中国医师协会烧伤科医师分会2018年年会纪要

由中国医师协会烧伤科医师分会主办的“中国医师协会烧伤科医师分会2018年年会”于2018年11月16-18日在广东省广州市顺利召开,300余名烧伤科医师代表出席了本次会议。会议紧密结合临床实际需求,以院士讲座、专题报告、专题讨论和疑难、复杂病例讨论为主。针对我国烧伤专科的发展现状和面临挑战、烧伤专科医师培养的现状和问题等,特别邀请了相关专家做专题报告和进行讨论。会议期间召开了中国医师协会烧伤科医师分会换届选举大会,选举产生了第四届委员会,彭毅志教授当选会长。

烧伤专科重症监护病房建设和管理的实践与思考

严重烧伤病程中，会涉及烧伤休克与液体复苏、呼吸支持、营养支持、肾损伤与肾替代及脓毒症和MODS的防治等诸多重症医学问题。在严重烧伤患者治疗过程中，除创面处理外，也需要进行诸多重症医学常用的操作和器官功能监护以及采用相关支持技术。

四例严重烧伤患者并发早期急性肾损伤的原因及治疗方法分析

目的分析4例严重烧伤患者并发早期急性肾损伤(AKI)的原因并探讨相关治疗方法。方法回顾性分析2014年6月-2017年12月暨南大学医学院附属广州红十字会医院(下称笔者单位)收治的4例严重烧伤并发早期AKI患者的临床资料。患者均为男性,年龄为23~33(30±5)岁,烧伤深度深Ⅱ~Ⅲ度,并发四肢肌筋膜室综合征和不同程度的横纹肌损伤,均经外院治疗后转入笔者单位。将患者按烧伤总面积从小到大编号,1、2、3、4号患者烧伤总面积分别为10%、80%、90%、95%体表总面积,并发早期AKI时间分别为伤后48、11、29、48 h,转入笔者单位时间分别为伤后60、11、29、144 h。2、3号患者转入院时已出现低血容量性休克。4例患者转入院后均行连续性肾脏替代治疗(CRRT),在血流动力学监测和器官功能监护的支持下,积极对并发肌筋膜室综合征的四肢行切开、彻底减压探查,清除已坏死的肌肉组织或行截肢术。对四肢焦痂切开减压后创面,采用桀亚敷料皮或猪皮临时覆盖、多次清创并结合负压封闭引流治疗形成新鲜肉芽创面后,和其他分期切削痂创面,分别用自体皮行Meek植皮及微粒皮、网状皮、小皮片移植等覆盖。记录患者治疗结局,行CRRT时间,手术次数,血肌酐、肌红蛋白恢复正常时间,住院时间及随访情况。结果本组4例患者转入笔者单位后均治愈,其中1、4号患者共5个患肢因并发肌筋膜室综合征并有大量肌肉坏死无法保留,行截肢术。1、2 3 4号患者分别行19、35、14、25 d CRRT,行5、6、10、8次手术,于转入院后22、35、37、48 d血肌酐恢复正常,于转入院后18、28、25、30 d血肌红蛋白恢复正常,于住院52、105、148、156 d创面基本愈合后出院。随访1~36个月,4例患者肾功能均元异常。结论1、4号患者早期AKI由严重烧伤并发肌筋膜室综合征导致横纹肌溶解所致,另2例还与低血容量性休克、肾灌注不足有关。在行CRRT的同时积极去除病因,在血流动力学监测和器官功能支持下积极手术治疗烧伤创面等,可有效提高严重烧伤并发早期AKI救治成功率。

人增生性瘢痕成纤维细胞中SnoN的表达及其参与增生性瘢痕形成的机制

目的探讨人增生性瘢痕Fb中SnoN的表达及其参与增生性瘢痕形成的机制。方法收集笔者单位2013年1—10月收治的8例烧伤后瘢痕增生需行手术治疗患者的增生性瘢痕组织及其手术切除的全层皮肤供皮区的正常皮肤组织。组织块培养法分离人增生性瘢痕Fb和正常皮肤Fb，并进行传代培养，取第3～5代细胞进行以下实验。（1）取增生性瘢痕Fb和正常皮肤Fb，蛋白质印迹法检测2种细胞中SnoN的蛋白表达。（2）另取增生性瘢痕Fb和正常皮肤Fb，RT—PCR法检测2种细胞中SnoNmRNA表达。（3）另取增生性瘢痕Fb和正常皮肤Fb，加入10ng／mLTGF-β1，刺激30min和1、2、6h后，同前检测未刺激及刺激后2种细胞中SnoN的蛋白及mRNA表达。对数据行单因素方差分析、独立样本t检验。结果（1）增生性瘢痕Fb中SnoN的蛋白表达量为0．020±0．003，明显低于正常皮肤Fb的0．032±0．005（t=7．19，P〈0．05）。（2）增生性瘢痕Fb中SnoNmRNA表达量为0．407±0．157，与正常皮肤Fb的0．339±0．095无明显差异（t=-1．29，P〉0．05）。（3）正常皮肤Fb中SnoN蛋白表达量在TGF—β1刺激下呈时间依赖性增高，刺激30min和1、2、6h，细胞中SnoN蛋白表达量均明显高于未刺激细胞（t值为2．27～27．89，P值均小于0．05）。增生性瘢痕Fb中SnoN蛋白表达量在TGF—β1刺激下呈时间依赖性降低，刺激30min和1、2、6h，细胞中SnoN蛋白表达量均明显低于未刺激细胞（t值为10．80—13．85，P值均小于0．05）。（4）正常皮肤Fb和增生性瘢痕Fb中SnoNmRNA表达量在TGF-β1刺激下均呈时间依赖性增高，2种细胞刺激30min和1、2、6h，其SnoNmRNA表达量均明显高于未刺激细胞（t值为18．16～58．22，P值均小于0．05）。结论增生性瘢痕Fh中SnoN蛋白表达减少，导致其对TGF-β1信号抑制作用减弱，从而放大了TGF-β1信号，可能参与了增生性瘢痕的形成。

沉默Smad泛素化调节因子2基因对人增生性瘢痕成纤维细胞功能的影响

目的探讨沉默Smad泛素化调节因子2（Smurf2）基因对人增生性瘢痕Fb分泌TGF－β1、α平滑肌肌动蛋白（α－SMA）、Ⅰ型胶原的影响。 方法取9例烧伤后增生性瘢痕患者的正常皮肤组织和瘢痕组织，用组织块法培养人正常皮肤Fb和增生性瘢痕Fb，将2种第3代Fb均按随机数字表法分成6组，每组9孔。空白对照组，不加任何小干扰RNA培养72 h；阴性对照组，转染非靶向的小干扰RNA培养72 h；Smurf2小干扰RNA转染组，转染100 nmol/L的Smurf2小干扰RNA培养72 h；空白对照＋TGF－β1组，不加任何小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF－β1刺激6 h；阴性对照＋TGF－β1组，转染非靶向的小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF－β1刺激6 h；Smurf2小干扰RNA转染＋TGF－β1组，转染Smurf2小干扰RNA培养72 h后加入10 ng/mL TGF－β1刺激6 h。（1）分别采用蛋白质印迹法、RT－PCR法检测2种细胞空白对照组、阴性对照组、Smurf2小干扰RNA转染组Smurf2的蛋白和mRNA表达。（2）采用ELISA法检测2种细胞空白对照组和Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF－β1含量。（3）采用蛋白质印迹法检测2种细胞6组α－SMA的蛋白表达，ELISA法检测2种细胞6组细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量。（4）采用RT－PCR法检测2种细胞6组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达。以上实验中各组样本数均为9。对数据行析因设计方差分析、Bonferroni法检验。 结果（1）2种细胞Smurf2小干扰RNA转染组中Smurf2的蛋白和mRNA表达量均明显低于空白对照组和阴性对照组（P值均小于0.05），空白对照组和阴性对照组中Smurf2的蛋白和mRNA表达量均相近（P值均大于0.05）。（2）增生性瘢痕Fb空白对照组和Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF－β1含量分别为（4.34±0.56）、（2.14±0.28）pg/mL，均明显高于正常皮肤Fb的（1.52±0.20）、（1.41±0.18）pg/mL（P值均小于0.05）。增生性瘢痕Fb中，Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF－β1含量明显低于空白对照组（P〈0.05）；正常皮肤Fb中，Smurf2小干扰RNA转染组细胞培养上清液中TGF－β1含量与空白对照组相近（P〉0.05）。（3）2种细胞空白对照＋TGF－β1组α－SMA蛋白表达量和细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量均明显高于空白对照组（P值均小于0.05），阴性对照＋TGF－β1组α－SMA蛋白表达量和细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量均明显高于阴性对照组（P值均小于0.05），Smurf2小干扰RNA转染组α－SMA蛋白表达量和细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量均与空白对照组和阴性对照组相近（P值均大于0.05），Smurf2小干扰RNA转染＋TGF－β1组α－SMA蛋白表达量和细胞培养上清液中Ⅰ型胶原含量均明显低于空白对照＋TGF－β1组和阴性对照＋TGF－β1组（P值均小于0.05）。（4）2种细胞空白对照＋TGF－β1组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达量均明显高于空白对照组（P值均小于0.05），阴性对照＋TGF－β1组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达量均明显高于阴性对照组（P值均小于0.05），Smurf2小干扰RNA转染组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达量均与空白对照组和阴性对照组相近（P值均大于0.05），Smurf2小干扰RNA转染＋TGF－β1组α－SMA和Ⅰ型胶原的mRNA表达量均明显低于空白对照＋TGF－β1组和阴性对照＋TGF－β1组（P值均小于0.05）。 结论沉默人增生性瘢痕Fb中Smurf2基因，可减少TGF－β1的自分泌及抑制TGF－β1诱导的α－SMA表达和Ⅰ型胶原合成。

地塞米松通过Wnt/β-catenin信号通路诱导腭裂的实验研究

目的探讨地塞米松对腭发育关键时期腭突间充质细胞和上皮细胞增殖和凋亡的影响,以及Wnt/β-catenin信号通路的分子关联作用。方法将80只怀孕8.5 d(E8.5)的C57孕母鼠平分为两组,地塞米松组行腹腔注射地塞米松(8 mg·kg^(-1)·d^(-1)),对照组注射等量0.9%氯化钠溶液,持续至E12.5,分别取E13.5、E14.5、E15.5和E17.5的胎鼠头部制成石蜡切片,苏木精-伊红染色观察腭突的形态,Brd U和荧光TUNEL染色分别检测腭突细胞的增殖和凋亡情况,Western blot检测腭突细胞的Wnt/β-catenin信号通路活性。χ~2检验分析组间细胞增殖的差异,t检验分析组间细胞凋亡的差异。结果在E13.5阶段,对照组前部腭突间充质细胞增殖率为(40.1±7.4)%,地塞米松组增殖率为(35.5±8.2)%,差异无统计学意义(χ~2=3.16,P=0.075)。在E14.5阶段,对照组前部腭突间充质细胞增殖率为(50.3±10.0)%,地塞米松组增殖率为(32.9±8.8)%,差异有统计学意义(χ~2=5.229,P=0.011)。在E15.5阶段,对照组前部腭突间充质细胞增殖率为(31.3±6.5)%,地塞米松组增殖率为(18.5±5.7)%,差异有统计学意义(χ~2=4.433,P=0.02)。但各时间点后部腭突间充质细胞和上皮细胞的增殖差异均无统计学意义。地塞米松组腭突Wnt/β-catenin信号通路的活性显著下降。结论地塞米松通过下调Wnt/β-catenin信号通路抑制腭突间充质细胞的增殖而导致腭裂发生。

大鼠脂肪来源干细胞对紫外线造成的软骨细胞DNA损伤的修复作用研究

目的探讨大鼠脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)对紫外线照射造成的软骨细胞DNA损伤的修复作用。方法取3~4周龄SD大鼠(体质量100~120 g)腹股沟脂肪,利用Ⅰ型胶原酶消化法体外分离培养ADSCs并传代;取第3代细胞采用流式细胞仪检测其表面相关标记,行成骨及成脂诱导鉴定其多向分化潜能。另取SD大鼠关节软骨,利用酶消化法分离培养软骨细胞并传代,并行甲苯胺蓝染色鉴定。取第3代软骨细胞,采用40 J/m^2剂量紫外线照射;照射后细胞分别以正常培养基培养(照射组)、以含ADSCs培养上清的培养基培养(ADSCs上清组)或与ADSCs共培养(ADSCs组)24h。以不进行紫外线照射的正常第3代软骨细胞作为对照(对照组)。采用MTS法检测细胞增殖情况,免疫荧光染色、Western blot法检测软骨细胞DNA损伤标志蛋白磷酸化组蛋白2A变异体(phosphorylatedhistone family 2A variant,γH2AX)的表达情况。结果经流式细胞仪检测及成骨、成脂诱导鉴定,所培养细胞为ADSCs。对照组、照射组及ADSCs上清组吸光度(A)值分别为2.20±0.10、1.34±0.04、1.57±0.06,照射组及ADSCs上清组显著低于对照组,照射组显著低于ADSCs上清组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光染色示,照射组、ADSCs上清组及ADSCs组γH2AX蛋白荧光强度明显高于对照组,但ADSCs上清组及ADSCs组γH2AX蛋白荧光强度明显弱于照射组,ADSCs组和ADSCs上清组则无明显区别。Western blot法检测示,照射组、ADSCs上清组及ADSCs组γH2AX蛋白相对表达量均明显高于对照组,但ADSCs上清组及ADSCs组显著低于照射组,差异均有统计学意义(P<0.05);ADSCs组和ADSCs上清组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠ADSCs有助于恢复紫外线照射后的软骨细胞的增殖,降低DNA损伤标志蛋白γH2AX的表达,对紫外线照射所致软骨细胞损伤具有修复作用。

整合素连接激酶在皮肤创面愈合中的作用及其相关机制研究进展

整合素连接激酶（ILK）是1996年Hannigan等以整合素β1胞质结构域为诱饵，运用酵母双杂交筛选系统发现的一种胞内丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶，其可在整合素信号通路中介导ECM与细胞之间的信号传递，调节细胞的增殖、迁移、分化等。ILK与多种肿瘤及肾间质纤维化等密切相关，但其在皮肤创面愈合过程中的作用近年来才得到学者们的关注。本文主要就ILK在皮肤创面愈合过程中增殖修复期的作用及其相关机制作一综述。

不忘初心救危急 砥砺奋进攀高峰

暨南大学医学院附属广州红十字会医院烧伤整形科的建设发展，紧跟国内烧伤学科发展的步伐。60年来，从几张床位、几名外科医师，发展到今天拥有3个病区、100张床位、近100名医护人员的队伍，以重症烧伤救治为特色，集医疗、教学、科研于一体的烧伤专科。近十几年来，学科发展紧跟形势的变化，开展亚专科建设，在重症烧伤救治网络建设、烧伤专科重症监护病房建设和管理、危重烧伤患者多器官功能障碍综合征的综合防治等方面，已形成明显专业特色，在行业内享有良好声誉。我们将继续保持“烧伤人”救急、救危、救难的专业精神，不忘初心，砥砺奋进，不断提高专业技术水平，努力建设区域性烧伤救治中心，为烧伤学科的发展做出更多贡献。