siRNA介导的eIF3b基因沉默抑制乳腺癌细胞MCF-7的侵袭和迁移

目的:探讨siRNA介导的eIF3b基因沉默对乳腺癌细胞MCF-7侵袭和迁移能力的影响。方法:设计eIF3b基因的小分子干扰RNA(siRNA)片段,脂质体介导转染入乳腺癌细胞株MCF-7,转染分3个组:I组(空白对照组)、II组(转染非特异性对照组)和III组(转染eIF3b-siRNA组)。应用qRT-PCR和Western blotting免疫印迹法检测转染前后eIF3b基因mRNA和蛋白表达水平;运用Matrigel胶模型细胞迁移和侵袭实验检测MCF-7细胞迁移和侵袭能力的变化。结果:与I组(1.09±0.19)、II组(1.05±0.17)相比,III组eIF3b蛋白表达水平(0.45±0.06)明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05),I组和II组eIF3b蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。III组eIF3b mRNA相对表达水平为0.54±0.08,明显低于I组(1.12±0.16)和II组(1.08±0.18),差异有统计学意义(P<0.05),I组和II组eIF3b mRNA表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。细胞迁移实验中,III组细胞明显少于I组和II组(P<0.05);细胞侵袭实验中,III组穿过人工基底膜的细胞明显少于I组和II组(P<0.05)。结论:下调eIF3b表达可明显抑制乳腺癌细胞侵袭和迁移。

结肠癌及癌前病变中APRIL和caspase-3蛋白的表达及其作用

目的探讨结肠癌及癌前病变中增殖诱导配体（APRIL）和caspase-3蛋白的表达及其作用机制。方法收集2009年8月~2015年4月东莞市石碣医院和广州市暨南大学附属一院病理科结肠癌切除及结肠镜活检标本共190例,其中正常结肠黏膜25例,结肠腺瘤伴轻、中、重度不典型增生各25例,结肠癌40例。采用SP法免疫组化方法检测各组黏膜中APRIL和caspase-3蛋白表达情况。结果在正常结肠黏膜、结肠腺瘤伴轻度不典型增生、伴中度不典型增生、伴重度不典型增生和结肠癌中,APRIL的表达呈逐渐增高趋势,caspase-3的表达呈递减趋势,差异有统计学意义（χ~2=21.49、12.79,P〈0.05）。APRIL的阳性表达与结肠癌患者的组织分化、淋巴结转移以及浸润程度有关（P〈0.05）,而caspase-3的阳性表达与结肠癌患者的肿瘤淋巴结转移（TNM）分期、淋巴结转移有关（P〈0.05）。经Spearman等级相关分析,40例结肠癌中APRIL和caspase-3表达呈明显的负相关性（r=-0.512,P〈0.05）。结论 APRIL的过表达和caspase-3的表达下降可能在结肠癌的发生发展过程中发挥重要作用,两者表达具有一定相关性。