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桥粒斑蛋白在肺动脉高压中对血管肺动脉平滑肌的功能研究
1
作者
吴雪芬
江倩
+3 位作者
罗晓韵
王健
卢文菊
张晨婷
《国际呼吸杂志》
2022年第23期1809-1817,共9页
目的探究桥粒斑蛋白(DSP)在肺动脉高压(PH)大鼠模型与人肺动脉平滑肌细胞(hPASMCs)的表达变化及其在PH发生、发展中的作用。方法24只SPF级别雄性SD大鼠运用随机数字表法随机分为正常对照(NC)组、野百合碱(MCT)组、低氧(HYP)组及低氧联合...
目的探究桥粒斑蛋白(DSP)在肺动脉高压(PH)大鼠模型与人肺动脉平滑肌细胞(hPASMCs)的表达变化及其在PH发生、发展中的作用。方法24只SPF级别雄性SD大鼠运用随机数字表法随机分为正常对照(NC)组、野百合碱(MCT)组、低氧(HYP)组及低氧联合Sugen5416(SuHx)组,检测各组大鼠右心室收缩压(RVSP)及右心室肥厚指数(RVHI),观察各组大鼠血管增厚程度;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠中肺组织中DSP的表达情况。体外培养hPASMCs,分别用转化生长因子β1(TGF-β1)或HYP处理细胞24、48、72 h,Western blot检测各组细胞中DSP表达情况。采用小分子siRNA DSP干扰序列及阴性对照序列分别转染hPASMCs,分为DSP干扰(siDSP)组及阴性对照(siNT)组。2组均进行TGF-β1、CoCl2或HYP处理48 h,Western blot检测增殖分化及凋亡相关蛋白[p-p38、增殖相关蛋白(PCNA)、抗凋亡蛋白(Bcl2)、促凋亡蛋白(Bax)]的表达情况,划痕实验检测细胞的迁移能力变化,EdU细胞增殖流式检测细胞增殖能力变化。结果MCT组、HYP组、SuHx组DSP表达量[(3.10±0.59)、(4.34±0.75)、(3.84±0.13)]较NC组(1.00±0.19)升高,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。TGF-β124 h组、HYP 72 h组hPASMCs的DSP蛋白表达分别较TGF-β10 h组及HYP 0 h组升高[(4.42±0.35)比(1.00±0.07)、(2.62±0.32)比(1.00±0.21)],差异均有统计学意义(P值均<0.01)。siDSP+TGF-β1组、siDSP+CoCl2组、siDSP+HYP组中hPASMCs的p-p38表达量较siNT+TGF-β1组、siNT+CoCl2组、siNT+HYP组升高[(2.14±0.20)比(1.00±0.14)、(1.66±0.09)比(1.00±0.12)、(3.03±0.22)比(1.00±0.50)],差异均有统计学意义(P值均<0.05)。siDSP+HYP组中hPASMCs的PCNA表达量较siNT+HYP组下降[(0.55±0.04)比(1.00±0.04)],差异有统计学意义(P值<0.05)。siDSP+TGF-β1组、siDSP+CoCl2组、siDSP+HYP组中hPASMCs的Bcl2/Bax比值较siNT+TGF-β1组、siNT+CoCl2组、siNT+HYP组下降[(0.85±0.06)比(1.00±0.04)、(0.73±0.08)比(1.00±0.07)、(0.72±0.01)比(1.00±0.05)],差异均有统计学意义(P值均<0.05)。siDSP+TGF-β1组hPASMCs的细胞迁移率较siNT+TGF-β1组减少[(27.56±2.44)%比(58.05±2.25)%],差异有统计学意义(t=9.20,P<0.001);siDSP+CoCl2组hPASMCs的细胞迁移率较siNT CoCl2组减少[(25.78±2.55)%比(47.30±2.10)%],差异有统计学意义(t=6.53,P<0.001)。siDSP+TGF-β1组hPASMCs的细胞增殖率较siNT+TGF-β1组减少[(6.07±0.23)%比(10.62±0.50)%],差异有统计学意义(t=8.29,P=0.001);siDSP+HYP组hPASMCs的细胞增殖率较siNT+HYP组减少[(2.84±0.46)%比(5.56±0.46)%],差异有统计学意义(t=4.17,P=0.014)。结论DSP能够促进hPASMCs的增殖和迁移,促进肺血管的重构,在PH的发生、发展起重要作用。
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关键词
肺动脉高压
转化生长因子Β1
桥粒斑蛋白
肺动脉平滑肌细胞
原文传递
题名
桥粒斑蛋白在肺动脉高压中对血管肺动脉平滑肌的功能研究
1
作者
吴雪芬
江倩
罗晓韵
王健
卢文菊
张晨婷
机构
广州医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科、广州呼吸健康研究院、国家呼吸系统疾病临床医学研究中心、国家呼吸医学中心、呼吸疾病国家重点实验室
出处
《国际呼吸杂志》
2022年第23期1809-1817,共9页
基金
广东省基础与应用基础研究基金(2022A1515012564)
广州市科技计划基础与应用基础研究项目(202201020410、202201020538、202102020019)
呼吸疾病国家重点实验室与港澳呼吸系统传染病联合实验室自主课题(GHMJLRID-Z-202120)。
文摘
目的探究桥粒斑蛋白(DSP)在肺动脉高压(PH)大鼠模型与人肺动脉平滑肌细胞(hPASMCs)的表达变化及其在PH发生、发展中的作用。方法24只SPF级别雄性SD大鼠运用随机数字表法随机分为正常对照(NC)组、野百合碱(MCT)组、低氧(HYP)组及低氧联合Sugen5416(SuHx)组,检测各组大鼠右心室收缩压(RVSP)及右心室肥厚指数(RVHI),观察各组大鼠血管增厚程度;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠中肺组织中DSP的表达情况。体外培养hPASMCs,分别用转化生长因子β1(TGF-β1)或HYP处理细胞24、48、72 h,Western blot检测各组细胞中DSP表达情况。采用小分子siRNA DSP干扰序列及阴性对照序列分别转染hPASMCs,分为DSP干扰(siDSP)组及阴性对照(siNT)组。2组均进行TGF-β1、CoCl2或HYP处理48 h,Western blot检测增殖分化及凋亡相关蛋白[p-p38、增殖相关蛋白(PCNA)、抗凋亡蛋白(Bcl2)、促凋亡蛋白(Bax)]的表达情况,划痕实验检测细胞的迁移能力变化,EdU细胞增殖流式检测细胞增殖能力变化。结果MCT组、HYP组、SuHx组DSP表达量[(3.10±0.59)、(4.34±0.75)、(3.84±0.13)]较NC组(1.00±0.19)升高,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。TGF-β124 h组、HYP 72 h组hPASMCs的DSP蛋白表达分别较TGF-β10 h组及HYP 0 h组升高[(4.42±0.35)比(1.00±0.07)、(2.62±0.32)比(1.00±0.21)],差异均有统计学意义(P值均<0.01)。siDSP+TGF-β1组、siDSP+CoCl2组、siDSP+HYP组中hPASMCs的p-p38表达量较siNT+TGF-β1组、siNT+CoCl2组、siNT+HYP组升高[(2.14±0.20)比(1.00±0.14)、(1.66±0.09)比(1.00±0.12)、(3.03±0.22)比(1.00±0.50)],差异均有统计学意义(P值均<0.05)。siDSP+HYP组中hPASMCs的PCNA表达量较siNT+HYP组下降[(0.55±0.04)比(1.00±0.04)],差异有统计学意义(P值<0.05)。siDSP+TGF-β1组、siDSP+CoCl2组、siDSP+HYP组中hPASMCs的Bcl2/Bax比值较siNT+TGF-β1组、siNT+CoCl2组、siNT+HYP组下降[(0.85±0.06)比(1.00±0.04)、(0.73±0.08)比(1.00±0.07)、(0.72±0.01)比(1.00±0.05)],差异均有统计学意义(P值均<0.05)。siDSP+TGF-β1组hPASMCs的细胞迁移率较siNT+TGF-β1组减少[(27.56±2.44)%比(58.05±2.25)%],差异有统计学意义(t=9.20,P<0.001);siDSP+CoCl2组hPASMCs的细胞迁移率较siNT CoCl2组减少[(25.78±2.55)%比(47.30±2.10)%],差异有统计学意义(t=6.53,P<0.001)。siDSP+TGF-β1组hPASMCs的细胞增殖率较siNT+TGF-β1组减少[(6.07±0.23)%比(10.62±0.50)%],差异有统计学意义(t=8.29,P=0.001);siDSP+HYP组hPASMCs的细胞增殖率较siNT+HYP组减少[(2.84±0.46)%比(5.56±0.46)%],差异有统计学意义(t=4.17,P=0.014)。结论DSP能够促进hPASMCs的增殖和迁移,促进肺血管的重构,在PH的发生、发展起重要作用。
关键词
肺动脉高压
转化生长因子Β1
桥粒斑蛋白
肺动脉平滑肌细胞
Keywords
Pulmonary hypertension
Transforming growth factor beta1
Desmoplakin
Pulmonary artery smooth muscle cells
分类号
R544.1 [医药卫生—心血管疾病]
原文传递
题名
作者
出处
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桥粒斑蛋白在肺动脉高压中对血管肺动脉平滑肌的功能研究
吴雪芬
江倩
罗晓韵
王健
卢文菊
张晨婷
《国际呼吸杂志》
2022
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