上尿路结石术后感染的病原菌及相关因素分析

分析上尿路结石(UUC)术后感染的病原菌及相关因素。回顾2 500例行内镜碎石治疗的UUC术后感染发生率,分析所有对象临床特征与术后感染症状发生的关联性,并探讨存在感染症状的患者病原菌分布占比情况,结果显示UUC患者内镜碎石术治疗后感染症状发生率较高,年龄≥60岁、女性、合并糖尿病、结石>5 cm、急性梗阻、手术类型、手术时间延长等项目均对感染的发生有显著影响,UUC合并感染患者主要致病菌为革兰阴性菌,大肠埃希菌是导致感染发生的主要革兰阴性致病菌,粪肠球菌是主要革兰阳性菌致病菌,临床治疗需根据药敏试验结果结合患者自身情况综合制定用药方案,在保证安全性的同时提高治疗效果,改善预后。

NTrap拦截下输尿管硬镜碎石术与输尿管软镜碎石术治疗输尿管超上段结石的疗效比较

目的比较阻石网篮(NTrap)拦截下输尿管硬镜钬激光碎石术与输尿管软镜钬激光碎石术治疗输尿管超上段结石的临床疗效及安全性。方法回顾性分析我院2013年1月～2018年1月收治的74例成功施术的单侧输尿管超上段结石患者的临床资料,施术方式仅为阻石网篮拦截下输尿管硬镜钬激光碎石术(36例)或输尿管软镜钬激光碎石术(38例)。在确定两组资料在一般资料上不存在统计学上的差异后,比较分析两组的手术时间、一期碎石成功率、术后住院天数、严重并发症发生率、首次输尿管镜碎石术后的无石率(SFR)。结果两组手术时间、一期碎石成功率、术后住院天数、首次输尿管镜碎石术后的SFR比较,差异均无统计学意义(P>0.05),严重并发症在本次入组数据内均未发生。结论与输尿管软镜钬激光碎石术相比,NTrap拦截下输尿管硬镜钬激光碎石术处理输尿管超上段结石的疗效是类似的,是可选的替代方案。

2021年经皮肾镜欧洲泌尿外科学会尿石症分会与国际尿石症联盟联合专家共识解读

欧洲泌床外科学会床石症分会(EAU Urolithiasis Section,EULIS)和国际尿石症联盟(International Alliance of Urolithiasis,IAU)于2021年3月在《European Urology Focus》杂志上发表了经皮肾镜碎石取石术(percutaneous nephrolithotomy,PCNL)联合专家共识[1]。该共识是首部关于PCNL的国际专家共识,有别于指南,包含了贯穿PCNL整个流程的一些技术细节,对开展PCNL的泌尿外科医师具有重要的指导意义,本文就此共识的要点内容进行介绍和解读。

ACTA2基因在人肿瘤中致癌作用的泛癌分析

目的:研究ACTA2基因在人肿瘤组织的表达、预后相关性、基因变异和免疫浸润等情况,进而探究其临床意义。方法:使用TIMER2.0、GEPIA2、HPA数据库及仙桃学术网站,分析各种类型肿瘤组织中ACTA2的表达情况及其与预后的相关性。使用cBioPortal数据库分析ACTA2基因变异情况。使用TIME2.0分析ACTA2在肿瘤中的免疫浸润水平。使用STRING、GEPIA2、Veen网站和R包进行ACTA2相关基因的富集分析。结果:胶质细胞瘤、肝癌、胰腺腺癌等肿瘤组织中,ACTA2高表达与预后不良相关;子宫内膜癌组织中ACTA2低表达与预后不良相关(均P<0.05)。ACTA2最主要的变异类型是拷贝数缺失。ACTA2的表达与多形成性胶质细胞瘤及肺腺癌等的肿瘤相关成纤维细胞浸润水平呈正相关(均P<0.05)。ACTA2相关基因的富集分析显示,肌动蛋白细胞骨架调节、血管平滑肌收缩参与了ACTA2的功能机制。结论:ACTA2表达与临床预后、基因变异及免疫浸润水平相关,ACTA2可能作为多种肿瘤新的生物标记物。

PRC1高表达与前列腺癌生化复发的相关性研究

目的研究细胞质分裂调控蛋白1(PRC1)在前列腺癌中的表达情况及其与生化复发的相关性。方法采用实时定量PCR及蛋白免疫印迹法检测PRC1在前列腺癌与癌旁前列腺组织的表达水平,并利用Taylor基因芯片数据库对PRC1基因mRNA水平进行验证。Kaplan-Meier法分析前列腺癌患者总体生存率及生化复发时间与PRC1 mRNA表达水平之间的关系。Cox回归分析临床病理特征与生化复发的相关性。结果 12对前列腺癌及癌旁前列腺组织中,前列腺癌的PRC1 mRNA及蛋白表达均高于癌旁前列腺组织(P均<0.01)。Taylor基因芯片数据库分析显示,PRC1在前列腺癌组织中的表达水平高于非癌组织(P<0.001),且出现生化复发或转移、Gleason评分高、临床分期≥T3A期者的PRC1 mRNA表达水平高于无出现生化复化或转移、Gleason评分低、临床分期<T3A期者(P均<0.05);Kaplan-Meier分析显示,PRC1高表达组的无生化复发率明显低于PRC1低表达组(P=0.008);Cox回归分析显示,PRC1(P=0.001)、Gleason评分(P<0.001)、术前PSA水平(P=0.021)及病理分期(P=0.021)是前列腺癌生化复发的影响因素。结论 PRC1在前列腺癌中的高表达与生化复发呈正相关,PRC1表达水平有助于判断前列腺癌患者的预后。

Prohibitin启动子中胆固醇活性作用位点研究

目的:验证抑制素(prohibitin,PHB)基因启动子胆固醇敏感活性作用位点,为PHB在前列腺癌靶向基因治疗中的应用提供实验依据。方法:采用PCR分段扩增PHB启动子,克隆入pGL3-Basic萤光素酶报告基因载体。将构建的重组质粒用脂质体转染至人前列腺癌PC-3细胞,再分别培养于低胆固醇培养基和普通胆固醇培养基中,检测PHB启动子各分段重组质粒萤光素酶活性的变化。限定PHB启动子约200 bp的胆固醇敏感启动区域,找出其中的固醇调节元件(sterol regulatory element,SRE)同源位点并进行点突变,证实PHB基因的胆固醇敏感调控位点。结果:PHB启动子和各分段产物构建质粒完整。与转染完整PHB启动子(pPHB-1192)的PC-3细胞比较,转染pPHB-179(-35/+138)的PC-3细胞萤光素酶活性显著降低(P<0.05)。点突变位于PHB启动子上的-117到-108 bp的SRE可能位点后,与转染pPHB-1192的PC-3细胞比较,转染SRE点突变的PC-3细胞萤光素酶活性显著降低(P<0.05)。结论:PHB启动子在人前列腺癌PC-3细胞中的活性受胆固醇调节。PHB启动子中对胆固醇敏感的作用位点位于-117到-108 bp的SRE同源位点。PHB可能成为前列腺癌靶向基因治疗的有效工具。

建立CRISPR/Cas9慢病毒系统高效敲除人源AIP1基因

旨在构建AIP1基因CRISPR/Cas9敲除体系,获得高效、稳定、永久性AIP1敲除的人胚肾细胞株(293T)。针对AIP1的外显子设计3个20 bp的sg RNA(sp1、sp2和sp3)。与PX458载体连接,构建PX458-sg RNA敲除表达载体。T7E1实验评估敲除效率。将敲除效率最高的sg RNA与lenti CRISPRv2慢病毒载体连接,构建lenti CRISPRv2-sg RNA敲除表达载体,将阳性重组质粒导入病毒包装细胞293T中,收集病毒上清液转染293T细胞。对敲除成功的293T细胞通过有限稀释法构建敲除AIP1基因的稳定细胞株。Western blot测定转染后293T细胞中AIP1蛋白的表达量。结果显示,测序证实AIP1的3个靶序列分别正确插入PX458表达载体中,T7E1实验证实AIP1sg RNAsp2靶向敲除效率最高;成功构建lenti CRISPRv2-sg RNAsp2 AIP1敲除表达载体,并包装病毒,感染293T细胞;Western blot证实获得稳定的AIP1基因表达缺失的293T细胞株。建立了能稳定敲除AIP1基因的CRISPR/Cas9慢病毒系统,成功获得AIP1敲除的293T稳定细胞株。

丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1上调表达对前列腺癌发病进程及临床预后的指导作用

目的 探讨丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1（ASF/SF2）在前列腺癌的作用及其可能参与的致癌分子机制.方法 免疫组织化学法检测102例前列腺癌患者及20例前列腺良性组织ASF/SF2的表达水平.x^2检验分析ASF/SF2表达同前列腺癌患者临床病理特征的相关性.Kaplan-Meier及Cox多因素模型检测ASF/SF2表达同前列腺癌生化复发的关系.结果 ASF/SF2在前列腺癌组中阳性率为51.0％ （52/102）,在前列腺良性组织的阳性率为20.0％（4/20）,两者差异有统计学意义（P＜0.05）.ASF/SF2表达同临床病理分期显著相关（P＜0.05）,其高表达与无生化复发生存率呈显著负相关（P＜0.05）,Cox多因素分析表明ASF/SF2可独立预测前列腺癌生化复发的危险度（风险比=2.943,P＜0.05）.结论 ASF/SF2高表达同前列腺癌的发病进程密切相关,ASF/SF2的致癌作用也许同哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路有关.

GPER的激活调控自噬抑制前列腺上皮细胞增殖

目的 探讨G蛋白耦联雌激素受体(GPER)对正常前列腺上皮细胞增殖及自噬的影响。 方法 利用CCK8,观察雌二醇、G1对两种前列腺上皮细胞BPH-1及RWPE-1增殖的影响,通过Western印迹、CYTO-ID自噬检测试剂检测加入雌二醇、G1及同时加入G1及G15对前列腺上皮细胞的自噬活动的作用。 结果 加入雌二醇、G1后24 h开始,雌二醇组及G1组的吸光度(A)值均低于空白对照组(P<0.01);显示雌二醇及G1对BPH-1及RWPE-1细胞处理有抑制作用,且随时间延长,抑制效应增加。雌二醇组及G1组中的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及CytoID绿色荧光强度均较空白对照组低(P<0.01),G1+G15组较G1组的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及CytoID绿色荧光强度高(P<0.05)。 结论 GPER的激活可抑制细胞的自噬及增殖。