《妊娠期与产褥期新型冠状病毒感染专家建议》解读

2019年12月在湖北省武汉市开始流行新型冠状病毒感染,并且病情在2020年1月份迅速蔓延。世界卫生组织(WHO)将其命名为2019冠状病毒病(corona virus disease 2019,COVID-19),COVID-19孕产妇容易出现并发症,并进展为重症,基于目前的资料和其他类似病毒的知识与经验,中国医师协会妇产科医师分会母胎医师专业委员会、中华医学会妇产科分会产科学组、中华医学会围产医学分会等组织或机构的专家于2020年2月初发表了《妊娠期和产褥期新型冠状病毒感染的专家建议》[1]。

慢性乙型病毒性肝炎患者恩替卡韦治疗前后外周血结缔组织生长因子表达水平

目的:检测慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者恩替卡韦治疗前后外周血中结缔组织生长因子(CTGF)表达水平,探讨CTGF表达水平与HBV DNA载量的相关性。方法:入组22例健康人作为对照组,入组60例CHB患者作为实验组,给予恩替卡韦0.5 mg每天1次口服治疗;分别收集治疗前及抗病毒治疗后12、24周外周血,ELISA检测外周血中CTGF表达水平,Pearson相关性分析分析CTGF表达水平与HBV DNA载量的相关性。结果:实验组患者恩替卡韦抗病毒治疗前外周血中CTGF表达水平较对照组显著增高(P<0.05),且其表达水平与HBV DNA载量呈正相关;CHB患者恩替卡韦抗病毒治疗24周后外周血中CTGF、HBV DNA载量均较治疗前有所下降(P<0.05)。结论 :恩替卡韦治疗后外周血CTGF表达下降,CTGF可作为反映恩替卡韦抗病毒疗效的指标。

急性心肌梗死患者院内并发心室颤动的危险因素分析

目的探讨影响急性心肌梗死(AMI)患者院内并发心室颤动(VF)的危险因素。方法 885例AMI患者根据住院期间是否发生VF分成两组:VF组(n=28)和非VF组(n=857),回顾性分析两组患者的临床资料,并对相关危险因素进行单因素及多因素分析,探讨AMI患者院内发生VF的独立危险因素。结果 885例AMI患者中,28例发生VF(3.1%)。单因素分析表明,VF组患者的入院时收缩压和左室射血分数(EF)明显低于非VF组(P<0.05);而慢性肾功能不全病史、前壁心肌梗死、心房颤动、Killip分级>Ⅱ级和心源性休克患者的比例,以及心率、呼吸频率、空腹血糖、血清肌酐(Cr)、血清肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)和血清肌钙蛋白Ⅰ(c TNI)等指标均明显高于非室颤组,差异有显著性意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析表明,慢性肾功能不全(OR=2.313)、心源性休克(OR=4.193)、心房纤颤(OR=2.823)、Killip分级>Ⅱ级(OR=3.674)是AMI患者住院期间并发VF的独立危险因素。结论慢性肾功能不全、心源性休克、心房纤颤、Killip分级>Ⅱ级是急性心肌梗死患者住院期间并发室颤的独立危险因素。

不同强度冲击波对牙槽骨细胞成骨能力的影响

背景:许多口腔炎性疾病可引起牙槽骨丢失,牙齿松动,影响咬合关系。体外冲击波技术有望改善牙槽骨修复,提高牙槽骨细胞成骨活性,但是目前体外冲击波技术对牙槽骨细胞的作用效果及机制仍不明确,有必要进一步阐明。目的:比较不同强度冲击波对大鼠牙槽骨细胞增殖能力和成骨分化的影响。方法:通过原代培养获取大鼠牙槽骨细胞,进行体外分离培养,通过碱性磷酸酶染色进行鉴定。分别用强度为0.18、0.36、0.50 mJ/mm^2的冲击波作用于大鼠牙槽骨细胞,作用频次均为100次。结果与结论:当选用强度为0.18和0.36 mJ/mm^2冲击波作用后,牙槽骨细胞碱性磷酸酶和骨形态发生蛋白2的分泌量明显增加,并且冲击波强度越高,分泌量越大(P<0.05)。当冲击波作用强度为0.50 mJ/mm^2时,大鼠牙槽骨细胞增殖能力明显减退,碱性磷酸酶和骨形态发生蛋白2的分泌量显著下降(P<0.05)。提示当冲击波作用强度低于0.36 mJ/mm^2时,随着作用强度的增加,可提高牙槽骨细胞的成骨能力,这为临床应用冲击波促进牙槽骨修复提供了理论基础。

慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者外周血中干扰素γ诱导蛋白10的表达及意义

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）急性加重期患者外周血中干扰素γ诱导蛋白10（IP-10）的表达及意义.方法 收集2012年7月至2013年10月广州医科大学附属第三医院治疗的COPD急性加重期患者58例作为观察组,另纳入同期28名健康体检者作为对照组.用TRIzol试剂提取细胞总mRNA,用反转录试剂盒将RNA反转录为cDNA.用实时荧光定量聚合酶链反应检测IP-10 mRNA水平,酶联免疫吸附试验检测IP-10蛋白质表达水平.Pearson相关检验分析IP-10表达水平与肺功能的相关性.结果 COPD急性加重期患者外周血中IP-10 mRNA及蛋白质表达水平均明显高于对照组[（12.3±4.3）比（3.8 ±1.9）,（177±35） ng/L比（87±31） ng/L],差异有统计学意义（P＜0.05）;IP-10表达水平与第1秒用力呼气容积、用力肺活量、第1秒用力呼气容积/用力肺活量呈负相关（r=-0.543、-0.486、-0.471,均P＜0.05）.结论 COPD急性加重期患者外周血中IP-10表达水平增高,且IP-10表达水平与肺功能呈负相关,可能参与COPD的发病。

IL-32对HepG22.15细胞凋亡的影响

目的研究白细胞介素-32（IL-32）对乙型肝炎病毒（HBV）感染的肝细胞（HepG2 2.15细胞,插入HBV全基因组,持续表达）凋亡的影响。方法将不同浓度的IL-32（0~0.4μg/mL）蛋白质与HepG2细胞、HepG2 2.15细胞共培养,48h后用MTT检测细胞增殖。收集与IL-32共培养48h的HepG2细胞、HepG2 2.15细胞,加入AnnexinⅤ和PI,室温避光孵育15min,流式细胞仪检测细胞凋亡。将IL-32（0.2μg/mL）与HepG2细胞、HepG2 2.15细胞共培养,分别于0、12、24h后收集细胞,Human Active Caspase-3Immunoassay检测试剂盒检测活化的Caspase-3表达水平,Caspase-3Colorimetric检测试剂盒检测Caspase-3酶活性。结果IL-32抑制HepG2细胞、HepG2 2.15增殖,诱导HepG2细胞、HepG2 2.15细胞凋亡,且随着IL-32浓度的增高,细胞凋亡水平亦增高。IL-32诱导HepG2细胞、HepG22.15细胞活化的Caspase-3表达水平及Caspase-3酶活性均增加。结论 IL-32可能通过活化Caspase-3通路诱导HBV感染的肝细胞凋亡而发挥抗病毒作用,同时亦参与慢性乙型病毒性肝炎肝损伤的发生。

IL-32γ对LX-2细胞表达Ⅰ型胶原的影响

目的研究IL-32γ可否诱导肝星状细胞LX-2表达Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)。方法不同浓度的IL-32γ与LX-2共培养,分别收集培养上清液、提取细胞总RNA,real-time PCR检测CollagenⅠmRNA表达水平,ELISA法检测CollagenⅠ蛋白质表达水平。用不同浓度的人重组磷酸化p38α蛋白(recombinant human active p38α蛋白)与LX-2细胞共培养,48 h后收集细胞培养上清液,ELISA法检测CollagenⅠ蛋白质表达水平。再用不同浓度的p38MAPK抑制剂SB203580加入LX-2细胞与IL-32γ共培养的培养液中,分别收集培养上清液,采用ELISA检测CollagenⅠ蛋白质表达水平,同时提取细胞总RNA采用real-time PCR检测CollagenⅠmRNA表达水平。结果 IL-32γ诱导人LX-2细胞表达CollagenⅠ,且其表达水平随IL-32γ浓度的增加而增强;人重组磷酸化p38α蛋白可诱导LX-2细胞表达CollagenⅠ增高,阻断p38MAPK可降低IL-32γ诱导的CollagenⅠ表达。结论 IL-32γ通过活化p38MAPK通路诱导LX-2细胞表达CollagenⅠ,IL-32γ可能通过诱导肝星状细胞表达CollagenⅠ而参与肝纤维化的形成。

晚期氧化蛋白产物对大鼠牙槽骨细胞凋亡的影响

目的探讨晚期氧化蛋白产物(AOPP)对大鼠牙槽骨细胞凋亡的诱导作用。方法选取大鼠牙槽骨细胞作为靶细胞,用不同浓度(0、100、200μg/mL)的AOPP作用不同时间(12、24 h)刺激牙槽骨细胞,通过流式细胞仪测定细胞凋亡情况,酶标仪测定刺激下牙槽骨细胞活性氧(ROS)的生成量,采用免疫印迹法检测影响细胞凋亡的相关蛋白Bcl-2和Bax的表达变化。结果原代培养获得的牙槽骨细胞呈贴壁生长,能合成碱性磷酸酶,具有成骨样细胞表现。AOPP可以引起牙槽骨细胞产生大量ROS,引起细胞凋亡,随着作用剂量的增大和作用时间的延长,细胞凋亡率明显升高,其中当AOPP作用浓度为200μg/mL、作用时间为24 h时,凋亡率最高。牙槽骨细胞可表现为Bcl-2合成减少,Bax合成增加,而且相关凋亡因子表达随着作用时间的延长和作用浓度的增加而显著升高(P<0.05)。结论氧化应激可引起牙槽骨细胞凋亡,这可能是导致部分口腔慢性炎症性疾病后期出现牙槽骨吸收的原因。

白细胞介素-32对HepG2 2.15细胞HBV表达的影响

目的探讨白细胞介素-32（IL-32）对HepG2 2.15细胞HBV表达的影响。方法不同浓度的IL-32（0-0.8μg/m L）蛋白质加入HepG2 2.15细胞（插入HBV全基因组,持续表达）培养液共培养,48 h后收集培养上清液。用实时荧光定量PCR检测HBV DNA载量,用ELISA检测HBsAg、HBeAg表达水平。结果 IL-32抑制HepG2 2.15细胞HBV的复制,抑制HBsAg、HBeAg表达,且其抑制呈剂量依赖性增强。结论 IL-32可以抑制HepG2 2.15细胞HBV的表达,IL-32具有抗HBV的作用。

新型冠状病毒奥密克戎变异株流行期间孕产妇感染临床分析

目的结合目前我国流行的奥密克戎变异株背景,研究奥密克戎变异株在妊娠女性中发病的临床特征。方法通过问卷调查结合采集门诊及住院患者病历信息方式,收集2022年12月至2023年1月在广州医科大学附属第三医院诊疗的249例妊娠合并新冠病毒感染患者的病历资料并进行回顾性分析,总结其临床特征。结果249例患者年龄为22~45岁,发病集中在12月中旬,与国内发病高峰期基本吻合;孕早、中及晚期发病者分别为23(9.24%)、93(37.35%)、129(51.81%)例,其中4例孕周数据缺失。无症状患者10例,轻中型234例(93.98%),重型4例(1.61%),危重型1例(0.40%)。常见的临床症状为发热(74.5%)、鼻塞(68.2%)、咳嗽68.2%)、咽痛(52.3%)和全身肌肉酸痛(49.8%)。孕早、中、晚期发热峰值分别为(38.60±0.87)℃、(38.43±0.57)℃和(38.39±0.59)℃,差异无统计学意义。孕早期发热持续时间[(2.17±0.96)d],与孕中期[(1.61±0.10)d]比较差异有统计学意义(P=0.034),与孕晚期[(1.73±0.10)d]比较差异无统计学意义。73.90%的患者症状可自行缓解,2.01%的患者需重症监护。结论妊娠合并奥密克戎变异株感染患者绝大多数为轻中型患者,重型、危重型较少见;临床上以发热、咳嗽、鼻塞、咽痛以及肌肉酸痛等症状最为常见;孕早期平均发热时间较孕中晚期长。

“三线防控”模式在新冠肺炎疫情期间妇产科患者门诊就诊管理实践探讨

目的探讨新冠肺炎疫情期间"三线防控"模式在广州医科大学附属第三医院妇产科门诊的实践成效。方法自新冠肺炎疫情以来,我院妇产科门诊自主制定了"三线防控"模式并常态化实施,采用回顾性研究方法分析2021年3月至8月广州市荔湾区疫情前后我院妇产科普通门诊、急诊及发热门诊的患者就诊情况,重点分析5~6月普通门诊中发现健康码异常或流行病学史的漏诊率、普通门诊的实际就诊率及候诊时间、患者满意度、发热门诊会诊率、妇科门诊手术情况、产科患者收住院情况等,同比2020年及2019年5~6月我院妇产科患者就诊情况变化。结果在2021年广州市荔湾区疫情期间的5~6月,我院妇产科门诊累计预检分诊33782例,其中黄码患者73例,健康码正常但流行病学史疑似患者108例,最终确诊新冠肺炎患者0例。2021年5月患者就诊同比2020年上升了6.09%,但较疫情前的2019年下降11.6%;6月患者就诊同比2019年及2020年分别明显下降了40.73%及41.51%。2021年5月21日至7月2日妇产科普通门诊患者的实际就诊率平均为90.8%,呈逐渐增长的趋势。2021年5~6月妇产科门诊手术总数为2501例,总收住院人数为1286例,收住院患者中持有72 h有效新冠核酸阴性结果的占比100%,隔离病房的收治情况为0;患者的就诊满意度平均高达8.76分。结论"三线防控"管理模式,建立有效的普通门诊应急反应体系,保障了不同状况、不同需求的患者得到及时诊治,为广大患者安全就医提供了坚实的保障,并获得较高的满意度。

白细胞介素32γ通过活化核转录因子κB通路诱导LX-2细胞表达基质金属蛋白酶9

目的：研究白细胞介素-32（Interleukin-32， IL-32）可否诱导肝星状细胞LX-2表达基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9， MMP-9）。方法用不同浓度的IL-32γ与LX-2细胞共培养，收集细胞培养上清，用TRizol试剂提取细胞总RNA，用定量 PCR检测MMP-9 RNA表达水平， MMP-9蛋白质表达水平用酶联免疫吸附试验（ enzyme-linked immunosorbent assay， ELISA）试剂盒检测。接下来将Nuclear factor kappa B （ NF-κB）亚基p50、 p65真核表达载体pCMV-p50、 pCMV-p65单独或联合转染LX-2细胞，48 h后收集细胞培养上清，酶联免疫吸附测定（ enzyme linked immunosorbent assay， ELISA）检测MMP-9蛋白质表达水平。将不同浓度的NF-κB抑制剂SN50加入IL-32γ与LX-2细胞共培养的培养液中，48 h后收集细胞培养上清，用ELISA检测MMP-9蛋白质表达水平。结果 IL-32γ可以诱导人LX-2细胞表达MMP-9，且其表达水平随IL-32γ浓度增加而增强； NF-κB亚基p50、 p65可以诱导LX-2细胞MMP-9表达增高； NF-κB抑制剂SN50阻断NF-κB通路可降低IL-32γ诱导的MMP-9表达。结论 IL-32γ通过活化NF-κB通路诱导LX-2细胞表达MMP-9， IL-32可能通过诱导肝星状细胞表达MMP-9参与肝纤维化形成。

持续HBsAg高定量与经抗病毒治疗后发生肝癌的关系

目的 HBV复制与肝癌发生密切相关,抗病毒治疗可降低HBV相关肝癌发生率。本文探讨经抗病毒治疗后HBV DNA阴性而发生肝癌的病例的临床及病毒动力学特点。方法回顾性分析42例经核苷类似物治疗HBV DNA阴性的肝癌患者,分析患者HBV DNA阴性及诊断为肝癌时血清学、病毒学、肝硬化程度、AFP及影像学检查情况。结果42例患者确诊肝癌时,ALT从基线的中位数42.5 U/L下降到确诊肝癌时的29.0 U/L,差异有统计学意义(F=9.316,P=0.002)。APRI值基线均数为2.65,确诊肝癌时APRI值均数为1.02,差异有统计学意义(F=7.617,P=0.007)。治疗前HBsAg中位数为4 766.5 U/L,确诊为肝癌后HBsAg中位数为5 982 U/L,两者比较差异无统计学意义(F=2.258,P>0.05)。结论抗病毒治疗可以改善慢性乙型肝炎患者肝脏炎症和纤维化程度,但不能避免肝癌的发生。持续HBsAg高定量是经抗病毒治疗后HBV DNA阴性而发生肝癌的危险因素。

乙型肝炎病毒X蛋白对B7-H6基因的激活作用

目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）对人B7-H6基因的激活作用。方法提取人基因组DNA作为模版，聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）获取约2.2 Kb B7-H6基因启动子DNA片段，扩增产物经KpnI和HindⅢ双酶切后插入到pGL3-Basic中构建双荧光素酶报告基因pGL3-B7-H6，测序正确后分别与HBV病毒蛋白S、C和X的真核表达质粒pCMV-HBs、pCMV-HBc和pCMV-HBx共转染HepG2细胞，检测荧光素酶活性变化，然后用不同剂量的pCMV-HBx表达质粒与pGL3-B7-H6共转染HepG2细胞，Western blot检测B7-H6蛋白表达水平。结果本研究克隆出的B7-H6基因启动子片段序列与GenBank中记录一致，pGL3-B7-H6构建成功。pGL3-B7-H6启动子质粒转染HepG2细胞荧光素酶活性较转染空载体pGL3-Basic组显著增加（5.24±1.25 vs. 1.12±0.31，P＝0.005）。pGL3-B7-H6启动子质粒与pCMV-HBx质粒共转染HepG2细胞，荧光素酶活性较对照组显著增加（17.60±3.36 vs. 6.73±1.36，P＝0.001）。Western blot结果显示，HBx蛋白可显著增强B7-H6蛋白的表达。结论本研究发现HBx蛋白可能增强B7-H6基因启动子的转录活性并促进B7-H6蛋白的表达。

IL-32增强NK细胞对HepG22．15细胞的杀伤

目的研究白细胞介素-32（interleukin-32，IL-32）是否增强自然杀伤细胞（naturalkillercells，NKcells）细胞对HepG22．15细胞（插入HBV全基因组，持续表达）的杀伤。方法将IL-32加入HepG22．15细胞培养液中培养48h，然后加入不同浓度的NK细胞与之共培养4h，再加入CCK-8试剂孵育，4h后用酶标仪检测A值，计算NK细胞的杀伤率。接下来将不同浓度的IL-32加入HepG22．15细胞培养液中培养48h．然后加入NK细胞与之共培养4h，再加入CCK．8试剂孵育，检测A值，计算NK细胞的杀伤率。结果IL-32可增强不同浓度的NK细胞对HepG22．15细胞的杀伤，NK细胞与HepG22．15细胞的比例为50：1时杀伤活性最强。IL-32呈剂量依赖性增强NK细胞对HepG22．15细胞的杀伤。结论IL-32可增强NK细胞对HepG22．15细胞的杀伤，可能具有抗HBV的作用及参与HBV感染后的肝损伤。

乙型肝炎病毒抑制Huh7细胞TRIM22表达的研究

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)是否影响肝癌细胞株Huh7细胞TRIM22的表达。方法将干扰素α(IFN-α)加入Huh7细胞培养液中共培养,24 h后实时定量PCR、Western blot,分别在RNA及蛋白质水平检测TRIM22表达。然后用脂质体将HBV表达载体p Blue-HBV及空载体分别转染Huh7细胞,再加入IFN-α共培养,24 h后实时定量PCR、Western blot,分别在RNA及蛋白质水平检测TRIM22表达。用t检验比较组间差异,统计学分析采用统计产品与服务解决方案SPSS 16.0软件。结果 IFN-α可在RNA及蛋白质水平诱导Huh7细胞表达TRIM22。转染p BlueHBV表达载体的Huh7细胞TRIM22表达水平低于转染空载体的细胞。结论 HBV可抑制IFN-α诱导的TRIM22表达,HBV可能通过抑制TRIM22表达而拮抗IFN的抗病毒作用,导致HBV持续感染。

IL-32γ活化Akt通路诱导肝星状细胞LX-2表达MMP

目的探讨IL-32γ诱导肝星状细胞LX-2表达基质金属蛋白酶2(MMP2)及其机制。方法不同浓度(0、10、20μg/L)的IL-32γ蛋白与LX-2细胞共培养,RT-PCR检测细胞MMP2m RNA水平;ELISA检测MMP2蛋白水平,Human Phospho-Akt Immunoassay试剂盒检测活化的Akt水平。不同浓度(0、25、50μg/L)的重组人活化Akt蛋白与LX-2细胞共培养后,ELISA检测MMP2蛋白;不同浓度(0、10、20μmol/L)的Akt抑制剂Perifosine与IL-32γ和LX-2细胞共培养后,ELISA检测MMP2蛋白。3组Akt、MMP2 m RNA及蛋白比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果不同浓度的IL-32γ蛋白与LX-2细胞共培养后,MMP2 m RNA和蛋白水平分别为(0.9±0.4)、(5.5±1.4)、(12.2±2.6)和(53±13)、(234±38)、(523±101)μg/L,呈剂量依赖性升高(LSD-t=5.517,3.952和7.855,4.634;P<0.05)。IL-32γ可诱导LX-2细胞Akt表达,依浓度分别为(86±9)、(287±60)、(650±170)RFUs,呈剂量依赖性升高(LSD-t=5.700,3.489;P<0.05)。重组人活化的Akt蛋白可诱导LX-2细胞MMP2表达,依浓度分别为(54±14)、(277±45)、(550±132)μg/L,呈剂量依赖性升高(LSD-t=8.155,3.387;P<0.05)。不同浓度的Perifosine可抑制IL-32γ诱导LX-2细胞的MMP2表达,MMP2蛋白依浓度分别为(553±86)、(233±28)、(89±12)μg/L,呈剂量依赖性降低(LSD-t=6.130,8.083;P<0.05)。结论 IL-32γ可能通过活化Akt通路诱导肝星状LX-2细胞表达MMP2而参与肝纤维化和肝癌的发生、转移。

肝功能反复异常 小心“自免肝”找上门

近日,王女士在体检中发现肝功能异常。在医生的建议下,经进一步检查竟被查出早期肝硬化!王女士感到十分费解,平常也没觉得哪里不舒服,自己并没有什么不良生活习惯,也没有什么基础病,怎么会这样呢?为了查明病因,王女士做了多项检查,仍然提示肝功能异常,但不是病毒性肝炎,而是确诊为自身免疫性肝炎(简称“自免肝”)。什么叫自免肝呢?让我们一起来看看广州医科大学附属第三医院感染疾病科副主任医师潘兴飞的详细解读。