs—CRP）、铜蓝蛋白（CER）、转铁蛋白（TRF）和胰岛素功能的差异。结果：与健康孕妇组相比，GDM孕妇组空腹血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数和hs—CRP均显著升高（P〈0．01）；hs—CRP与胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）呈正相关（r=0．372，P=0．002）。而CER和TRF与胰岛素功能无显著相关性。结论：GDM孕妇血浆hs—CRP升高与胰岛素功能下降呈显著相关，提示血浆hs—CRP可能与妊娠期糖尿病的发生发展有关。

妊娠期高血压疾病循环补体预测标志物的筛选与初步验证

目的:基于妊娠期高血压和蛋白尿发生的报道寻找预测妊娠期高血压疾病(HDP)的循环补体相关蛋白,探讨补体系统在HDP发生发展中的作用。方法:采用巢式病例对照研究,收集2014年11月至2017年3月于广州市妇女儿童医疗中心产检并分娩的孕妇孕20周前血清,共纳入60例HDP和60例正常孕妇,按年龄和孕周1∶1配对。采用非标记蛋白质谱方法筛选12对血清标本中差异表达的补体蛋白,余48对用于初步验证。当差异倍数(FC)>1.2或<0.8,且P<0.05时入选。用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评价相应因子的预测价值。结果:高血压孕妇血清补体C1亚单位(C1s)、C8 beta链(C8β)、C1抑制剂(C1-INH)的FC分别为1.19、1.23、0.73(t=2.07,2.06,-3.40;P均<0.05);子痫前期(PE)孕妇C1s、C8β、C1-INH、H因子相关蛋白5(CFHR5)、丛生蛋白(CLU)、C反应蛋白(CRP)的FC分别为1.39、1.50、0.72、2.49、4.38和1.82(t=4.36,5.61,-3.70,6.82,8.70,7.27;P均<0.05)。C1s、C8β和C1-INH联合对HDP的AUC值为0.89。CFHR5、CLU和CRP对PE的AUC值分别为0.88、0.92和0.91。结论:HDP发生前,孕妇体内已出现补体经典途径和旁路途径的激活及调节紊乱。补体C1s、C8β、C1-INH联合检测有望用于HDP的预测,CFHR5、CLU、CRP可能是肾脏损伤性HDP的潜在预测分子标志。

孕20周前孕妇血浆中色素上皮衍生因子表达变化与子痫前期关联性研究

目的探讨孕20周前孕妇血浆中色素上皮衍生因子蛋白表达水平与子痫前期的关系。方法采用前瞻性巣式病例对照研究方法。选取在广州市妇女儿童医疗中心产科20周前的单胎子痫前期孕妇68例,分为子痫前期轻度组34例,子痫前期重度组34例;以同期分娩的健康妊娠孕妇68例作为对照组。采用ELISA法分析孕20周前色素上皮衍生因子(PEDF)的表达水平,同时结合临床风险因素分析PEDF对子痫前期的临床预测价值。结果子痫前期轻度组、子痫前期重度组、对照组血浆中PEDF的表达量分别为:(12.02±3.34)μg/ml、(12.42±4.34)μg/ml,(10.21±2.88)μg/ml,子痫前期轻度组及重度组PEDF的表达量显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);子痫前期轻度组与重度组PEDF表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。回归分析:子痫前期组中孕妇的PEDF、孕前BMI、贫血可作为预测子痫前期的综合指标。结论子痫前期孕妇孕20周前血浆中PEDF蛋白高表达,提示PEDF可能与子痫前期的发生相关;PEDF结合孕前BMI、贫血等临床风险因素对子痫前期的预测诊断有更高的价值。

居住地平均气温与上呼吸道感染患儿SAA检测阳性率的相关性

目的分析居住地平均气温变化与1~6岁上呼吸道感染患儿血清淀粉样蛋白A(SAA)检测阳性率的相关性。方法2016年1月-2019年12月自广州市气象局收集广州市日均温度信息。收集同年在广州市妇女儿童医疗中心确诊的上呼吸道感染患儿信息,并计算每天患儿SAA检测阳性率。利用分布滞后非线性模型来分析平均气温与患儿SAA检测阳性率的相关性。结果SAA检测阳性率在1~<4岁和4~6岁两个年龄段患儿中的差异有统计学意义(χ~2=174.89,P<0.001)。SAA检测阳性率与当天温度呈负相关(r=-0.36,P<0.05)。气温在5~15℃时,1~<4岁上感患儿SAA检测阳性率有升高风险(RR>1,滞后5~14 d);5~10℃时,4~6岁上感患儿SAA检测阳性率有升高风险(RR>1,滞后0~10 d)。而平均温度在20~25℃之间时,上感患儿SAA检测阳性率降低。结论居住地日均气温可影响上呼吸道感染SAA阳性率,平均气温<15℃时,上感患儿SAA检测阳性率增高,低气温季节病毒易于传播,应做好儿童呼吸道感染的防御。