与人体肥胖相关的神经肽Y受体Y5基因的克隆及序列分析

目的克隆与肥胖相关的人神经肽Y受体Y5（NPYSR）基因，并鉴定该克隆基因序列的正确性。方法从人的脂肪组织中提取总RNA并进行反转录，以此为模板用PCR扩增NPYSR基因的eDNA，然后与pET28a＋载体重组，筛选阳性克隆和DNA序列分析鉴定，测序后与GeneBank中NPY5R基因进行同源性比较和序列分析。结果PCR扩增出一个1300bp左右的DNA片段，与载体重组和DNA序列分析鉴定，DNA序列分析显示克隆的DNA片段是人NPY5R基因，且所克隆的基因共编码445个氨基酸，分子量为50KD，与GeneBank中NPYSR基因序列同源性达100％。结论克隆的人NPYSR基因与GeneBank中NPYSR序列完全一致，通过对其相关生物学信息的明确分析，为进一步应用分子生物学技术深入研究NPYSR与人体肥胖发生、发展及转化等相关作用机制及应用该基因进行其基因蛋白表达奠定了基础。

与人体肥胖相关的神经肽Y受体Y2基因的克隆及序列分析

目的克隆与肥胖相关的人神经肽Y受体Y2（NPY2R）基因，并鉴定该克隆基因序列的正确性。方法从人的脂肪组织中提取总RNA并进行反转录，以此为模板用PCR扩增NPY2R基因的eDNA，然后与pET28a＋载体重组，筛选阳性克隆和DNA序列分析鉴定，测序后与GeneBank中NPY2R基因进行同源性比较和序列分析。结果PCR扩增出一个1100bp左右的DNA片段，与载体重组和DNA序列分析鉴定，DNA序列分析显示克隆的DNA片段是人NPY2R基因，且所克隆的基因共编码381个氨基酸，分子量为4．2kD，与GeneBank中NPY2R基因序列同源性达100％。结论克隆的人NPY2R基因与GeneBank中NPY2R序列完全一致，为进一步应用分子生物学技术深入研究NPY2R与人体肥胖发生、发展及转化等相关作用机制及应用该基因进行其基因蛋白表达奠定了基础。

与人体肥胖相关的神经肽Y受体Y1基因的克隆及序列分析

目的克隆与肥胖相关的人神经肽Y受体Y1（NPY1R）基因，并鉴定该克隆基因序列的正确性。方法从人的脂肪组织中提取总RNA并进行反转录，以此为模板用PCR扩增NPY1R基因的eDNA，然后与pET28a＋载体重组，筛选阳性克隆和DNA序列分析鉴定，测序后与GeneBank中NPY1R基因进行同源性比较和序列分析。结果PCR扩增出一个1100bp左右的DNA片段，与载体重组后DNA序列分析鉴定，DNA序列分析显示克隆的DNA片段是人NPY1R基因，且所克隆的基因共编码384个氨基酸，分子量为44KD，与GeneBank中NPY1R基因序列同源性达100％。结论克隆的人NPY1R基因与GeneBank中NPY1R序列完全一致，为进一步应用分子生物学技术深入研究NPY1R与人体肥胖发生、发展及转化等相关作用机制及应用该基因进行其基因蛋白表达奠定了基础。