Prefoldin 1对乳腺癌BT474细胞上皮-间充质转化的影响

目的探讨Prefoldin 1(PFDN1)对乳腺癌BT474细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法将PFND1基因RNA干扰真核表达载体和空白对照基因表达载体导入BT474细胞,构建转染组及空白转染组,另设未转染组。通过Transwell侵袭实验和迁移实验检测细胞侵袭和迁移能力,采用real-timePCR和western blot检测EMT标志分子E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达水平。结果转染组PFND1mRNA和蛋白表达显著低于其他两组(P <0.05)。转染组细胞侵袭和迁移能力低于其他两组(P <0.05)。转染组E-cadherin表达明显强于其他两组(P <0.05),N-cadherin、Vimentin表达明显低于其他两组(P <0.05)。结论 PFDN1能够促进乳腺癌BT474细胞EMT转化。

敲除TPX2基因可以降低乳腺癌干细胞活性及增加放疗敏感性

目的研究TPX2基因对乳腺癌干细胞活性及放疗敏感性的影响。方法使用蛋白质印迹法检测TPX2基因在乳腺癌细胞及组织中的表达情况。使用RT-PCR检测TPX2基因在乳腺癌组织及癌旁组织中的表达差异。使用慢病毒干扰载体建立稳定低表达TPX2蛋白的乳腺癌细胞。平板克隆、MTT试验验证TPX2对乳腺癌细胞生长能力的影响。流式细胞仪检测敲除TPX2之后对乳腺癌细胞凋亡比率的影响。检测CD44阳性细胞比例、肿瘤球形成能力以及侧群细胞比例,验证敲除TPX2之后对乳腺癌干细胞活性影响。结果 TPX2基因在乳腺癌组织及细胞中表达水平明显升高(P<0.05)。敲除TPX2之后,可以使乳腺癌细胞生长能力减弱并促进细胞凋亡。TPX2敲除后,可以降低乳腺癌干细胞活性及提高放疗敏感性。结论 TPX2为促进乳腺癌细胞生长的一个癌基因,其可通过提高乳腺癌干细胞活性来影响乳腺癌细胞的放疗敏感性。