末梢血降钙素原检测的临床价值分析

目的探讨末梢血全血和静脉血血清样本降钙素原(PCT)检测结果的一致性,为末梢血全血PCT检测结果应用于临床提供试验依据。方法选取2016年1-3月广东省第二人民医院收治的49例疑似感染患者作为研究对象,所有患者均采集末梢血、静脉血行PCT检测,通过直接比较、计算结果相对偏差等方法判断两种类型标本检测结果的一致性。结果末梢血全血、静脉血血清等两种类型标本之间PCT检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。以末梢血全血PCT检测结果为x轴,静脉血血清PCT检测结果为y轴,两者之间回归方程为y=0.834x+0.301,相关系数r=0.995 0(P<0.05)。在0.5ng/mL和2.0ng/mL两个医学决定水平处,末梢血、静脉血两种类型样本之间PCT检测结果符合率分别为100.0%和98.0%。结论末梢血全血、静脉血血清之间PCT检测结果具有较高的一致性,末梢血样本检测PCT可以应用于临床。

cTnI-C质控物制备与评价

目的:研制人心肌肌钙蛋白I-C(cTnI-C)质控物,并评价cTnI-C质控物的免疫反应性、均一性和稳定性。方法:使用重组的cTnI-C复合蛋白制备质控品,筛选合适基质和冻干保护剂,获得稳定的cTnI-C质控物。结果:胎牛血清基质更有利于cTnI-C质控物的稳定,添加3%海藻糖可显著提高cTnI-C质控物的热稳定性,质控物瓶间均一性无显著差异(F<2.39),37℃加速条件下可保存14 d,2~8℃贮存有效期为13个月,复溶后在2~8℃下可保存7 d。结论:本研究制备的cTnI-C质控物的免疫反应性、均一性和稳定性良好,可作为cTnI检测系统的校准物和质控物原料,提高临床实验室cTnI检测质量。

重组降钙素原的原核表达及在质控品中的应用研究

目的构建重组降钙素原(PCT)原核表达系统,探索超声裂解对重组PCT蛋白稳定性的影响,为PCT质控品的开发与应用提供参考。方法通过基因工程方法构建PCT表达质粒,利用大肠杆菌原核表达系统经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组PCT蛋白,分析其在三种不同免疫检测系统(罗氏cobas、梅里埃Vidas及天宝颂原FIA-T-01)中的免疫反应性,比较不同超声裂解功率对重组PCT蛋白稳定性及提取产率的影响,以荧光免疫检测系统评估质控品瓶间均一性及在2~8℃、37℃条件下的保存稳定性。结果成功构建了PCT-pET32a原核表达载体,重组PCT蛋白经IPTG诱导高效表达,分子量约35×10^(3)Mr;超声时长20 min(超声3 s、间断2 s和功率120 W)裂解时,对重组PCT蛋白的稳定性影响最小,产量较高。以此工艺制备的质控品在三种主流PCT免疫检测系统中均表现出良好的免疫反应性,瓶间均匀性差异无统计学意义(F<2.39)。质控品在2~8℃贮存15个月、37℃贮存7 d性能稳定。结论超声裂解工艺会影响重组PCT蛋白的稳定性,制备的重组PCT蛋白可广泛用于不同检测系统质控检测,为临床检测质控提供稳定廉价的原料来源。