富血小板血浆对血管内皮细胞增殖及血管形成的影响

目的:探讨富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein vessel endothelial cells,HUVECs)增殖及体外形成血管的影响。方法:体外培养HUVECs细胞系,二次离心法制备自体富血小板血浆,将细胞分为实验组与对照组,实验组以含5%、10%、20%自体富血小板血浆的条件培养液干预,对照组不进行干预。采用四甲基偶氮唑蓝(XTT)法测定HUVECs的增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期,体外成管实验检测细胞形成血管的能力。结果:富血小板血浆实验组较对照组细胞形态饱满、密度增大;XTT比色法显示各浓度实验组细胞增殖与对照组比较明显增高(P<0.01);流式细胞仪检测实验组S期细胞明显增多(P<0.01);体外成管实验显示实验组细胞能形成完整的管状结构,小管面积明显大于对照组(P<0.01),对照组小管形成结构不完整、面积小于实验组(P<0.05)。结论:PRP能在体外明显促进HUVECs的增殖及形成毛细血管腔,在组织再生或修复过程中可能发挥促新生血管形成的作用。

胸腔积液蛋白质图谱差异及其临床意义初探

目的探讨表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术(SELD I-TOF-MS技术)对胸腔积液鉴别诊断的价值。方法用SELD I-TOF-MS技术检测33例诊断明确的胸水标本及部分相应血清标本。结果良恶性胸腔积液组血清标本蛋白信号无明显差别,但胸液标本有6个蛋白信号有差异;胸液中存在的M3945.52 Da、M8944.86 Da蛋白差异对渗出性胸液的良恶性判断有鉴别价值;漏出性胸液及其相应血清标本蛋白含量和成分差异较大,无分析价值。结论SELD I-TOF-MS技术对渗出性胸腔积液的良恶性鉴别有实用前景。

富血小板血浆对体外培养人脂肪来源干细胞增殖及成脂分化的作用

目的观察富血小板血浆对体外培养的人脂肪来源干细胞增殖与成脂能力的影响。方法用酶消化法获取人脂肪来源干细胞,二次离心法制备自体富血小板血浆,将细胞分为实验组与对照组,实验组以含5%、10%、20%自体富血小板血浆的条件培养液干预,对照组不进行富血小板血浆干预。观察细胞形态学,以XTT比色法测定细胞增殖状况,油红O染色检测细胞成脂活性。结果富血小板血浆实验组较对照组细胞形态饱满、密度增大;XTT比色法显示实验组细胞增殖明显(P<0.01);实验组油红O染色阳性率较对照组增高明显(P<0.01)。结论富血小板血浆对体外培养的人脂肪来源干细胞增殖与成脂分化活性具有显著的促进作用。

^(125)Ⅰ低剂量率照射对鼻咽癌细胞CNE-2的杀伤效应

目的探讨125I低剂量率照射对鼻咽癌细胞CNE-2的杀伤效应。方法用冷光源为对照,125I粒子照射鼻咽癌CNE-2细胞,MTT、流式细胞术和细胞迁移体系观察细胞的增殖、凋亡、细胞周期和迁移的变化。结果照射后细胞增殖能力逐渐下降,其中24 h与对照组差异有统计学意义(P<0.05),48 h较6 h和12 h差异有统计学意义(P<0.05);照射后细胞凋亡逐渐增加,24 h后接近半数,72 h后达70%以上;照射后处于G1期的细胞逐渐减少,12 h与对照组差异有统计学意义(P<0.05),且较6 h明显减少(P<0.05);处于G2/M期的细胞逐渐增加,12 h较对照组差异有统计学意义(P<0.05),且较6 h增加明显(P<0.05);处于S期的细胞比例相对稳定。照射后细胞的迁移逐渐减少,照射后24 h较对照组减少明显(P<0.05),之后数量稳定,照射后24 h较6 h时减少明显(P<0.05)。结论 125I低剂量率照射在体外能有效杀伤鼻咽癌细胞CNE-2,并抑制其迁移。

再生障碍性贫血模型小鼠骨髓造血细胞CD95和Bcl-2的表达

目的探讨再生障碍性贫血模型小鼠骨髓造血细胞凋亡过程中CD95和Bcl-2的表达以及相互之间的关系。方法用辐射和免疫介导的方法制造小鼠的再生障碍性贫血模型。用流式细胞术分析模型组和正常对照组CD34＋细胞和CD45^＋细胞，以及细胞表面CD95和胞内Bcl-2的表达。结果模型组骨髓细胞中低表达CD45的CD34＋细胞（CD34^＋CD45^＋low细胞）比例低于对照组[（0．85±0．19）％比（1．21±O．28）％，P〈0．05]。有核细胞中，CD95在模型组中的表达比例明显高于对照组[（66．30±7．68）％比（42．78±15．12）％]，在这2组CD34±CD45±细胞的表达分别为（69．21±9．36）％和（22．31±3．33）％，CD34^＋CD45low细胞的表达分别为（53．70±16．46）％和（7．68±4．42）％，均P〈0．01。Bcl-2的表达比例仅在模型组CD34±CD45low细胞中增加，与对照组相比差异有统计学意义（7．60±2．40）％比（0．70±0．64）％，P〈0．05]。对照组细胞的CD95与Bel-2表达无相关，而模型组CD34＋CD45＋和CD34＋CD45low细胞中，CD95与Bcl-2表达均呈负相关（r分别为-0．93和-0．81，P〈0．05）。结论冉生障碍性贫血模型小鼠中，骨髓中造血细胞的比例下降，有核细胞和CD34＋细胞的CD95表达比例升高，凋产明显，针对不同的凋亡指标进行相应捌节，可能是有效治疗再生障碍性贫血的途径之一。