神经发育评估与早期发展

神经发育评估的主要目的在于早期发现延迟的或异常的发育,为没有通过发育筛查的儿童提供诊断性发育评估及可能的病因学诊断,以便:帮助儿童达到最大化的潜能;提供及时的治疗或干预(尤其对听力及视力损害);为可能需要特殊需求帮助的儿童提供尽可能早的照顾及管理。掌握生长发育的一般规律、发育里程碑(技能领域:粗大运动,精细运动,视力,语言与听力,社会适应性;中位数年龄与极限年龄)、发育流、发育监测与筛查及发育多样性的概念是神经发育评估的基础。神经发育评估始于综合病史获得,包括出生史、医学史、发育史、行为史、教育史、社会史及家族史;综合体格检查包括生长发育参数评估、一般体格检查及神经学评估;观察与引出被评估者相关发育技能与行为是评估过程中的一个挑战性组成部分。异常发育的诊断性诠释采用延迟、偏离及分离原则。神经发育评估应该产生一个诊断性总结、一个病因学假设以及一个早期转介与干预策略。

发育行为障碍的早期识别

发育行为障碍是儿科常见的慢性疾病之一,可影响儿童的终生健康及生活质量。早期识别及早期干预可阻止或改善发育行为问题或障碍。尽管目前已开展正常人群特定年龄的发育筛查,但仍难识别3岁以下儿童轻度发育行为障碍,而其恰是更易从早期干预中获益的人群。发育行为障碍诊断的挑战性、标准化筛查工具的使用率以及筛查者的专业程度,是影响发育行为障碍早期识别的主要因素。发育行为障碍的早期识别依赖早期监测与筛查,监测分为结构化监测(使用标准化工具定期筛查)与非结构化监测(主观印象及随机观察),结构化监测对发育行为障碍的早期识别显著优于非结构化监测。改善发育行为障碍早期识别的措施:发育行为障碍的结构化监测与筛查成为常规的儿童保健及发育行为儿科体系的重要组成;使用标准化的发育行为筛查工具;促进相关从业人员对发育行为障碍相关知识与筛查技能提升;普及父母/照看者对发育行为障碍的认知;医教结合,早期识别,早期干预。

钙拮抗剂改善铁诱导的小鼠神经干细胞系C17.2细胞凋亡

背景脑中铁超负荷诱导氧化损伤见于出血性脑卒中和神经退行性障碍,神经干细胞是治疗这种障碍的充满前景的干预策略。铁超负荷对干细胞影响及探寻保护策略是亟待解决的问题。钙通道扮演铁超负荷时进入神经细胞的替代通道,推测钙拮抗剂可改善铁超负荷对神经干细胞的毒性作用。目的 探讨铁超负荷对小鼠神经干细胞系C17.2细胞的细胞活性、凋亡及细胞外信号调节激酶（ERK）磷酸化的影响;研究钙拮抗剂对铁诱导C17.2细胞损伤是否具有保护作用。方法以小鼠神经干细胞系C17.2细胞为细胞模型。XTT比色法检测细胞活性;Annexin V/碘化丙啶（PI）,活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）-3及线粒体膜电位（JC-1）流式细胞仪检测细胞凋亡;抗磷酸化-ERK1/2流式细胞仪检测ERK磷酸化水平。结果 铁超负荷呈浓度（0.15～1.80mmol/L）及时间（24~48h）依赖趋势减少C17.2细胞活性,诱导细胞凋亡,caspase-3活化及线粒体损伤;钙拮抗剂（氟桂利嗪或尼莫地平）可以显著改善0.60mmol/L三氯化铁超负荷诱导的C17.2细胞早期凋亡细胞百分数及总死亡细胞百分数,减少caspase-3活化及线粒体损伤,增加细胞活性（均P〈0.05）。0.60mmol/L超负荷铁可以显著诱导C17.2细胞ERK磷酸化,钙拮抗剂（氟桂利嗪或尼莫地平）显著抑制铁超负荷所诱导的C17.2细胞ERK磷酸化。结论 铁超负荷可诱导小鼠神经干细胞系C17.2细胞ERK磷酸化,导致线粒体介导的凋亡。钙拮抗剂可抑制上述过程,改善铁诱导的C17.2细胞凋亡。

钙拮抗剂改善铁诱导的大鼠胚胎海马神经干细胞凋亡

目的探讨钙拮抗剂对铁诱导的原代神经干细胞损伤是否具有保护作用。方法以大鼠胚胎(E17.5)海马神经干细胞(hNSC)为细胞模型。首先鉴定hNSC的神经干细胞特征,确认其表达L型钙通道Cav1.2基因mRNA及相关蛋白;然后分别给予细胞如下处理:1对照;2加铁(0.9mmol/L铁剂);3加钙拮抗剂(氟桂利嗪0.1μmol/L或尼莫地平10nmol/L);4钙拮抗剂+铁,观察钙拮抗剂对铁诱导的hNSC细胞活性及凋亡的影响;最后观察铁超负荷对细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的影响及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/ERK激酶(MEK)抑制剂U0126对铁诱导细胞活性的影响。免疫组化法鉴定细胞神经干细胞特征;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Cav1.2基因mRNA表达,免疫组化法及流式细胞仪法检测蛋白表达;XTT比色法检测细胞活性;Annexin V/碘化丙啶(PI)流式细胞仪检测细胞凋亡;抗磷酸化-ERK1/2流式细胞仪检测ERK磷酸化水平。结果 hNSC呈现典型神经干细胞特征,表达Cav1.2基因mRNA(158bp)及相关蛋白;钙拮抗剂可以显著增加临床相关浓度(0.9mmol/L)铁超负荷诱导的hNSC的细胞活性(尼莫地平,P<0.01),以及减少细胞凋亡;临床相关浓度铁超负荷可以诱导hNSC ERK磷酸化,MEK抑制剂U0126可显著增加铁损伤hNSC的细胞活性(P<0.01)。结论钙拮抗剂改善铁诱导的大鼠胚胎hNSC凋亡,可能通过抑制ERK磷酸化过程。