氢质子磁共振频谱活体检测结肠癌耐药性的初步探讨

目的探索1H-MRS活体检测结肠癌耐药性的可能性。方法 5只耐药(耐5-FU)与5只不耐药人类结肠癌SW480荷瘤裸鼠于肿瘤直径大于1.5cm时行1H-MRS检查,随后处死荷瘤鼠,切下肿瘤检测其PKC、P-gp、MRP1蛋白表达(Western Blot),观察肿瘤凋亡(TUNNEL法)。分析结肠癌耐药性与1H-MRS检测代谢物、肿瘤耐药基因表达、肿瘤凋亡的相关性。结果不耐药组人类结肠癌SW480裸鼠肿瘤的cho、lac、Lip及m I峰/cr面积比较耐药组人类结肠癌SW480/5-FU裸鼠增加,差别有统计学差异(P<0.05)。耐药组PKC、P-gp、MRP1蛋白表达明显高于不耐药组,差别有统计学差异(P<0.05)。在TUNNEL检测切片上,两组肿瘤组织均可见肿瘤细胞凋亡,两者差别无统计意义(P>0.05)。肿瘤代谢物cho、Lac、Lip、m I/cr与肿瘤耐药性呈正相关性;cho面积与肿瘤PKC表达光密度呈正相关,与肿瘤Pgp表达光密度呈正相关。结论肿瘤代谢物cho、lac、Lip的改变有可能有助于利用1H-MRS活体检测结肠癌耐药性改变。

体素内不相干运动成像在体检测人类结肠癌SW480裸鼠耐药性

目的探讨体素内不相干运动(IVIM)成像活体评价人类结肠癌SW480裸鼠耐药性及其可行性。方法对耐药组(n=5)和不耐药组(n=5)人类结肠癌SW480荷瘤裸鼠于肿瘤最长径大于1.50 cm后分别行IVIM DWI检查,测量肿瘤真扩散系数(D)、假扩散系数(D~*)及灌注分数(f)。处死荷瘤鼠,检测肿瘤坏死(HE染色)、凋亡(TUNEL法)及P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、蛋白激酶C(PKC)蛋白表达(Western Blot),对IVIM参数和肿瘤蛋白表达情况进行相关分析。结果不耐药组D较耐药组增高(P<0.05),2组D~*和f差异无统计学意义(P均>0.05)。2组肿瘤组织坏死区域范围相似;耐药组细胞核较不耐药组增大,且细胞间排列更紧密,细胞密度较大。2组肿瘤细胞凋亡指数差异无统计学意义(P>0.05)。耐药组PKC、P-gp、MRP1蛋白表达均较不耐药组增加(P均<0.05)。肿瘤D值与P-gp、MRP1、PKC表达均呈负相关(P均<0.05)。结论 IVIM成像参数D值可能成为评估小鼠人类结肠癌SW480耐药性的指标。

轻度认知障碍额叶白质1H-MRS与认知功能的相关性

目的探索氢质子磁共振波谱(1H-magnetic resonance spectroscopy,1H-MRS)在轻度认知障碍(mild cognitive impairment,MCI)患者中双侧额叶白质代谢物变化及其应用价值。材料与方法前瞻性收集社区招募并经过筛选的174名志愿者,经过神经心理学量表评估后分为MCI组及正常对照组(normal control,NC)。同时对其双侧额叶白质进行单体素1H-MRS扫描,利用LCModel软件自动计算双侧额叶白质主要代谢物的相对浓度。结合协方差分析、独立样本t检验及非参数曼-惠特尼U检验以比较两组间代谢物相对浓度差异,使用Pearson及Spearman相关分析法探索代谢物相对浓度与量表评分的相关性。结果老年受试者(≥60岁)MCI组左侧额叶白质谷氨酸及谷氨酰胺相对浓度较NC组增加(1.77±0.08、1.48±0.08;Z=2.640,P<0.05)。针对MCI组受试者量表得分进行分析,发现听觉词汇学习测验长延时记忆及再认得分与右侧额叶白质N-乙酰天门冬氨酸+N-乙酰天门冬氨酸谷氨酸(N-acetylaspartate and N-acetylaspartylglutamate,NAA+NAAG)呈负相关(r=-0.241、-0.342,P均<0.05);形状连线测试(shape trails test,STT)-A完成时间与左侧额叶白质NAA+NAAG呈负相关(r=-0.235,P=0.044);STT-A及STT-B完成时间均与右侧额叶白质肌醇呈正相关(r=0.379、0.398,P均<0.05)。结论1H-MRS代谢物改变有望作为临床上早期诊断MCI的参考依据。

腺病毒介导的p53逆转结肠癌对5-FU耐药性的实验研究

目的活体探讨腺病毒介导的p53逆转结肠癌对5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的可能性及其机制。方法对5-FU耐药的人类结肠癌SW480/5-FU荷瘤裸鼠随机分成4组:对照组、5-FU治疗组、r Ad/p53治疗组和r Ad/p53+5-FU治疗组,各25只。各组于治疗后24 h、48 h、72 h、120 h、168 h分别随机取5只荷瘤鼠,腹腔注射过量水合氯醛处死,即切下肿瘤检测肿瘤组织的癌细胞凋亡和肿瘤的p53、PKC、P-gp、MRP1蛋白表达。用方差分析与SNK检验比较各组的癌细胞凋亡、各蛋白表达量,用Pearson相关检验分析各观察指标的相关性。结果 5-FU组不同时间点裸鼠肿瘤细胞凋亡范围、p53蛋白表达、PKC、P-gp、MRP1蛋白表达与对照组差别没统计意义(P>0.05)。r Ad/p53+5-FU组细胞凋亡(0.33±0.03~0.62±0.07)明显高于对照组(0.24±0.04~0.29±0.02)、5-FU组(0.27±0.03~0.31±0.02)与r Ad/p53组(0.29±0.02~0.46±0.06)(P<0.05);r Ad/p53组肿瘤凋亡范围明显高于对照组(P<0.05),48 h以后明显高于5-FU组(P<0.05)。r Ad/p53和r Ad/p53+5-FU组随时间增加p53蛋白表达明显逐渐增加,120 h达峰值表达,明显高于对照组(P<0.05),Ad/p53+5-FU组p53蛋白表达明显高于r Ad/p53(P<0.05)。r Ad/p53+5-FU组在不同观察时间点PKC、P-gp、MRP1蛋白表达量呈逐渐降低趋势,P-gp、MRP1的表达在各时间点明显低于对照组、5-FU组(P<0.05);48 h后PKC表达明显低于对照组、5-FU组、r Ad/p53组(P<0.05)。r Ad/p53组治疗48 h后,P-gp、MRP1的表达量明显低于对照组、5-FU组(P<0.05);120 h后PKC表达明显低于对照组、5-FU组(P<0.05)。结论 r Ad/p53携带的外源野生型p53基因能降低活体耐药的结肠癌细胞的PKC、P-gp、MRP1等耐药基因蛋白表达,同时促进癌细胞凋亡而逆转癌细胞对5-FU的抗性;5-FU也可增加外源野生型p53的表达产生两者的协同抗癌作用。