白藜芦醇对冻融后小鼠成熟卵母细胞氧化应激水平和线粒体功能的影响

目的探讨白藜芦醇(Res)对冻融后小鼠成熟卵母细胞活性氧(ROS)水平和线粒体功能的影响。方法根据是否在冷冻复苏培养液中添加Res,将解冻后存活的卵母细胞分为两组:Res组和对照组。二氯荧光素二乙酸(DCFH-DA)检测ROS水平,JC-1荧光染色检测线粒体膜电位(ΔΨm)。结果卵母细胞玻璃化冷冻解冻的存活率为89.0%(267/300),其中125、142枚分别进行ROS和ΔΨm检测。Res组的ROS水平(0.64±0.17)较对照组(1.00±0.26)明显降低(P<0.01),Res组的ΔΨm(1.16±0.40)较对照组(0.87±0.28)明显增加(P<0.01)。结论 Res能降低小鼠冻融卵母细胞的氧化应激水平并增加其线粒体功能,可能有助于卵母细胞的损伤修复。

β-地中海贫血动物模型研究进展

β-地中海贫血是一种临床常见的由于β-珠蛋白基因重要功能区域的突变引起遗传性溶血性贫血疾病。首先在地中海沿岸地区发现,并在遭受疟疾感染的国家高度流行,但随着人类居民的相互迁移已导致世界许多地区出现这种疾病[1]。

血红蛋白Bart′s水肿胎儿综合征诱导多能干细胞系的建立

目的建立血红蛋白Bart′s水肿胎儿综合征诱导多能干细胞模型。方法通过收集血红蛋白Bart′s水肿胎儿综合征孕妇患者羊水标本,分离培养其中的羊水细胞;然后通过使用仙台病毒将h Oct3/4、h Sox2、h Klf4和h L-Myc四种因子转导羊水细胞进行重编程;最后通过形态学、碱性磷酸酶染色、干细胞多能表面标志物免疫荧光、RT-PCR、EB自发三胚层分化和畸胎瘤体内分化潜能实验对获得的诱导多能干细胞进行检测分析。结果获得的诱导多能干细胞呈现出明显的干细胞样形态,碱性磷酸酶染色、多能性标志物免疫荧光染色及逆转录PCR等检测结果均符合干细胞特征,与人胚胎干细胞特性相似。体外EB自发分化和体内畸胎瘤分化实验也证实具有完全的三胚层分化发育潜力。结论成功建立血红蛋白Bart′s水肿胎儿综合征诱导多能干细胞系,为后续疾病特异性造血分化模型的建立、疾病治疗的研究及药物开发应用奠定基础。

微阵列技术在植入前遗传学筛查领域中的应用

胚胎植入前遗传学筛查(preimplantation genetic screening,PGS)是一种低风险的植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)。如今各种技术方法的不断涌现并应用于临床PGD中,大大增加了诊断的准确性,降低了误诊风险。而近几年微阵列技术如阵列比较基因组杂交(aCGH)和单核苷酸多态性阵列(SNP)已应用于临床PGS研究中,该项技术突破了以往经典遗传学检测技术如FISH等的诸多限制,能够在全基因组范围内同时检测多种因染色体失衡导致的疾病、微重复、微缺失等,检测结果更加精确、敏感,并能检测到≥10%水平的嵌合体。基于其各种优点,可见微阵列技术在胚胎PGS中具有重要的应用前景。

血浆miR-490-5p作为结直肠癌早期诊断标志的临床价值

目的 :检测血浆微RNA-490-5p(micro RNA-490-5p,mi R-490-5p)表达水平,探讨mi R-490-5p作为结直肠癌早期诊断标志的临床意义。方法 :通过实时荧光定量PCR法检测75例结直肠癌患者、9例高级别上皮内瘤变患者和30例健康志愿者的血浆mi R-490-5p表达水平。统计分析mi R-490-5p表达水平与结直肠癌患者临床病理特征的相关性,采用受试者工作特征曲线分析用mi R-490-5p指标诊断结直肠癌的效能。结果 :高级别上皮内瘤变和结直肠癌患者的血浆mi R-490-5p水平均比健康对照组低(P值均<0.01)。结直肠癌患者的血浆mi R-490-5p水平与患者年龄、性别、肿瘤位置、淋巴结是否转移以及TNM分期均无明显相关性(P值均>0.05)。将血浆mi R-490-5p作为早期诊断标志,从健康人中筛选高级别上皮内瘤变和结直肠癌患者的特异度为100%,敏感度为96.4%,曲线下面积为0.997(P<0.000 1)。结论 :检测血浆mi R-490-5p表达水平对诊断早期结直肠癌具有一定的临床价值,推测mi R-490-5p可能成为结直肠癌的早期诊断标志之一。

抗氧化剂对小鼠卵母细胞老化延缓作用的研究

目的:探讨重金属耦合剂(乙二胺四乙酸和柠檬酸钠)与抗氧化剂(硫辛酸和乙酰肉碱)对小鼠卵子数目、线粒体和纺锤体老化的影响。方法:随机将C57BL/6雌性小鼠分为4组,重金属耦合剂组(A组)、抗氧化剂组(B组)、混合组(C组)和正常空白对照组(D组),每组48只。分别在饮用水中添加重金属耦合剂和/或抗氧化剂,并于饲养3个月、6个月、9个月和12个月后测定卵子数目、线粒体膜电位和纺锤体结构等指标。结果:小鼠卵子数和线粒体活性均随年龄增长而下降和减弱,纺锤体异常率随时间的延长而升高;在同一年龄阶段中,与A组和D组相比,B组和C组的卵子数目较多,长时间作用后,线粒体活性偏高,而纺锤体异常率偏低。结论:饮用水中添加抗氧化剂硫辛酸和乙酰肉碱可有延迟卵母细胞老化的作用。