鼠源乳腺癌多药耐药细胞株的建立及耐药机制的初步研究

目的构建鼠源性乳腺癌5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药细胞株,为研究乳腺癌耐药与体内免疫微环境的关系提供细胞模型。方法通过体外以浓度递增的方法诱导小鼠乳腺癌4T1细胞对5-Fu产生耐药,MTS法确定其耐药性,平板克隆检测其增殖活性,实时定量和半定量PCR检测其中5-Fu代谢相关酶TS、MTHFR、TK、OPRT、DPD及药泵蛋白MDR1、MRP1的表达,通过流式细胞术检测其周期及CD44+CD24-干细胞亚群的比例。结果耐药细胞4T1/5-Fu与4T1细胞相比,4T1/5-Fu细胞对5-Fu、吉西他滨和顺铂耐药的耐药指数(RI)明显升高;5-Fu合成代谢相关酶TK、OPRT表达明显降低(P<0.05),代谢抑制性相关酶TS、MTHFR明显升高(P<0.05),药泵蛋白MDR1、MRP1表达明显升高(P<0.05);流式细胞术结果显示,CD44表达明显升高,肿瘤干细胞群增多。结论成功构建小鼠乳腺癌多药耐药细胞株,耐药发生可能与5-Fu代谢酶类、药泵蛋白表达以及干细胞比例改变相关。

FOXO3a反馈上调人表皮生长因子受体3表达介导HER2^+乳腺癌细胞酪氨酸激酶抑制剂治疗耐受

近年来,酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKI)类药物治疗HER2+乳腺癌进展迅速,但出现治疗耐受仍是迫切需要解决的问题。本研究采用TKI(AEE788、Lapatinib)处理HER2+乳腺癌细胞BT474和SKBR3,发现HER3在mRNA和蛋白质水平上的表达均上调。MTS及克隆形成实验结果显示,siRNA干扰HER3的表达能够显著抑制BT474、SKBR3细胞的增殖,表明干扰HER3可增强细胞对TKI的敏感性。为进一步考察TKI促进HER3表达的可能机制,Western印迹及免疫荧光检测发现,AEE788、Lapatinib能够上调FOXO3a的表达且促进其入核。干扰FOXO3a可逆转TKI对HER3的诱导作用,说明TKI通过激活FOXO3a上调HER3的表达。综上所述,FOXO3a反馈上调HER3表达介导HER2+乳腺癌细胞TKI治疗耐受。这一研究发现,为临床解决TKI治疗耐受提供一定的理论基础。

SRGN诱导乳腺癌细胞EMT改变促进肿瘤侵袭转移

目的研究糖蛋白丝甘蛋白聚糖（SRGN）促进乳腺癌细胞侵袭转移的机制及SRGN表达调控的可能机制。方法运用实时定量PCR和信息检索检测SRGN在淋巴结转移与未转移乳腺癌临床标本中的表达差异；利用慢病毒shRNA干扰及过表达技术，建立稳定降低和过表达SRGN的乳腺癌细胞系MDA-MB-231shRNA及MCF-7-SRGN；体外Transwell实验检测SRGN对乳腺癌细胞侵袭转移能力的影响；Western blot实验检测上皮-间质转化（EMT）相关标志物的改变；最后通过West—ern blot实验检测SRGN可能的表达调控机制。结果SRGN在淋巴结转移的乳腺癌临床标本中表达明显增高，干扰SRGN可抑制肿瘤细胞的侵袭转移，并且SRGN可促进乳腺癌细胞发生EMT改变，TGFβ1可促进SRGN的转录表达。结论SRGN可诱导乳腺癌细胞发生EMT改变，进而促进乳腺癌细胞的侵袭转移。

探讨免疫球蛋白超级家族成员9促进肺腺癌细胞增殖的作用及机制

肺癌是全球发病率与死亡率均位于第一位的恶性肿瘤。肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)大约占整个肺癌的40%。但是,目前对肺腺癌发生发展的机制尚未阐明。TCGA在线数据库GEPIA证实,免疫球蛋白超级家族成员9(immunoglobulin superfamily member 9,IGSF9)在肺腺癌中的平均表达量是6.56,其在正常癌旁组织中的平均表达量是0.55,提示IGSF9在肺腺癌中的表达量是正常癌旁组织的11.93倍。人类蛋白组学数据库也提示,IGSF9在肺腺癌中高表达。通过qRT-PCR检测IGSF9在肺腺癌细胞中的表达量,发现其在A549和H1299细胞中的表达量分别是其在BEAS-2B细胞中的4.17倍和6.6倍。细胞功能实验发现,过表达IGSF9,其LUAD细胞的增殖能力显著增加。平板克隆形成实验发现,在A549细胞中,对照组平板克隆大约有240个,过表达IGSF9后,该组细胞的平板克隆数大约是385个,实验组的克隆数目是对照组的1.60倍(P<0.01)。敲低IGSF9,则LUAD细胞增殖能力明显降低。平板克隆形成实验发现,在H1299细胞中,对照组平板克隆大约有320个,敲低IGSF9后,该组细胞的平板克隆数大约是164个,实验组的克隆数目仅为对照组的51.25%(P<0.01)。生物信息学预测结合后期研究证实,IGSF9可显著抑制叉头蛋白K2(forkhead box protein K2,FOXK2)的表达。MTS实验发现,过表达FOXK2可显著逆转IGSF9对LUAD细胞增殖的促进作用,而敲低FOXK2则可明显补偿敲低IGSF9对LUAD细胞的增殖抑制作用。这些结果提示,IGSF9通过下调FOXK2从而促进LUAD细胞的增殖。

黏蛋白5B上调高迁移率族蛋白组A1促进乳腺癌细胞侵袭转移

目的探讨黏蛋白5B(mucin 5B,MUC5B)抑制乳腺癌细胞侵袭转移的作用及可能的分子机制。方法在多个数据库中统计MUC5B在乳腺癌组织中的表达量,qRT-PCR方法检测MUC5B在正常乳腺上皮细胞和多种乳腺癌细胞中的表达量。在乳腺癌细胞中过表达和敲低MUC5B,transwell实验检测上述细胞的侵袭能力。生物信息学预测结合实验验证MUC5B对高迁移率族蛋白组A1(human high mobilitygroup A1,HMGA1)的调控作用。在乳腺癌细胞中干预MUC5B,同时干预MUC5B和HMGA1,transwell实验检测上述细胞的侵袭能力。结果UALCAN结合The human Protein Altas在线数据库证实MUC5B在乳腺癌组织中的表达量显著高于其在正常组织中的表达量。qRT-PCR结果显示MUC5B在乳腺癌中的表达量远高于其在正常上皮细胞MCF-10A中的表达量。在乳腺癌细胞MCF-7中过表达MUC5B,transwell实验发现MUC5B可明显增加该细胞的侵袭能力;在乳腺癌细胞MDA-MB-231中敲低MUC5B,则该细胞的侵袭能力大大降低。最后,生物信息学结合qRT-PCR和WB实验证实MUC5B可显著上调HMGA1的表达。在MCF-7细胞中,敲低HMGA1可逆转该细胞因MUC5B而增加的侵袭能力;相似的,在MDA-MB-231细胞中,过表达HMGA1可逆转该细胞因敲低MUC5B而减弱的侵袭能力。结论MUC5B通过上调HMGA1促进乳腺癌细胞侵袭。

RP4通过miR-183-5p.1上调FOXO1抑制乳腺癌细胞增殖

近年来,越来越多的证据表明,长非编码RNAs在肿瘤发生发展中发挥重要作用。位于12号染色体的长非编码RNA RP4-816N1. 7(简称RP4)在乳腺癌细胞中的作用未见报道。我们通过实时荧光定量PCR证实,RP4在乳腺癌细胞中的表达量普遍低于其在正常乳腺上皮细胞MCF-10A中的表达量。RP4在MCF-7和MDA-MB-231中表达量分别比其在MCF-10A中的表达量下调21. 57%和91. 33%。过表达RP4可明显抑制乳腺癌细胞增殖。敲低RP4可显著增加乳腺癌细胞的增殖能力。生物信息学预测,RP4可能与miR-183-5p.1结合,且叉头蛋白O1(FOXO1)可能是miR-183-5p.1的潜在靶标。实时荧光定量PCR结果提示,RP4可下调miR-183-5p.1,而miR-183-5p.1也可下调RP4和FOXO1的表达。双荧光素酶报告基因结果证实,miR-183-5p.1可与RP4结合,下调其表达,也能与FOXO1 3’UTR结合,抑制其mRNA和蛋白质水平的表达量。最后,本文通过BrdU实验证实,RP4通过FOXO1抑制乳腺癌细胞的增殖。总之,RP4通过内源性结合miR-183-5p.1,上调FOXO1表达,进而抑制乳腺癌细胞增殖。

m^(6)A修饰调控的LDB2抑制肺腺癌细胞增殖

目的研究LIM域结合蛋白2(LDB2)在肺腺癌中的表达模式及作用。方法从mRNA和蛋白表达数据库中分析在肺腺癌中表达下调基因的交集。通过qRT-PCR、Western blot和免疫组化的方法验证LDB2在肺腺癌中的表达模式。在GEO和TCGA数据库中分析LDB2与肺腺癌患者预后的相关性。在H1299细胞中过表达LDB2,通过细胞计数实验、软琼脂克隆实验及流式细胞术证明LDB2在肺腺癌中的作用。生信预测结合后期MeRIP-qPCR实验证实LDB2转录本上存在m6A结合位点。通过qRT-PCR和Western blot实验检测YTHDC2对LDB2的转录调控。RIP实验验证YTHDC2能否与LDB2转录本结合。结果通过分析TCGA、GEO及CPTAC 3个数据集中在肺腺癌中低表达的差异基因,最终聚焦于LDB2基因。免疫组化结果证实该基因在80例肺腺癌组织中的表达量也显著低于17例正常癌旁组织的表达量。与正常肺上皮细胞16HBE相比,LDB2在肺腺癌细胞中的表达量亦明显降低。生信分析提示高表达的LDB2与肺腺癌患者良好的预后正相关。在H1299细胞中过表达LDB2后,发现LDB2可诱导H1299细胞发生S期阻滞,从而抑制该细胞的增殖能力和软琼脂克隆形成能力。生信预测结合后期MeRIPqPCR实验证实LDB2转录本上存在m6A位点。GEPIA数据库提示YTHDC2在肺腺癌组织中低表达,且与LDB2在肺腺癌中表达正相关(r=0.22,P<0.0001)。在H1299细胞中过表达YTHDC2,可明显增加LDB2的表达。最后,在过表达YTHDC2的H1299细胞中开展RIP实验,定量结果显示LDB2在YTHDC2组的含量是其在IgG组含量的19.35倍,YTHDC2可结合在LDB2转录本上调控其表达。双荧光素酶报告基因实验证实YTHDC2可上调野生型而不是缺失型报告基因载体活性。结论m6A编码器YTHDC2在肺腺癌中上调LDB2的表达。过表达LDB2可明显诱导肺腺癌细胞发生S期阻滞,抑制肺腺癌细胞增殖能力。

丝甘蛋白聚糖促进非小细胞肺癌的侵袭与转移

丝甘蛋白聚糖(serglycin,SRGN)在肿瘤细胞的侵袭与转移中具有广泛的研究前景。本研究报道SRGN与肺癌细胞侵袭与转移能力之间的相关性。首先,通过检测SRGN在正常肺上皮细胞株BEAS-2B及不同侵袭与转移能力的肺癌细胞株95C、95D中的表达差异。利用shRNA干扰技术,在侵袭与转移能力强的95D细胞中建立稳定干扰SRGN表达的95D/sh SRGN的细胞株,并通过RT-q PCR、Western印迹、酶联免疫吸附测定验证其敲除效率。结果显示:干扰SRGN可抑制侵袭与转移性强的95D细胞的侵袭与转移能力,减弱细胞迁移与侵袭等生物学特性,导致上皮标志物上皮细胞钙黏连蛋白(E-cadherin)表达上调,间质标志物纤维连接蛋白1(fibronectin1,FN1)及EMT(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关转录因子锌指E盒结合同源框1(zinc finger E-box binding homeobox 1,ZEB1)表达下调。进一步分析发现,SRGN与上皮细胞钙黏连蛋白表达成负相关(P=-0.25),而与FN1(P=0.12)及ZEB1(P=0.35)表达成正相关,并且SRGN高表达的患者总生存时间明显少于SRGN低表达组(P=0.0077),SRGN与ZEB1同时高表达的患者,总生存时间显著小于SRGN与ZEB1低表达患者(P=0.0005)。研究结果证实,SRGN促进上皮间质转化发生,增强非小细胞肺癌的侵袭与转移能力,为非小细胞肺癌预后提供参考。

长链非编码RNA RP11-214F16.8促进乳腺癌细胞增殖

长链非编码RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)在乳腺癌发生发展中的作用备受瞩目。本研究通过大数据分析发现,lncRNA RP11-214F16.8在乳腺癌组织中的表达量显著高于正常组织,且其表达量与乳腺癌患者预后负相关。因此,本文采用qRT-PCR技术,在收集的临床样本中验证RP11-214F16.8的表达,证实其在乳腺癌组织中相对表达量为5.65±0.72,其在癌旁组织中表达量为2.63±0.35,且RP11-214F16.8的表达量与乳腺癌瘤体大小和临床TNM分期相关。此外发现,RP11-214F16.8在乳腺癌细胞中的表达量高于正常乳腺上皮细胞。在乳腺癌MCF-7细胞中,过表达RP11-214F16.8后,MCF-7细胞的增殖能力显著增强。而在MDA-MB-231细胞中,敲低RP11-214F16.8的表达,获得相反的结果。进一步研究发现,RP11-214F16.8可上调细胞周期蛋白D3、CDK4的表达,而下调p18蛋白表达量,进而加速细胞增殖。总之,RP11-214F16.8在乳腺癌中高表达,且促进乳腺癌细胞增殖,进而推动乳腺癌进程。这一研究发现,将为乳腺癌发生发展的网络机制研究提供新的理论依据。

miRNA-155在TGF-β1诱导的人前列腺癌细胞中的作用

目的:探讨miR-155在转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的人前列腺癌细胞PC3中的生物学作用。方法:TGF-β1处理PC3细胞,相差倒置显微镜下观察细胞形态学变化;通过Transwell试验检测细胞的迁移能力;实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerasechain reaction,qRT-PCR)和蛋白质印迹法检测TGF-β1诱导的PC3细胞纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的表达情况;qRT-PCR检测miR-155的表达水平;干扰miR-155检测TGF-β1诱导的PC3细胞FN的表达及细胞迁移能力的变化。结果:TGF-β1诱导PC3细胞发生形态改变并增强其迁移能力,且FN的表达显著上调;TGF-β1诱导的miR-155表达呈现时间依赖性;干扰miR-155使TGF-β1诱导的FN表达减少,细胞形态及迁移能力在一定程度上发生逆转。结论:miR-155在TGF-β1诱导的前列腺癌细胞PC3中高表达,可能间接上调FN的表达从而促进细胞迁移,可为前列腺癌的治疗提供理论依据。

MUC16促进肺腺癌细胞侵袭转移

目的:探讨MUC16在肺腺癌细胞中的作用。方法:生物信息学预测MUC16在肺腺癌组织中的表达量及对肺腺癌患者预后的相关性。Transwell实验检测干预MUC16表达对肺腺癌细胞H1975侵袭能力的影响。结果:生物信息学提示MUC16在483例肺腺癌中的表达量远高于在347例正常组织中的表达量,且表达量与肺腺癌患者较差的预后呈正相关关系。在肺腺癌细胞H1975中高表达MUC16,该细胞的侵袭能力明显增加。而敲低MUC16则显著降低H1975细胞的侵袭能力。结论:MUC16在肺腺癌中高表达,与患者较差的预后呈正相关,且MUC16促进肺腺癌细胞侵袭转移。

LINC00337促进肺腺癌细胞增殖

近年来,长非编码RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)在肺腺癌发生发展中的作用备受关注。生物信息学预测,长非编码RNA337(LINC00337)在肺腺癌组织中的表达量显著高于其在正常组织中的表达量,且其高表达与患者较差的预后正相关。qRT-PCR结果发现,LINC00337在肺腺癌细胞中的表达量也高于正常肺上皮细胞:LINC00337在肺腺癌细胞H1975和A549中的表达量分别是其在正常肺上皮细胞BEAS-2B中的2. 6和10. 3倍。在肺腺癌细胞中,上调LINC00337将增加细胞周期蛋白E2 (cyclin E2,CCNE2)的表达,进而促进该细胞增殖;相反,敲低LINC00337将抑制CCNE2的表达,最终阻止肺腺癌细胞增殖。生物信息学预测结合染色质沉淀实验证实,信号转导和活化转录因子1(signal transducer and activator of transcription 1,STAT1)可结合在CCNE2启动子上,下调其表达。在H1975细胞中,过表达STAT1可下调57. 76%的CCNE2。在此细胞中,同时过表达STAT1和敲低LINC00337,发现该组细胞的CCNE2表达量增加1. 62倍。相反,在A549细胞中敲低STAT1,发现CCNE2可增加6. 48倍表达量。但在此细胞中,同时敲低STAT1和过表达LINC00337,则发现该组细胞的CCNE2表达量无变化。上述结果提示,LINC00337对CCNE2的调控需要STAT1的存在。总之,LINC00337通过转录因子STAT1调控CCNE2表达促进肺腺癌细胞增殖。

CLDN4促进胃癌细胞增殖和侵袭能力

目的:探讨CLDN4在胃癌发生发展中的作用。方法:采用CLDN4siRNA转染SGC7901胃癌细胞,通过qRT-PCR验证干扰效果。通过MTS检测CLDN4siRNA转染后胃癌细胞的增殖情况。通过transwell细胞侵袭实验检测细胞的侵袭能力变化。结果:在SGC7901细胞中转染CLDN4siRNA后,可显著降低CLDN4表达水平,说明干扰效率高。检测转染CLDN4siRNA及对照细胞的细胞增殖情况发现,转染CLDN4siRNA细胞较对照细胞增殖速度明显减慢,差异有统计学意义(P<0.05)。随后通过transwell细胞侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力,发现转染CLDN4siRNA细胞的侵袭能力显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CLDN4能促进胃癌细胞增殖、侵袭能力。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂对Her2阳性乳腺癌细胞侵袭转移的抑制作用和机制

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275和线性肟酸（SAHA）对HER2阳性乳腺癌细胞系BT474和SKBR3侵袭转移能力的影响和可能的作用机制。方法采用4μmol／LMS-275、50μmol／LSAHA分别处理BT474及SKBR3细胞，对照组加入适当体积的PBS，四唑氮化合物（MTS）法检测细胞存活率，流式计数检测细胞凋亡率，Transwell实验检测细胞侵袭转移能力，Western blotting检测相关蛋白表达水平。结果SAHA、MS-275处理的BT474细胞存活率分别为（39±11）％、（54±8）％，SKBR3细胞存活率分别为（62±6）％、（71±9）％；SAHA、MS-275处理BT474细胞的凋亡比例分别为对照组的（8．46±0．29）倍和（4．15±0．71）倍，SKBR3细胞的凋亡比例分别为对照组的（5．51±1．24）倍和（4．04±0．69）倍；BT474细胞对照组、SAHA处理组、MS-275处理组迁移至下室细胞数分别为184．7±18．8、104．3±7．1、131．3±9．1，SKBR3细胞对照组、SAHA处理组、MS-275处理组迁移至下室的细胞数分别为60．0±16．7、14．3±6．5、34．3±8．7；Western结果显示SAHA、MS-275能够抑制BT474、SKBR3细胞中Vimentin、Her2、β-eatenin、HDAC1的表达，上调H3的乙酰化水平及E-eaherin的蛋白表达水平。结论SAHA和MS-275抑制HER2阳性乳腺癌细胞系BT474和SKBR3侵袭转移作用，可能与其抑制Vimentin、Her2、β—catenin，上调E—eaherin表达有关。

miR-126介导的IGF2／IGF1R／IRS1信号活化促进ErbB2阳性乳腺癌细胞对Herceptin的耐受

目的探索胰岛素样生长因子也（IGF2）／胰岛素样生长因子-1受体（IGF1R）／胰岛素受体底物-1（IRSI）信号通路在ErbB2阳性乳腺癌细胞对Herceptin耐药中的作用。方法qRT-PCR和western blot技术检测各细胞中的IGF2、IGF1R和IRS1的表达及其活化情况。荧光素酶报告基因验证miR-126对IRS1的靶向调控作用。在SKBR3／pool2细胞中分别抑制IGF1R活性、干预IRSl或miR-126表达，四唑氮化合物（MTS）检测该类细胞对Herceptin的敏感性。结果相比于ErbB2阳性的亲本乳腺癌细胞SKBR3，在Herceptin耐受SKBR3／pool2中IGF2／IGF1R／IRS1信号通路活化，表现为IGF2、IGF1R和IRS1表达上调，且伴有IGF1R和IRS1活化；在SKBR3／pool2中使用IGF1R抑制剂PPP（picropodophyllin）可抑制该细胞IGF1R／IRS1信号活化，且增加该细胞对Herceptin的敏感性。用shRNA干扰IRS1可增加SKBR3／pool2细胞对Herceptin的敏感性。生物信息学预测结合报告基因实验证实miR-126可靶向调控IRS1。在SKBR3／pool2细胞中过表达miR-126可明显增加该细胞对Herceptin的敏感性。结论IGF2／IGF1R／IRS1信号通路参与介导ErbB2阳性乳腺癌细胞对ErbB2靶向药物Herceptin的耐受。

FOX03a通过下调VEGF—A抑制乳腺癌增殖和侵袭转移

目的探讨叉头转录因子O3a（FOXO3a）通过下调血管内皮生长因子（VEGF）-A抑制乳腺癌细胞增殖和转移的作用。方法使用SiRNA干扰乳腺癌MCF-7和MDA—MB-231细胞中FOXO3a的表达，采用细胞增殖曲线和细胞克隆法检测干扰后细胞增殖改变；采用细胞划痕实验和transwell实验检测干扰后细胞迁移能力的改变，通过realtime RT—PCR和Western blot技术检测干扰后细胞中VEGF-A的mRNA和蛋白表达的改变，检测20例乳腺癌患者的乳腺癌组织及其配对癌旁正常乳腺组织中FOX03a和VEGF—AmRNA表达情况。结果干扰FOXO3a后MCF-7和MDA—MB-231细胞的增殖能力及侵袭转移能力增强（P〈0．05），且VEGF—A的mRNA和蛋白表达均上调；20例乳腺癌组织中有15例（75％）FOXO3a表达低于对应癌旁组织，VEGF—A表达高于对应癌旁组织，FOXO3a和VEGF—A表达呈高度负相关（r=-0．458，P〈0．01）。结论FOXO3a对乳腺癌细胞增殖和侵袭转移具有抑制作用，该作用可能与其抑制VEGF—A表达有关。

ErbB3、IGF1R在乳腺癌Herceptin耐受中的作用及机制

目的探讨与表皮生长因子受体3（ErbB3）、胰岛素样生长因子I受体（IGFIR）在乳腺癌Herceptin耐受中的作用机制。方法在Hereeptin敏感的ErbB2阳性乳腺癌细胞株SKBR3、BT474中外源性增加HRG（表皮生长因子受体ErbB3配体）、IGF2（胰岛素样生长因子I受体IGF1R配体）后，用四唑氮化合物（MTS）法检测细胞对Herceptin的敏感性；在Herceptin耐受的乳腺癌细胞SKBR3／POOL2、BT474／HR20中采用HRG、IGF2中和抗体阻断其与相应的受体结合，MTS法检测细胞对Herceptin的敏感性。在ErbB2阳性乳腺癌细胞BT474中外源性加入HRG、IGF2，免疫共沉淀及蛋白印迹检测与ErbB2蛋白结合的ErbB3及IGF1R蛋白表达量的改变。结果在Herceptin敏感的乳腺癌细胞中，HRG、IGF2处理组较对照组细胞对Herceptin的敏感性明显下降；而在Herceptin耐受的乳腺癌细胞中，HRG、IGF2抗体处理组较对照组对Herceptin的敏感性增加。在ErbB2阳性乳腺癌细胞中加入HRG、IGF2后，与ErbB2结合的ErbB3以及IGF1R的表达增加。结论ErbB2／ErbB3及ErbB2／IGF1R异源二聚体的形成增加了乳腺癌对ErbB2靶向药物Herceptin的耐受。

miR-23b抑制三阴性乳腺癌增殖及迁移

目的探讨miR-23b对三阴性乳腺癌增殖、迁移的影响及可能的作用机制。方法实时荧光定量PCR检测miR-23b在三阴性乳腺癌组织的表达情况;构建稳定表达miR-23b的三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231/miR-23b、BT549/miR-23b,采用细胞增殖实验、划痕实验和Transwell迁移实验检测miR-23b对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移的影响;双荧光素酶报告基因检测miR-23b对叉头框C2(FOXC2)的靶向调控作用;实时荧光定量PCR与Western blot检测miR-23b对FOXC2基因表达水平的影响。结果 miR-23b在乳腺癌组织中下调表达,且在三阴性乳腺癌组织中表达显著低于非三阴性乳腺癌; miR-23b可抑制MDA-MB-231和BT549细胞的增殖和迁移;双荧光素酶实验证实miRNA-23b直接靶向FOXC2 3'-UTR,进而抑制FOXC2的mRNA和蛋白的表达。结论 miR-23b靶向调节FOXC2的表达抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖与迁移。