脂质体介导核因子-κB诱捕物寡聚脱氧核苷酸对重症急性胰腺炎大鼠胰腺炎症因子mRNA表达和胰腺损伤的影响

目的:探讨脂质体(liposome)介导核因子-κB (nuclear factorκB,NF-κB)诱捕物(decoy)寡聚脱氧核苷酸(ODN)对重症急性胰腺炎大鼠胰腺NF-κB活性及受其调控炎症因子基因mRNA表达和胰腺损伤的影响．方法:除假手术组(n=10)外,其余SD大鼠以牛磺胆酸钠(STC)诱导建立重症急性胰腺炎模型后,分别于建模后1 h静脉注射裸ODN(n =10)、脂质体／decoy ODN复合物(n=10)、脂质体／scrambled ODN复合物(n=10)和生理盐水(n=10),注射4h应用电泳迁移率变动分析(EMSA)NF-κB的活性,利用逆转录－聚合酶链反应(RT-PCR)法检测胰腺组织ICAM－1,IL－1α,IL-2,TNF-α,VCAM-1 mRNA表达,同时检测血淀粉酶、胰腺组织湿／干重比率和胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)．结果:EMSA显示,脂质体／decoy ODN复合物组NF-κB活性明显低于生理盐水组、脂质体／scrambled ODN复合物组和裸ODN组,均有显著性差异(P<0．05)．RT-PCR结果显示,脂质体／decoy ODN复合物组ICAM-1,IL-1α．IL-2,TNF-α和VCAM-1 mRNA表达低于生理盐水组、脂质体／scrambled ODN复合物组和裸ODN组,均有显著性差异(ICAM-1:0．75±0．13 vs 1．39±0．15,1.37±0．16,1.32±0．17, P<0．05;IL-1α:0．64±0．09 vs 1.34±0．20．1．30±0．14,1．25±0．20,P<0．05;IL-2:0．23±0．08 vs 0．74±0．13,0．71±0．12,0．69±0．14,P<0．05; TNF-α:0．41±0．13 vs 1．30±0．17,1．26±0．17, 1．23±0．20,P<0．05;VCAM-1:0．21±0．06vs 0．68±0．13,0．69±0．15,0．63±0．13,P<0．05)．与生理盐水组、脂质体／scrambled ODN复合物组和裸ODN组相比,脂质体／decoy ODN复合物组淀粉酶、胰腺组织湿／干重比率和胰腺组织MPO活性显著性降低(淀粉酶:5093 1．85±22432．15 nkat／L vs 188024．26±38659．56．188412．68±37988．26,183119．95±33636．23 nkat／L,all P<0．05;湿／干重比率:5．76±0．20 vs 6．77±0．18,6．72±0．18,6．35±0．12．P<0．05; MPO活性:46．68±3．00 nkat／g vs 99．02±2．50．98．1 9±2．83,98．52±2．50 nkat／g,P<0．05)．结论:NF-κB decoy ODN可特异性抑制胰腺NF-κB活性及其调控的炎症因子ICAM-1, IL-1α,IL-2,TNF-α和VCAM-1 mRNA的表达,减轻胰腺损害．

前S2区突变LHBs与C53蛋白相互作用对HepG2细胞生物学功能的影响

目的明确肝癌细胞系HepG2中前S2区突变乙型肝炎表面抗原大蛋白（hepatitis Bvirus large surface protein，LHBs）与C53蛋白相互作用对细胞生物学功能的影响。方法分别构建pc—MV-5a·pres2LHBs和pCDNA-4-C53质粒，共同转染肝癌细胞系HepG2后，分别检测其相互作用对Chkl活性的影响；BrdU法细胞增殖检测明确其对细胞有丝分裂及增殖的影响。结果成功构建pc—MV-5a—pres2LHBs和pCDNA-4-C53质粒；其在细胞内的相互作用增加细胞Cdkl活性并促进细胞的增殖和有丝分裂过程。结论肝癌细胞系HepG2内pres2LHBs及C53的相互作用对细胞生物学功能存在影响，提示可能与HBV后肝癌的发病机制相关。