银杏叶提取物对急性呼吸窘迫综合征患者的炎症影响及治疗作用研究

目的探讨银杏叶提取物对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者体内的炎症影响及治疗作用。方法将62例ARDS患者随机分为对照组(n=32)和观察组(n=30),对照组接受常规治疗,观察组在接受常规治疗的同时给予舒血宁注射液20mL/d,静脉注射,疗程7～14d。比较治疗后2组血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量的差异,并比较2组治疗后第7,14天血气分析指标及SOFA评分,比较2组生存率、机械通气时间、血管活性药物使用时间等临床指标。结果治疗后观察组血清中TNF-α、IL-6的含量明显下降,并低于对照组,差异有显著性(P<0.05);动脉血氧分压(PaO2)、氧合指数(PaO2/FiO2)、SOFA评分均有改善,并优于对照组,差异有显著性(P<0.05);观察组的生存率高于对照组,机械通气时间、血管活性药物使用时间低于对照组,差异有显著性(P<0.05)。结论舒血宁能够降低血清中TNF-α、IL-6的含量,改善ARDS患者的临床症状,提示对ARDS患者有肺保护作用。

基因重组生长激素在撤机困难并呼吸肌疲劳的慢性阻塞性肺疾病患者中的应用

目的:探讨基因重组生长激素(rhGH)在接受机械通气的慢性阻塞性肺疾病(COPD)并呼吸肌疲劳、撤机困难患者中临床应用。方法:选择28例在我院ICU住院的COPD并呼吸衰竭患者,所有患者均接受机械通气治疗,且临床表现为呼吸肌疲劳明显、撤机困难。将患者分为rhGH组和对照组各14例,rhGH组每天皮下注射rhGH0.1U/kg,对照组接受生理盐水皮下注射,直至撤离呼吸机。对比两组患者死亡率、接受机械通气时间及治疗前后血清总蛋白、白蛋白、血糖变化的差异,同时比较rhGH组的预测死亡率及实际死亡率的差异。结果:与对照组相比,rhGH组接受机械通气时间明显缩短(P<0.05),血白蛋白浓度显著升高(P<0.05),实际死亡率较预测死亡率显著降低,但血糖变化没有明显差异。结论:rhGH应用于COPD并呼吸衰竭、呼吸肌疲劳的患者,可显著缩短机械通气时间及降低患者死亡率,同时改善患者营养状态,有助于呼吸机撤离。

噻唑烷二酮类药物对急性脑损伤后IL-1β和TNF-α表达的影响

目的探讨过氧化酶增殖体激活受体-γ(PPAR-γ)激活剂噻唑烷二酮类药物对创伤性脑损伤(TBI)大鼠模型脑组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素(IL-1β)表达的影响。方法采用改进的Feeney自由落体脑损伤装置制作TBI大鼠模型,分别给予生理盐水或吡格列酮,并与假手术组大鼠比较,7d后收集脑组织,采用RT-PCR或Western Blotting法检测各组PPAR-γ mRNA、TNF-α及IL-1β的mRNA及蛋白表达差异。结果创伤性脑损伤大鼠脑组织与对照组及假手术组相比,PPAR-γ mRNA表达显著增强(P<0.05),同时TNF-α、IL-1β蛋白及mRNA表达也显著上调(P<0.05),而应用吡格列酮治疗进一步增加了大鼠脑组织PPAR-γ的表达,并有效抑制TNF-α及IL-1β的上调表达(P<0.05)。结论PPAR-γ激动剂吡格列酮对减轻创伤性脑损伤后持续存在的炎症反应具有一定的保护作用,其机制可能与降低脑组织中TNF-α及IL-1β等炎性细胞因子的含量有关。

SOCS1基因修饰对树突状细胞成熟及细胞因子分泌的影响

目的探讨细胞因子信号传导抑制因子-1(SOCS1)基因腺病毒转染对未成熟的树突状细胞(DC)的成熟及细胞因子分泌功能的影响。方法构建SOCS1腺病毒并PCR鉴定,感染体外分离、培养的小鼠骨髓DC(阳性转染组),Western blot法检测SOCS1的表达,以阴性转染组(转染Ad-GFP)及空白对照组(未经病毒转染)为对照,采用脂多糖(LPS)刺激诱导各组DC成熟,通过流式细胞术测定LPS刺激前后各组DC表面CD40及CD80的表达水平,ELISA法检测细胞因子白细胞介素(IL)-10及IL-12的分泌水平。结果成功构建并鉴定转染腺病毒,感染DC后,阳性转染组SOCS1蛋白表达水平较阴性转染组及空白对照组显著增高。LPS刺激后,阳性转染组CD40及CD80的表达较阴性转染组及空白对照组显著降低(P<0.05),IL-12分泌水平明显较低(P<0.05),而IL-10分泌水平显著增高(P<0.05)。结论通过腺病毒转染使SOCS1在DC中过度表达,不仅能有效抑制DC的成熟,还能抑制LPS介导的DC分泌细胞因子IL-12,并诱导抑制性细胞因子IL-10的分泌。

肠外营养支持治疗全身多发性骨折患者35例

目的:回顾分析全身多发性骨折患者在创伤后出现营养不良情况下给予肠外营养支持的治疗效果。方法:选择35例骨科全身多发性骨折住院患者,在获得血流动力学稳定和完全复苏后给予肠外营养支持,观察入院时、营养支持前、营养支持3、7d和14d白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白、淋巴细胞计数、血糖、血脂、电解质、肝功能的变化。结果:营养支持前与入院时比较,白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白、淋巴细胞计数有所下降且差异有统计学意义。经过肠外营养支持后,营养指标白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白、淋巴细胞计数均有上升,与营养支持前比较差异有显著意义。结论:全身多发性骨折患者给予合理的肠外营养支持,是该类患者综合治疗的必要措施之一。

白细胞介素4受体α链S786P的基因多态性

目的:检测中国汉族人群中是否存在白细胞介素4受体α链基因上S786P位点的多态性,并测定其在正常体检者和支气管哮喘患者中的基因频率和基因型频率的分布,判断它的多态性是否与支气管哮喘高度相关。方法:提取外周血白细胞的基因组DNA作为模板。通过PCR-RFLP对S786P位点多态性进行检测;计算基因频率和基因型频率并分析其与支气管哮喘的相关性。结果:在165例中国人中没有发现S786P的多态性,只存在S786,没有检测到S786/P786杂合子和P786/P786的纯合子。发现中国人群中不存在这个位点的多态性。结论:白细胞介素4受体α基因S786P在中国人群中不存在多态性,表明中国人群不适合作S786P多态性与支气管哮喘相关性的研究。

SOCS1调控未成熟树突细胞分化诱导肝移植免疫耐受及机制研究

目的探讨细胞因子信号传导抑制因子-1(Suppressors of cytokine signaling-1,SOCS1)基因腺病毒转染未成熟的树突细胞(Dendritic cells,DC),并免疫受体小鼠,通过小鼠肝移植模型,观察免疫耐受的效果并探讨可能的机制。方法构建SOCS1腺病毒并PCR鉴定,感染体外分离、培养的小鼠骨髓树突细胞,Westernblot法检测SOCS1表达。以未转染组及空白转染组为对照,免疫肝移植小鼠模型,检测受体小鼠脾脏淋巴细胞混合淋巴细胞反应(MLR),检测血清IL-2和IFN-γ水平及肝脏组织IL-2和IFN-γmRNA表达。结果成功构建并鉴定转染腺病毒,感染DC后,SOCS1蛋白表达水平较未转染组及空白转染组显著增高(P<0.05)。SOCS1基因修饰的DC免疫肝移植模型小鼠后,受体小鼠脾脏淋巴细胞MLR较未转染组及空白对照免疫受体组小鼠显著下降(P<0.05);SOCS1-DC免疫受体小鼠血清IL-2和IFN-γ水平及肝脏mRNA表达水平均显著下降(P<0.05)。结论通过腺病毒转染使SOCS1在DC中过度表达,用以体内免疫同种异体肝移植受体小鼠,能有效减轻同种移植排斥反应,并在一定程度上诱导形成免疫耐受。

应用抗菌药物血药浓度监测治疗高毒力肺炎克雷伯菌肝脓肿1例

肺炎克雷伯菌致脓性肝脓肿(KP-PLA)是一种严重威胁生命的疾病[1],自1986年文献首次报道了高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent Klebsiella pneumoniae,hvKP)引起多部位脓肿的病例后[2],关于hvKP转移性或侵袭性的感染报道逐渐增加[3]。目前多数文献为hvKP致肝脓肿的流行病学[4-5]、毒力基因~([6])等研究,对KP-PLA的治疗可见于一些病例报告,而结合血药浓度监测的KP-PLA治疗尚无报道。

综合护理干预预防呼吸机相关性肺炎的效果观察

目的观察综合护理干预预防呼吸机相关性肺炎(VAP)的临床效果.方法 100例机械通气患者作为研究对象,随机分为参照组和研究组,各50例.参照组行传统护理,研究组在参照组的基础上行综合护理干预.观察比较两组机械通气时间、VAP发生情况及护理满意度.结果研究组机械通气时间(18.67±4.26)d短于参照组的(26.71±3.57)d,差异具有统计学意义(P<0.05).研究组VAP发生率0低于参照组的8.00%,差异具有统计学意义(P<0.05).研究组护理满意度为100.00%,高于参照组的88.00%,差异具有统计学意义(P<0.05).结论在常规护理基础上行综合护理干预具有明显的预防VAP的效果,提高了护理满意度,显著缩短了机械通气时间,降低了VAP发生率,在临床上值得应用推广.

集束化护理减少非计划拔管的作用研究

目的分析集束化护理在ICU气管内插管患者非计划拔管预防管理中的应用效果。方法选取2016年6月—2017年7月收治的217例ICU气管内插管患者为常规组研究对象,纳入2017年8月—2018年9月收治217例ICU气管内插管患者为研究组观察对象。两组在治疗期间均接受常规护理,其中研究组在常规护理基础上实施集束化护理,统计两组非计划拔管总发生率及每100个机械通气日内非计划拔管发生率并进行对比。结果研究组UE总发生率为2.30%,每100个机械通气日内UE发生率为0.46%,依次低于常规组的7.37%和1.38%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在ICU气管内插管患者非计划拔管预防管理中辅以集束化护理能够切实减少非计划拔管事件的发生,维护导管的正常使用,降低护理风险。

连续性血液净化对重症脓毒症患者炎症及营养状态的影响

目的探讨连续性肾脏替代治疗（CRRT）对重症脓毒症患者体内炎症与营养状态的影响，并分析其相关性。方法本研究为前瞻、对照性研究，选取48例2004—2007年广州市第一人民医院ICU住院重症脓毒症患者进行随机分组。其中27例接受CRRT治疗，采用前稀释连续性静脉-静脉血液滤过（CVVH），21例患者仅接受常规支持治疗，所有患者均于治疗前、治疗1周及两周后分别抽血检测血浆肿瘤坏死因子（TNF-α）及C反应蛋白水平（CRP），并观察白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白及胰岛素样生长因子（IGF-1）等营养指标的变化，分析各指标改变的相关性，同时比较两组患者生存率的差异。治疗前后用配对t检验（Paired Sample t Test）及One-way ANOVA检验，相关性分析采用单因素相关分析和多因素逐步回归分析。结果270例患者接受CVVH治疗后血浆CRP及TNF-α水平明显下降（P〈0．05），而白蛋白等营养指标水平显著上升（P〈0．05），CRRT治疗组死亡率显著下降。患者前白蛋白、IGF-1水平与CRP、TNF-α水平及患者预后显著相关（P〈0．05）。结论CRRT治疗应用于重症脓毒症患者能有效的缓解炎症反应，改善患者营养状态，前白蛋白及IGF-1可能是反映重症脓毒症患者炎症和营养状态更敏感特异的指标。

血液灌流治疗对脓毒症急性肾损伤患者炎症因子的清除及肾脏保护作用

目的 探讨血液灌流（hemoperfusion,HP）治疗对重症脓毒症急性肾损伤（acute lung injury,AKI）患者体内炎症因子的清除及对肾功能的保护作用.方法 本研究为前瞻、对照研究,选取40例2007年至2009年广州市第一人民医院ICU住院脓毒症及急性肾损伤患者进行随机分组.其中22例接受血液灌流治疗,每次2 h,连续3 d,采用珠海丽珠公司HA330型大孔径中性树脂灌流器;18例仅接受常规治疗.所有患者均于治疗前,治疗3 d,7 d及14 d分别抽血检测IL-6,IL-10的水平,及C反应蛋白水平,并记录24 h尿量,Scr及相关肾小管功能指标.结果 与对照组相比,HP治疗组患者治疗后血浆CRP及IL-6IL-10水平明显下降（P＜0.05）,同时尿量显著增加,尿N,乙酰-B-氨基葡萄糖苷酶（NAG）,γ-GTP,α1-微球蛋白及血BUN,Scr水平均明显低于对照组（P＜0.05）.此外,AKI患者Ⅰ、Ⅱ期接受血液灌流治疗的患者肾功能恢复率及生存率均高于对照组（P＜0.05）.两组患者治疗前后血流动力学改变,如平均动脉压水平差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 血液灌流早期治疗脓毒症急性肾损伤患者可能通过有效清除炎症因子起到保护肾小管及促进肾功能恢复的作用.

血管外肺水指标在脓毒症合并急性肺损伤／急性呼吸窘迫综合征患者中的作用

目的应用PiCCO技术监测并比较脓毒症合并急性肺损伤（ALI）或急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者的血流动力学改变，以探讨血管外肺水与各肺损伤指标及肺内炎症因子水平的相关性。方法选取40例2009年至2010年广州市第一人民医院ICU住院脓毒症患者进行观察，其中未合并ALI／ARDS的患者作为对照组。应用PiCCO技术连续7d监测血管外肺水等血流动力学指标，并记录血气分析结果、呼吸机参数、胸片，检测血清及肺泡灌洗液中炎症因子白介素-1（IL-1）及肿瘤坏死因子-α（TNF—α）的水平。结果在40例脓毒症患者中，15例（37．5％）合并ARDS，14例（35％）合并ALl。与对照组相比，ALI及ARDS患者表现为显著增高的血管外肺水指数（EVLWI）及肺泡灌洗液中IL-1、TNF-α水平。同时，血管外肺水指数与氧合指数、肺损伤指数及IL-1、TNF—α水平呈显著相关性（r=-0．524，r=0．147，r=0．572，r=0．655；P〈0．05），且高ELVW水平组患者ICU病死率及住院病死率均显著高于低ELVW水平组。结论在脓毒症介导的ALl及ARDS患者中，血管外肺水指标与肺内炎症因子水平及肺损伤严重程度具有相关性。凼此，EVLw的检测可能对于判断脓毒症患者肺损伤程度及预后具有一定意义。

恶性高热回顾性对比分析

目的分析我国2004年至2008年恶性高热(MH)报道病例的临床资料并与以前作对比,探讨MH诊断、治疗的进展和需注意的问题。方法检索中文科技期刊全文数据库、万方数据资源系统、中国知网全文数据库、中国生物医学文献数据库,收集我国2004年至2008年报道的21例MH病例的临床资料,分析其流行病学、首发症状、临床特点、治疗及转归,并与2004年之前的病例作比较,探讨其改变。结果与2004年前相比,我国报道恶性高热的患者仍以男性为主,发病年龄较前增大,高发科室为普外科、口腔外科和神经外科,首发症状以呼气末二氧化碳分压升高为主,目前尚未推广实行咖啡因-氟脘骨骼肌离体收缩试验进行诊断,治疗上血液净化的使用是新的亮点,病死率较前有所下降。结论我国近几年来报道MH病例数、诱发药物增多,诊断、治疗水平较前提高,病死率较前下降,但仍需完善我国的MH监测体制,继续加强培训,推广咖啡因-氟脘骨骼肌离体收缩试验的应用,注意加强乳酸的动态监测,考虑推广使用丹曲洛林、建立统一标准的MH诊疗常规。

联合肠外肠内营养在重型颅脑损伤患者中的应用

目的回顾性分析重型颅脑损伤患者在创伤应激后出现营养不良情况下给予联合肠外与肠内营养支持的治疗效果。方法随机选择52例重型颅脑外伤住院患者,在获得血流动力学稳定后给予联合肠内与肠外营养支持,观察营养支持前及营养支持7、14 d时白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白、淋巴细胞计数、血糖、血脂、电解质、肝功能的变化。结果经过联合营养支持后,营养指标白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白、淋巴细胞计数均有上升,与营养支持前比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论重型颅脑损伤患者给予联合肠外肠内营养支持,是该类患者综合治疗的有效措施之一。

吡格列酮对大鼠创伤性脑损伤后炎症因子抑制作用的研究

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（PPAR-γ）及其激活剂噻唑烷二酮类药物——吡格列酮对创伤性脑损伤（TBI）大鼠模型脑组织中正常T细胞活化后表达和分泌的调节蛋白（RANTES）、巨噬细胞移动抑制因子（MIF）表达的影响。方法成年SD大鼠按照随机数字表法分为正常对照组（10只）、假手术组（10只）、TBI模型组（12只）及吡格列酮治疗组（12只）。后两组采用改进的Feeney自由落体脑损伤装置制作TBI大鼠模型，伤后18h分别给予生理盐水及20mg／（kg·d）吡格列酮治疗；假手术组不进行自由落体致伤，其余步骤同上，术后给与生理盐水治疗；正常对照组不进行任何处理。7d后收集各组大鼠脑组织，计算脑组织含水量，并采用RT—PCR及Westernblot法检测各组PPAR-γ、RANTES及MIF的mRNA、蛋白表达差异。结果与对照组及假手术组相比，TBI损伤组大鼠脑组织含水量明显增加，且PPAR-γ mRNA表达明显增强，同时RANTES、MIF mRNA及蛋白表达也明显上调；而吡格列酮治疗组大鼠脑组织PPAR-γ的表达进一步增加，RANTES及MIF表达则有所下降。结论吡格列酮对减轻创伤性脑损伤后持续存在的炎症反应及脑水肿具有一定作用，其机制可能与降低脑组织中RANTES及MTF等炎性细胞因子含量有关。

大鼠脂肪源性干细胞PDE5基因沉默对肾小管上皮细胞缺血-复氧损伤的保护作用

目的探讨慢病毒介导抑制脂肪源性干细胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）磷酸二酯酶5（phosphodiesterase5，PDE5）基因表达对缺血-复氧（ischemia／reo。ygenation，I／R）损伤的大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）增殖和凋亡的影响，以及ADSCs自身分泌功能和上皮转化功能的改变。方法分离纯化大鼠ADSCs，传代培养及鉴定；构建PDE5-shRNA慢病毒表达载体及阴性对照（NCshRNA），采用慢病毒包装系统介导建立稳定PDE5低表达的ADSCs，Western印迹法检测PDE5蛋白表达；建立肾小管上皮细胞体外I／R模型，并建立ADSCs和NRK-52E细胞的Transwell非接触共培养体系；Edu法检测各组NRK．52E细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡；ELISA法检测各组上清中肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）和成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor，FGF）水平；实时荧光定量PCR法检测E钙黏蛋白（E—cadherin）mRNA表达，流式细胞仪检测细胞角蛋白18（Cytokeratin18，CK18）的表达。结果成功构建PDE5-shRNA慢病毒表达载体，筛选并成功建立PDE5稳定低表达的ADSCs细胞系；与正常对照组相比较，I／R组NRK．52E细胞增殖率受到显著抑制，总凋亡率明显增加（P〈0．05），ADSCs共培养上清液中HGF及FGF水平升高（均P〈0．05）；而与阴性对照组相比，与PDE5-shRNA转染组ADSCs共培养的NRK-52E细胞增殖显著增加，凋亡率明显下降，且HGF、FGF水平进一步升高，ADSCs上皮细胞标志物E—cadherin及CK18均表达显著增加，以上差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论本研究应用慢病毒载体介导ADSCs稳定低表达PDE5，可能通过促进干细胞分泌多种生长因子，有效改善肾小管细胞I／R状态下增殖及凋亡，同时促进自身向上皮细胞分化，为干细胞体内移植治疗肾脏缺血再灌注损伤中增加肾小管上皮细胞的生存活力、提升干细胞治疗效能提供了初步的实验基础。

亚低温治疗急性呼吸窘迫综合征患者对炎性反应影响及肺保护作用的研究

目的 探讨亚低温治疗对急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者血清炎性介质水平、肺功能保护及临床预后的影响.方法 本研究为对照性研究,选取56例1997-2007年住院的ARDS患者按入院时查分组表进行随机分组.其中29例接受常规治疗加亚低温治疗（治疗组）,27例仅接受常规治疗（对照组）.所有患者均于治疗前及治疗后3、7 d时抽血检测血浆肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）及C反应蛋白（CRP）水平,同时记录患者氧合指数、SOFA评分及肺损伤性评分,比较28 d内两组患者生存率等临床指标,并详细记录各种不良反应.结果 治疗组TNF-α、IL-6及CRP水平均显著低于对照组,同时氧合指数、SOFA评分及肺损伤性评分亦较对照组明显改善（P〈0.05）;且28 d内治疗组生存率高于对照组[65.5%（19/29）比51.9%（14/27）],而机械通气时间[（11.9±3.6）d比（17.0±5.1）d]、ICU住院时问[（14.1±4.2）d比（21.5±7.7）d]明显缩短（P〈0.05）.结论 亚低温治疗能显著缓解ARDS患者机体炎性反应,有效改善肺部氧合及短期预后.

吡格列酮对缺血-再灌注损伤大鼠皮质神经元的保护作用

目的 探讨过氧化物酶增值物激活受体-γ（PPAR-γ）及其激活剂噻唑烷二酮类药物．吡格列酬（pioglitazone）对缺血-再灌注损伤大鼠皮质神经元肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素（IL-1β）表达的影响。方法采用原代培养的皮质神经元，通过去除培养液中的糖和氧，模拟缺血缺氧，恢复糖氧供给模拟再灌注。再灌注时分别加用普通培养或含吡格列酮20μmol／L培养基分别再培养6h后，以上各组及正常细胞组均采用RT-PCR检测PPAR—γ mRNA表达，MTT法检测细胞活性，同时免疫蛋白印记法检测TNF-α，IL-1β蛋白表达。统计学采用单因素方差分析进行统计处理。结果与正常细胞对照组相比，缺血-再灌注组细胞存活率显著下降，且PPAR—γ mRNA表达明显增强，同时TNF—α及IL-1β蛋白表达及分泌均显著上调，而应用pioglitazone治疗进一步增加了大鼠脑组织PPAR-γ的表达，并有效抑制TNF-α及IL-1β的上调表达及分泌，以上差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论PPAR-y激动剂吡格列酮对减轻神经元缺血-再灌注损伤具有一定的保护作用，其机制可能与减轻损伤时细胞炎症反应有关。