广州地区HIV/AIDS合并肺部感染病原谱分析

目的探讨广州地区人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)合并肺部感染患者的病原体分布特征,为临床诊断提供依据。方法收集121例HIV/AIDS肺部感染患者,经纤维支气管镜取肺泡灌洗液(BALF)标本涂片、培养,取肺组织(TBB)标本进行病理学检测,阳性标本进行回顾性分析。结果共检出细菌71例(41.8%),分支杆菌19例(11.2%),真菌54例(31.8%),耶氏肺孢子菌21例(12.4%),巨细胞病毒5例(2.9%)。细菌中以革兰阳性菌为主,分支杆菌中以结核分枝杆菌为主,真菌以马尔尼菲青霉菌为主。肺部单一病原感染23例(25.3%),多重感染68例(74.7%),多重感染主要发生在CD4+T淋巴细胞计数(CD4)≤200/μl患者中。结论广州地区HIV/AIDS患者肺部感染病原体主要为细菌和真菌,细菌以革兰阳性菌为主,条件致病菌居多,真菌以马尔尼菲青霉菌最为常见。CD4≤200/μl患者肺部多重病原感染现象严重。

登革热发生中单核细胞CD14^+CD16^+亚群的增殖变化及病情与病毒载量的关系

【目的】观察登革病毒感染时单核细胞及其亚群随临床病程的变化,探讨单核细胞在登革病毒感染中的免疫学作用。【方法】收集76例住院登革热患者急性期和极期血样品,其中轻症44例,重症32例。采用荧光定量RT-PCR法检测登革病毒载量,同时采用多色流式细胞技术分析外周血单个核细胞中的单核细胞(CD14^+)表面CD16分子表达。比较单核细胞及各亚群(CD14^+CD16-,CD14^+CD16^+,CD14dim CD16^-及CD14^(dim) CD16^+亚群)在轻症登革热和重症登革热中随临床病程的变化。【结果】轻症和重症组中单核细胞比率明显增加(P<0.01)。从病程第3-4天就可观察到单核细胞的增殖,可持续至第11天。登革热轻症和重症病例均表现为伴随着CD14^+CD16-亚群减少,CD14^+CD16^+亚群增加。从病程上看,轻症组中CD14^+CD16^+亚群呈逐渐下降趋势,而重症组在病程的第5-7天有一个明显的波动,从第6天的低点有明显的上升趋势。进一步分析CD14^+CD16^+亚群与病毒载量的关系,发现重症病例中CD14^+CD16^+亚群比率在高病毒载量组增加(P=0.016),而在轻症病例中高病毒和低病毒载量组CD14^+CD16^+亚群比率无明显差异。【结论】登革病毒感染可诱导机体单核细胞的增殖及上调CD16表达。CD14^+CD16^+亚群作为促炎症细胞可能在重症登革热发生中起一定作用。

广州地区HIV/AIDS患者合并感染非结核分枝杆菌的耐药分析

目的研究广州地区未经治疗的HIV/AIDS患者合并感染非结核分枝杆菌（NTM）原发表型耐药特征,为HIV/AIDS合并NTM病的临床治疗提供重要依据。方法经hsp65、16S-r DNA、16S-23S-r DNA ITS多基因测序的方法对2008~2013年期间分离自HIV/AIDS患者的147株分枝杆菌进行菌种鉴定,对鉴定为NTM的菌株,采用以罗氏培养基为基础的比例法,对于目前临床应用的一线和二线抗结核药物进行药物敏感性试验。结果 147株HIV/AIDS患者感染分枝杆菌中,鉴定为NTM的57株（38.8%）,其中鸟分枝杆菌15株（26.3%）,鸟分枝杆菌复合群10株（17.5%）,堪萨斯分枝杆菌7株（12.3%）。选取其中未混合感染的38株NTM进行药敏试验,结果显示：NTM对对氨基水杨酸异烟肼（力克肺疾,Pa）耐药率最高,为94.7%,其他依次为阿米卡星（86.8%）、链霉素（84.2%）、异烟肼（81.6%）、左氧氟沙星（68.4%）、克拉霉素（68.4%）、利福平（65.8%）、莫西沙星（39.5%）,而对丙硫异烟胺、乙胺丁醇、利福布汀较为敏感,敏感率依次为94.7%、84.2%、76.3%。结论广州地区HIV/AIDS患者合并感染NTM以鸟分枝杆菌和鸟分枝杆菌复合群为主。NTM对常用抗结核药原发耐药率较高,而丙硫异烟胺、乙胺丁醇、利福布汀对NTM有较好的抑菌效果。

广州地区艾滋病患者合并感染分枝杆菌菌种的分布特征

目的探讨广州地区艾滋病患者合并感染分枝杆菌菌种的分布特征。方法选择艾滋病合并分枝杆菌感染患者133例，非艾滋病合并分枝杆菌感染患者150例。提取分枝杆菌基因组DNA，用多基因测序分析的方法鉴定菌株。比较艾滋病患者与非艾滋病患者感染分枝杆菌的菌种分布，分析艾滋病患者CD4^＋T淋巴细胞水平与分枝杆菌菌种分布特点。计数资料的比较采用x^2检验。结果在艾滋病患者感染的133株分枝杆菌中，结核分枝杆菌复合群82株，非结核分枝杆菌51株；非结核分枝杆菌以鸟分枝杆菌复合群为主有31株。非艾滋病患者感染150株分枝杆菌中，结核分枝杆菌复合群126株，非结核分枝杆菌24株；非结核分枝杆菌以脓肿分枝杆菌为主（9株）。艾滋病患者CD4^＋T淋巴细胞计数≤100／μL时，分枝杆菌的检出率为75．94％（101／133），鸟分枝杆菌复合群的检出率为93．55％（29／31），其他非结核分枝杆菌的检出率为85．OO％（17／20）；CD4^＋T淋巴细胞计数〉100／μL时，各菌种的检出率均明显下降。结论广州地区艾滋病患者感染非结核分枝杆菌显著高于非艾滋病患者，且分别以鸟分枝杆菌复合群为主和以脓肿分枝杆菌为主。艾滋病患者CD4^＋T淋巴细胞计数越低，分枝杆菌感染率越高。

治疗前血浆和全血干血斑样品HIV-1 Pol区基因型耐药检测结果比较

目的比较治疗前静脉血浆和全血干血斑(DBS)人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)Pol区基因型耐药检测结果的差异,并分析DBS样品用于HIV-1基因型耐药检测的可行性。方法采集44例HIV-1感染者治疗前静脉全血,分别制备全血DBS样品和血浆样品,提取RNA,检测病毒载量。采用逆转录PCR(RT-PCR)扩增Pol区基因序列,对PCR产物进行Sanger测序,采用Sequencher 5.4.5软件对序列进行清理和拼接,采用BioEdit 7.2软件对参考株序列和样品序列进行比对、系统进化树分析及基因型耐药分析。结果治疗前44例血浆样品检出率100.0%,DBS样品检出30例,检出率为68.2%;24例血浆样品平均病毒载量达到5.02×10^(5)IU/mL,中位数为1.76×10^(5)IU/mL,DBS样品平均病毒载量为1.46×10^(3)IU/mL,中位数为7.95×10^(2)IU/mL;44例患者HIV-1亚型主要为流行重组株(CRF)07-BC(24/44)、CRF01-AE(16/44);血浆和DBS样品序列相似值100%26例(26/30),相似值99%3例(3/30),相似值97%1例(1/30),其中有6例发生不同程度的耐药突变,DBS样品耐药结果与血浆符合率100%,但在其他位点的突变存在差异。结论治疗前全血DBS样品耐药结果及序列与血浆样品具有高度的一致性,全血DBS样品可用于耐药性检测、HIV-1亚型分析,但检出率比血浆低。

HIV/HBV合并感染者HBV核心区与多聚合酶区特异性细胞毒性T细胞表位变异分析

目的比较人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)/乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)合并感染者与HBV单一感染者外周血HBV核心(core,C)蛋白和多聚合酶(polymerase,P)蛋白的特异性细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位变异的差异,探讨HIV/HBV合并感染者肝病进程加快的可能致病机制。方法收集慢性HBV感染者的基本检查结果和血标本,并依据抗病毒前HIV抗体检测结果,分为HIV/HBV合并感染组和HBV单一感染组。提取HBV DNA,巢式PCR法扩增HBV C基因与P基因并送PCR产物测序,ContigExpress软件进行序列拼接,Vector NTI软件进行序列比对,参照相应基因型标准序列,分析2组患者的HBV CTL表位变异差异。结果成功扩增的HBV C基因与P基因的患者共151例,其中HIV/HBV合并感染者83例,HBV单一感染者68例。HIV/HBV合并感染组较HBV单一感染组CTL表位变异发生率均偏高,其中C18-27、C88-96、C139-148表位变异发生率差异比较有统计学意义(χ^2=7.509,P=0.006;χ^2=3.902,P=0.048;χ^2=4.238,P=0.040)。HIV/HBV合并感染组的C18-27表位主要变异氨基酸的类型增多,出现新的S26N(4.8%)、S26T(4.8%)变异类型,而C88-96、C139-148表位主要变异氨基酸相同(L95I、T147A)。结论HIV/HBV合并感染可增加HBV C蛋白和P蛋白的CTL表位变异,尤其是C18-27、C88-96、C139-148表位变异。C蛋白CTL表位变异增多可能与HIV/HBV合并感染肝病进程加快的致病机制相关。

机会性致病真菌耐药机制的研究进展

随着免疫缺陷疾病的增多及器官移植等医疗技术的发展，机会性致病真菌感染的发病率和死亡率日渐升高。同时，由于临床上抗真菌药物的不规范使用，机会性真菌的耐药问题日渐凸显。近年来对机会性真菌耐药机制的研究成为热点，其中包括药物外排的增加、药物作用靶点的改变、生物被膜的形成等，本文对以上内容进行综述。

温阳药对免疫及其艾滋病的治疗机制研究

艾滋病是危害人类健康的重大传染病，目前己成为全球第4位致死疾病。国家卫生部公布疫情显示，自2008年以来艾滋病死亡病例己连续多年位居我国传染病死亡榜首。艾滋病是涉及多器官、系统的慢性传染病，中药治疗艾滋病可阶段性提高、稳定免疫功能，

广东省不同亚型AIDS病人HIV-1 gp120 V3环基因变异及其利用辅助受体的情况

目的了解广东省艾滋病病毒（HIV）主要流行亚型及V3环氨基酸的变异特点,并分析病毒株利用辅助受体的情况。方法收集2013-2014年期间,在广州市第八人民医院住院的艾滋病（AIDS）病人的血浆256份,巢式聚合酶链反应（Nested-PCR）方法扩增env基因C2-C3（HBX2：6972~7365）区并直接测序,用Geen tool软件将基因序列翻译为氨基酸序列进行比对和分析。结果共有214例（83.6%）扩增成功,其中143例（66.8%）为CRF01_AE;45例（21.0%）为B/C重组型;26例（12.1%）为CRF01_AE/B亚型。V3环顶端四肽基序,73.4%（157/214）为GPGQ,11.7%（25/214）为GPGR,8.9%（19/214）为GPGK,2.3%（5/214）为GQGQ,其他为（GPGG、GLGH、GPGS、GPGH）3.7%（8/214）。使用国际上普遍应用的4种软件（PSSMx4r5、SAAC＋BLAS、PSSMsisi、Geno2pheno）分别对V3环顶端四肽基序利用辅助受体的情况进行评估。综合评估结果显示,132例（61.7%）利用CCR5,67例（31.3%）利用CXCR4。在15例（7.0%）无辅助受体评估结果的病例中,14例为CRF01_AE,1例为CRF01_AE/B。研究还发现,71.1%（32/45）B/C重组型的V3四肽基序单一使用PSSMsisi软件的评估结果,与4种软件综合评估结果的一致率为100%。结论目前广东省HIV-1的主要流行株仍是CRF01_AE,其V3环氨基酸高度变异,顶端四肽基序主要是GPGQ。对毒株利用辅助受体的情况,宜采取国际普遍使用的4种软件进行综合分析。

丙型肝炎病毒感染对艾滋病患者高效抗逆转录病毒治疗中血浆白细胞介素18水平及免疫重建的影响

目的初步探讨HCV感染对艾滋病患者HAART过程中血浆IL-18水平及免疫重建的影响。方法以61例未经治疗的艾滋病患者为研究对象（CD4T细胞计数〈200cells／μL），其中31例为HIV单一感染，30例为HIV与HCV合并感染，随访至HAART96周，以43例未经治疗的HCV单一感染者和20例健康志愿者作对照；采集患者HAART前及后4、12、24、48、72、96周外周静脉血；检测血浆中HIVRNA水平、IL-18的表达量以及CD4＋和CD8叮细胞计数。结果HAART前，HIV感染者、HCV感染者和HIV／HCV合并感染者血浆IL-18水平的中位数分别为574．66、33．77和922．7pg／mL，均高于健康对照组（Z=-5．614、-2．274和-5．709，P均〈0．05），且合并感染者高于HIV和HCV单一感染者（Z=-3．232和-6．989，P〈0，01）。HAART开始后，HIV单一感染与HIV／HCV合并感染组的IL—18水平均随治疗明显下降趋势（矿自女=18．429和15．314，P均（0．OS），合并感染组IL-18水平在各时间节点的中位数分别为689．75、690．25、615．45、625．22、605．65和532．83pg／mL，均高于HIV单一感染组（Z=-2．190，-4．435，-3．413，-2．335，-3．000，-3．502，P〈0．05）；随着HAART的进行，HIV／HCV合并感染组与HIV单一感染组的CD4＋细胞计数及CD4＋／CD8＋比值均呈上升趋势（Z=51．903和69．485，P均〈0．01）；HAART治疗12和96周时，HIV单一感染组CD4＋T细胞计数中位数分别为233．50和334．00个／μL，高于合并感染组（Z=-1．966和-3．519，P〈O．05）；在HAART治疗48和72周时，HIV单一感染组CD4＋／CD8＋比值分别为0．24和0．31，高于HlV／HCV合并感染组（Z=-2．220和-2．143，P均〈O．05）。队列分析显示，除在HAART治疗24周后HIV单一感染组CD4＋／CD8＋比值与IL-18水平呈弱负相关外，未见IL．18与CD4＋／CD8＋比值及CD4叮细胞数有相关性。结论HCV合并感染上调了艾滋病患者HAART前及治疗过程中的血浆IL-18水平，延缓了免疫重建进程，但HCV可能并不是通过上调IL．18水平来延缓免疫重建进程。

HIV和HCV合并感染对患者外周血中A3GmRNA及干扰素α表达的影响

目的：研究HIV和HCV（HIV／HCV）感染对患者外周血单个核细胞（PBMC）中A3G mRNA表达及外周血中内源性干扰素（ IFN）-α水平的影响。方法以未经抗病毒治疗的慢性丙型肝炎患者（ HCV单一感染组，43例）、艾滋病患者（ HIV单一感染组， CD4＋T 淋巴细胞＜200个／μL，45例）和HIV／HCV合并感染组（ CD4^＋T淋巴细胞＜200个／μL，45例）为研究对象，并以23名我院门诊健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测A3G mRNA，酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测血浆中内源性IFN-α的表达量。组间比较采用秩和检验，相关性分析用Spearman秩相关分析。结果 HIV单一感染组、HIV／HCV合并感染组、HCV单一感染组和健康对照组PBMC中A3G mRNA的表达量分别为4.89（0.59），4.85（0.71），3.89（1.08）和3.69（0.81）lg拷贝／mL。其中，HIV单一感染组和HIV／HCV合并感染组PBMC中A3G mRNA的表达量均明显高于健康对照组（ Z＝－6.306和－6.280，P＜0.01）和HCV单一感染组（Z＝－7.358和－7.275，P＜0.01）。 HIV单一感染组、HIV／HCV合并感染组、HCV单一感染组和健康对照组血浆中 IFN-α表达量分别为2.79（1.25），2.05（1.29），2.32（1.84）和2.16（2.19） pg／mL，其中 HIV 单一感染组血浆中 IFN-α表达量稍高于HIV／HCV合并感染组（Z＝－2.332，P＜0.05），其他各组血浆中IFN-α表达量比较差异均无统计学意义（P值均＞0.05）。血浆中 IFN-α水平与 A3G mRNA 表达水平未见明显相关性（rs ＝0.04，P ＞0.05），A3G mRNA 及 IFN-α表达量与HIV 及 HCV RNA 载量亦无明显相关性（P 值均＞0.05）。结论 HIV感染者PBMC高表达A3G，合并HCV感染对艾滋病患者的A3G表达无明显影响；A3G mRNA与IFN-α无明显相关性，且对HIV、HCV RNA载量的影响并不明显。