大鼠肺血管内皮细胞的原代培养及生物学行为比较研究

目的建立大鼠肺动脉内皮细胞(PAEC)、肺静脉内皮细胞(PVEC)以及肺微血管内皮细胞(PMVEC)的体外分离和培养方法,分析3种肺血管内皮细胞的生物学特征及功能。方法本研究为实验研究。精分1只雄性SD大鼠肺动脉、肺静脉,肺组织取边缘剪碎,各样本分别用混合酶液消化,以血小板-内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)免疫磁珠法分选内皮细胞,用内皮细胞专用培养基培养。倒置显微镜下观察3种肺血管内皮细胞的形态差别,通过免疫荧光鉴定各组细胞纯度。通过免疫荧光和Western blot观察3组细胞血管性血友病因子(vWF)和平滑肌激动蛋白抗体(α-SMA)蛋白表达情况。通过基质胶体外成环实验比较3组细胞1.5、2.5、3.5、4.5、5.5、6.5、7.5 h成环情况。采用SPSS 22.0和FlowJo 10软件进行统计学分析和统计作图。结果3组细胞24 h后均迅速贴壁,vWF免疫荧光染色均为阳性。3组细胞形态均为铺路石状,其中PAEC为典型的铺路石状,大多数呈椭圆形;而PVEC、PMVEC形态更细长。免疫荧光显示PVEC和PMVEC细胞浆内少量α-SMA蛋白弥散表达[(0.16±0.03)、(0.23±0.01)],而PAEC中几乎观察不到α-SMA蛋白表达(0.06±0.01)。随着时间推移,3种肺血管内皮细胞成环周长均呈先上升后下降趋势,其中PVEC组成环长度最长。3组细胞成环周长在组间、时点间、时间和组间交互作用差异均具有统计学意义(P值均<0.01)。结论该方法所获得的3种肺血管内皮细胞纯度高,可在体外稳定培养。3种血管内皮细胞生物学功能有差别,其中PVEC体外成环能力最强。PAEC细胞表达α-SMA蛋白量最少。

《新型冠状病毒肺炎防控》慕课在住院医师规范化培训教学中的应用初探

目的探索《新型冠状病毒肺炎(简称"新冠肺炎")防控》慕课在住院医师规范化培训(简称"住培")教学中的应用,初步评估其教学效果,为后续实践提供理论依据。方法新冠疫情下依托于人卫慕课平台,通过《新冠肺炎防控》慕课对广州医科大学各附属医院住培学员进行新冠肺炎防控知识教学。通过问卷调查形式,回顾性分析142名住培学员对新冠肺炎防控理论知识的掌握程度及对课程的满意度,评价其应用效果。结果142名住培学员参加本研究,其中120名住培学员参加《新冠肺炎防控》慕课教学(慕课组),22名住培学员接受新冠肺炎防控知识常规教学(常规教学组)。慕课组住培学员新冠防控理论考核成绩显著高于常规教学组,差异具有统计学意义(t=2.6,P=0.01);90.8%慕课组住培学员认为通过网络学习进行新冠防控知识培训最为有效,比例高于常规教学组(68.2%),差异具有统计学意义(χ^(2)=8.6,P=0.03)。慕课组住培学员对新冠肺炎防控知识慕课满意度显著高于常规教学组(χ^(2)=22.3,P=0.00)。此外,慕课组住培学员比常规教学组更希望提高个人思辨能力、自主学习习惯(χ^(2)=5.6,P=0.03;χ^(2)=6.6,P=0.02)。结论《新冠肺炎防控》慕课应用效果良好,在住培学员教学中具有一定的应用价值。