白细胞介素32γ通过活化核转录因子κB通路诱导LX-2细胞表达基质金属蛋白酶9

目的：研究白细胞介素-32（Interleukin-32， IL-32）可否诱导肝星状细胞LX-2表达基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9， MMP-9）。方法用不同浓度的IL-32γ与LX-2细胞共培养，收集细胞培养上清，用TRizol试剂提取细胞总RNA，用定量 PCR检测MMP-9 RNA表达水平， MMP-9蛋白质表达水平用酶联免疫吸附试验（ enzyme-linked immunosorbent assay， ELISA）试剂盒检测。接下来将Nuclear factor kappa B （ NF-κB）亚基p50、 p65真核表达载体pCMV-p50、 pCMV-p65单独或联合转染LX-2细胞，48 h后收集细胞培养上清，酶联免疫吸附测定（ enzyme linked immunosorbent assay， ELISA）检测MMP-9蛋白质表达水平。将不同浓度的NF-κB抑制剂SN50加入IL-32γ与LX-2细胞共培养的培养液中，48 h后收集细胞培养上清，用ELISA检测MMP-9蛋白质表达水平。结果 IL-32γ可以诱导人LX-2细胞表达MMP-9，且其表达水平随IL-32γ浓度增加而增强； NF-κB亚基p50、 p65可以诱导LX-2细胞MMP-9表达增高； NF-κB抑制剂SN50阻断NF-κB通路可降低IL-32γ诱导的MMP-9表达。结论 IL-32γ通过活化NF-κB通路诱导LX-2细胞表达MMP-9， IL-32可能通过诱导肝星状细胞表达MMP-9参与肝纤维化形成。

IL-32增强NK细胞对HepG22．15细胞的杀伤

目的研究白细胞介素-32（interleukin-32，IL-32）是否增强自然杀伤细胞（naturalkillercells，NKcells）细胞对HepG22．15细胞（插入HBV全基因组，持续表达）的杀伤。方法将IL-32加入HepG22．15细胞培养液中培养48h，然后加入不同浓度的NK细胞与之共培养4h，再加入CCK-8试剂孵育，4h后用酶标仪检测A值，计算NK细胞的杀伤率。接下来将不同浓度的IL-32加入HepG22．15细胞培养液中培养48h．然后加入NK细胞与之共培养4h，再加入CCK．8试剂孵育，检测A值，计算NK细胞的杀伤率。结果IL-32可增强不同浓度的NK细胞对HepG22．15细胞的杀伤，NK细胞与HepG22．15细胞的比例为50：1时杀伤活性最强。IL-32呈剂量依赖性增强NK细胞对HepG22．15细胞的杀伤。结论IL-32可增强NK细胞对HepG22．15细胞的杀伤，可能具有抗HBV的作用及参与HBV感染后的肝损伤。