PPAR-β/δ及其激动剂L165041对小鼠肝脏成瘤的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferation activated receptor,PPAR-β/δ)及其激动剂L165041对小鼠肝脏成瘤的影响。方法将雄性PPAR-β/δ基因敲除小鼠随机分为实验组1、2,将雄性野生型小鼠随机分为对照组1、2,用二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)造肝癌模型,并给予实验组1及对照组1以PPAR-β/δ激动剂L165041的干预处理,8个月后观察小鼠肝脏肿瘤生长情况。结果实验组1患肝癌的比率为76.9%(10/13);实验组2患肝癌的比率为87.5%(7/8);对照组1患肝癌的比率为11.1%(1/9);对照组2患肝癌的比率为25.0%(2/8),对照组1和对照组2的总体患癌率低于实验组1和实验组2(P<0.05),实验组1与实验组2、对照组1与对照组2总体患癌率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PPARβ/δ具有预防小鼠肝脏成瘤的作用,L165041在本实验中的作用未体现出来。

siRNA抑制survivin基因及其对人肝癌细胞株HepG2细胞凋亡的影响

目的观察特异小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制survivin基因表达对人肝癌细胞株HepG2细胞凋亡的影响。方法构建survivin-siRNA真核表达载体,利用脂质体转染人肝癌HepG2细胞,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测survivin基因mRNA表达水平。针对转染后不同的时间点采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞的增殖以及HepG2细胞的凋亡情况。结果构建的survivin-siRNA转染组survivin蛋白表达较对照组明显下调,差异有显著性(P<0.01),其增殖能力较对照组显著下降(P<0.001);而阳性对照组及未转染组对survivin表达及mRNA抑制作用不明显(P=0.219)。结论所构建的针对人survivin-siRNA可显著抑制survivin的表达及HepG2细胞凋亡。

过氧化物酶体增殖物活化受体-α启动子区甲基化:诱导肝内脂滴形成及加快非酒精性脂肪性肝病进程

目的探讨过氧化物酶体增殖物活化受体-α(PPAR-α)甲基化与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的相关性。方法收集15例NAFLD患者肝脏组织及11例正常对照组肝脏组织,HE染色明确病理分型,RT-PCR、Western blotting分别检测PPAR-αmRNA及蛋白的表达水平,选取其中的10对行焦磷酸测序检测PPAR-α启动子区甲基化水平。结果与对照组比较,NAFLD组肝脏组织可见明显脂肪沉积,PPAR-αmRNA及蛋白表达均降低(P<0.05),PPAR-α启动子区甲基化水平升高(P=0.025),启动子区甲基化发生率与PPAR-α蛋白表达量呈负相关(r=-0.878,P=0.009)。结论正常人肝脏发生脂肪变时,不仅有肝细胞内脂肪沉积,且伴有PPAR-α表达降低,降低原因之一是该基因启动子区发生甲基化,从而加快NAFLD的进程。