小鼠皮肤脓肿模型构建及多枝雾水葛的药效评价

目的建立动物皮肤感染脓肿模型评价指标体系,筛选优质金黄色葡萄球菌感染小鼠皮肤脓肿模型,并通过多枝雾水葛抗皮肤感染药效评价验证模型。方法在调研文献和咨询专家的基础上,利用层次分析法建立皮肤感染脓肿模型的综合评价指标体系,将小鼠分成4组,包括对照组,金黄色葡萄球菌高、中、低浓度组,观察记录19 d,综合评价小鼠皮肤脓肿模型;将筛选出的最佳小鼠皮肤感染脓肿模型运用于多枝雾水葛抗皮肤感染药效评价。结果所构建的动物皮肤感染脓肿模型评价指标体系比较全面,指标权重增强了评价的客观性;小鼠皮下注射1×10^13 cfu·L^-1金黄色葡萄球菌菌液0.1 mL建立的脓肿模型成功率高、稳定性好,综合评分最高;多枝雾水葛软膏可有效促进脓肿消退,药物组脓肿体积明显减小,皮肤细菌含量明显降低,炎症反应减轻。结论该实验成功构建了动物皮肤感染脓肿模型评价指标体系,优选的小鼠皮肤脓肿模型为进一步研究皮肤感染疾病和治疗药物提供了可靠的动物模型,多枝雾水葛软膏具有抗皮肤感染作用。

稳定表达TRPA1通道的HEK-293T细胞模型的建立

目的建立稳定表达TRPA1的HEK-293T细胞模型,并鉴定模型构建是否成功。方法构建TRPA1真核表达质粒,采用脂质体转染法将其转入HEK-293T细胞中,经G418筛选稳定表达株,采用RT-PCR、免疫组化技术,检测HEK-293T细胞TRPA1基因的转录和蛋白的表达。结果经酶切、测序证明,TRPA1基因的真核重组表达质粒已成功构建;PCR、免疫组化检测结果表明,将此重组质粒转入HEK-293T细胞可稳定表达TRPA1基因。结论成功构建了能稳定表达TRPA1通道的HEK-293T细胞株,为体外研究TRPA1生理病理功能和筛选相关TRPA1通道调节剂奠定了基础。

基于层次分析法的红色毛癣菌感染豚鼠模型评价

目的建立红色毛癣菌感染豚鼠模型的评价指标体系,综合评价不同的造模方法,优选红色毛癣菌皮肤感染动物模型。方法通过文献调研和专家咨询确定模型评价指标,利用德尔菲法和层次分析法计算出各指标权重,建立红色毛癣菌感染豚鼠模型的综合评价指标体系,进一步以此体系综合评价多种红色毛癣菌皮肤感染动物模型,优选理想的动物模型。结果实验结果确认该评价体系良好;接受免疫抑制剂处理并重复接种红色毛癣菌的动物模型质量较佳,成功率更高。结论本研究采用层次分析法建立的评价指标体系清晰、简便,优选的红色毛癣菌皮肤感染动物模型适合推广用于抗真菌药的药效学评价。

鼻窦灌注液对家兔慢性鼻窦炎模型炎性因子的影响

目的研究鼻窦灌注液对慢性鼻窦炎家兔模型的治疗作用及其抗炎机制。方法采用改良造模方法建立慢性鼻窦炎家兔模型,设立空白组、假手术组、模型组、阳性组及鼻窦灌注液低、中、高剂量组(1.2、2.4、4.8 g/kg)。在造模和给药期间观察动物鼻窦炎症状评分。给药4周后,HE染色观察鼻黏膜组织形态学变化,ELISA法检测血清IL-6、IL-8、TNF-α、COX-2水平,RT-PCR法测定鼻黏膜COX-2、NF-κB mRNA表达。结果与模型组比较,鼻窦灌注液各剂量组改善家兔症状评分值及鼻黏膜组织的形态学变化,降低血清中IL-6、IL-8、TNF-α、COX-2水平以及鼻黏膜COX-2及NF-κB mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。结论鼻窦灌注液对慢性鼻窦炎有较好的治疗作用,其机制可能与抑制NF-κB信号通路,下调COX-2的表达,抑制炎性因子生成有关。

金线莲乙醇提取物对自然衰老小鼠抗衰老作用的研究

目的:研究金线莲乙醇提取物对自然衰老小鼠的抗衰老作用。方法:选取60只12月龄昆明小鼠,按体质量随机分为模型组、维生素E阳性对照组及金线莲乙醇提取物低、中、高剂量组。各组灌胃给药,模型组给予等体积生理盐水,1次/d,连续4 w,每周测1次小鼠体质量。连续灌胃给药3 w后,利用Morris水迷宫评估小鼠空间学习与记忆能力。第4周后处死,采用HE染色法观察小鼠海马组织病理学变化;测定小鼠脑组织中MDA、SOD、GSH-Px、ACh-E、MAO水平,皮肤中CAT、HYP水平及肝组织中AGEs水平。结果:与模型组比较,给药期间小鼠体质量差异无统计学意义;金线莲乙醇提取物可显著缩短自然衰老小鼠逃避潜伏期及到达平台路程,同时改善海马神经细胞的固缩深染;显著降低脑组织MDA、ACh-E、MAO水平,并显著增强抗氧化酶(SOD、GSH-Px)活性;显著提高皮肤中CAT、HYP水平;并显著降低肝脏中AGEs水平。结论:金线莲乙醇提取物具有一定抗衰老作用,能改善自然衰老小鼠的学习与记忆能力和海马神经细胞病变,其机制可能与提高机体抗氧化酶活性及降低氧化物水平有关。

非酒精性脂肪肝药物治疗靶点及药物研究进展

非酒精性脂肪肝是最常见的慢性肝病之一,全球发病率高达25%。其中非酒精性脂肪肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)可导致肝硬化和肝癌的发生,是终末期肝病和肝移植的主要原因之一。NASH发病机理复杂,目前尚无有效药物。因此,巨大的市场需求使NASH新药研发成为全球制药公司追逐的热点。目前在研的新型治疗药物主要针对代谢紊乱、氧化应激、炎症、细胞凋亡、肠道微生物群紊乱及纤维化等NASH相关发病机制,并有多个针对不同靶点的新药处于临床后期研究阶段,这些进展将为NASH提供新的治疗手段。本文总结了NASH发病机制及相关药物,并重点综述潜在的NASH治疗靶点及药物研究进展。

无标记小分子探针技术与中药靶点发现

靶点的确定是阐明中药作用机制的核心,是构建化学成分与药效作用相关性的关键。鉴于中药的多样性、化学成分的复杂性,传统的靶点筛选方法有所局限,靶点发现已成为中药机制研究的瓶颈。无标记小分子探针技术是化学蛋白组学领域的新兴技术,其突出特点为无需对小分子成分进行结构修饰与改造,普适于复杂的中药化学成分,同时该方法基于蛋白质组进行靶点筛选,利于发现中药作用的新靶点、新途径。鉴于该方法在中药研究中的应用潜力,该文综述了其分析原理与应用现状,总结了其一般性分析步骤,以促进该方法在中药化学成分靶点阐明中的应用。

多枝雾水葛凝胶膏剂抗皮肤感染的药效学研究

目的:研究多枝雾水葛凝胶膏剂(Pouzolzia zeylanica var.microphylla gel,PZG)对皮肤感染性疾病的治疗作用。方法:建立金黄色葡萄球菌诱导的小鼠皮下脓肿模型和大鼠皮肤创伤性感染溃疡模型,通过检测体质量、皮肤脓肿体积或溃疡面积愈合率、皮肤细菌逆培养和局部皮肤病理形态、羟脯氨酸、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-10(interleukin-10,IL-10)含量等指标,考察PZG对感染性皮下脓肿和皮肤溃疡的治疗作用。结果:PZG能显著缩小皮下脓肿体积,提高皮肤溃疡面积愈合率,且有一定的量效关系;PZG可抑制皮肤感染部位的细菌生长,改善局部皮肤病理形态;PZG可降低溃疡部位TNF-α和IL-10水平,增加组织中羟脯氨酸的含量,促进溃疡愈合。结论:中药有效部位制剂PZG具有良好的抗皮肤感染作用,机制可能与其综合的抗菌、抗炎作用有密切关系。